Método para tratar una cantidad extracorpórea de sangre de un donante de médula ósea o de células troncales,

siendo dicho método ejecutado con vistas a suprimir selectivamente la respuesta inmunológica de dicho futuro donante antes de trasplantar la médula ósea o las células troncales de dicho donante al futuro receptor,

comprendiendo dicho método los pasos de

(a) tratar una cantidad extracorpórea de sangre del donante para inducir al menos uno de los miembros del grupo que consta de la apoptosis o la necrosis de las células T que están presentes en la cantidad extracorpórea de sangre, estando dichas células T presentes en dicha cantidad extracorpórea de sangre como una respuesta inmunológica de dicho donante a la piel sacada de cada uno de los progenitores biológicos del futuro receptor y aloinjertada al donante de dicha médula ósea o de dichas células troncales;

(b) tratar la cantidad extracorpórea de sangre del donante haciendo que la sangre fluya a través de un aparato que tiene conductos de plástico;

(c) incubar la cantidad extracorpórea de sangre

Método para inducir una respuesta inmune selectivamente suprimida.

Ámbito de la invención

La presente invención está dirigida a los métodos que reducen la probabilidad de enfermedad de injerto contra huésped en los receptores de trasplantes de médula ósea/células troncales, y que implican el procedimiento de Transinmunización que es llevado a cabo en el donante y redunda en que se hace al donante tolerante a toda la gama de antígenos de histocompatibilidad que pueden caracterizar a los tejidos del receptor.

Antecedentes de la invención

A fin de incrementar la seguridad y la eficacia de los trasplantes de tejidos u órganos o de determinar y permitir una mejorada valoración de la inmunoterapia anticáncer, pueden ponerse aloinjertos de piel en un futuro receptor de trasplante de órgano, donde los aloinjertos de piel inducen una simulación del rechazo inmune del trasplante de órgano planificado que normalmente se produce cuando los individuos reciben órganos o tejidos trasplantados, tales como médula ósea o células troncales, de individuos genéticamente diferentes. Este rechazo simulado en la piel, seguido de un proceso al que aquí se denomina Transinmunización, permite que el sistema inmune del receptor quede entrenado para aceptar tejido del futuro donante. Cuando células dendríticas con carga tumoral, que simulan células tumorales antigénicas, son introducidas en la dermis del paciente de cáncer para inducir respuestas locales de las células T antitumorales, esto permite la determinación y la valoración terapéutica del nivel de inmunidad antitumoral inducida por la Transinmunización.

En la situación del trasplante, se usa piel aloinjertada en conjunción con un procedimiento al que se denomina Transinmunización para prolongar la supervivencia en los receptores de órganos o tejidos trasplantados tales como médula ósea, células troncales o piel donados por individuos genéticamente distintos. La Transinmunización es un proceso con el cual se induce a los monocitos de la sangre a diferenciarse en células dendríticas, y las células dentríticas inducidas pueden ser luego cargadas con antígenos tisulares. En ciertas circunstancias en las cuales los antígenos son distintivos de cánceres, las células dendríticas cargadas pueden ser usadas para "vacunar" o inmunizar al paciente contra las células de cáncer. En otras situaciones en las cuales el paciente es el futuro receptor de un órgano trasplantado, las células dendríticas cargadas pueden ser usadas para suprimir las reacciones inmunológicas que de otro modo serían capaces de ocasionar un rechazo del órgano trasplantado.

Las células dendríticas fagocitan las células T antiinjerto de un potencial receptor de un trasplante. Estas células T antiinjerto son inducidas en el futuro receptor del trasplante como resultado de un aloinjerto de piel del potencial donante del trasplante. Puesto que la piel aloinjertada contiene los mismos antígenos de trasplante que tipifican al potencial órgano trasplantado, las células T antiinjerto inducidas por el pequeño aloinjerto de piel son precisamente las que serían inducidas de manera natural por el propio trasplante de órgano. Las células dendríticas, cargadas con antígenos de las células T antiinjerto, son infundidas en el potencial receptor del trasplante, conduciendo a una respuesta inmunológica que suprime la actividad de las células T antiinjerto. Esta respuesta inmunológica a los clones de las células T inducidas puede reducir la capacidad de las células T antiinjerto en el receptor del trasplante de órgano para atacar y dañar al órgano trasplantado. Debido a su pequeño tamaño y a lo sencillo que es su trasplante, antes del trasplante del futuro órgano de mayor tamaño pueden ponerse adicionales aloinjertos de piel para determinar cuándo el paciente ha sido correctamente preparado para recibir el futuro órgano. Cuando el pequeño aloinjerto de piel trasplantado es inmunológicamente tolerado (no es objeto de un rechazo agudo) por el futuro receptor del órgano, el paciente habrá sido eficazmente preparado para recibir el trasplante de órgano planificado.

Para acrecentar la tolerancia inmunológica del receptor al órgano trasplantado, pueden aportarse células apoptóticas o necróticas del donante a las células dendríticas inmaduras del receptor. Las células dendríticas inmaduras, que presentan en su superficie antígenos distintivos de los tejidos del donante, son capaces de suprimir la actividad de todos los clones de células T antialoinjerto. Por consiguiente, el aportar células (como p. ej. leucocitos o células cultivadas de cualquier tipo) del donante a las células dendríticas inmaduras del receptor y luego reinfundir esas células dendríticas inmaduras cargadas de antígenos puede contribuir en gran medida a la tolerancia inmunológica del aloinjerto. Esta variante de la Transinmunización puede usarse independientemente del método de carga con células T anteriormente descrito o bien en conjunción con el mismo.

El trasplante de órganos, tejidos o células de una persona genéticamente distinta (donante) a otra (receptor) es obstaculizado por el rechazo inmunológico del receptor a los órganos o células donados. Se entiende que este fenómeno de rechazo implica a mecanismos tanto celulares como humorales, que son respectivamente mediados por células T y anticuerpos. El sistema inmune del receptor apunta a los antígenos de histocompatibilidad distintivos en las células trasplantadas. Excepto en casos raros, los antígenos de histocompatibilidad del donante no coincidirán exactamente con los antígenos de histocompatibilidad del receptor, y el sistema inmune del receptor ataca a los órganos o células del donante incompatible.

Con respecto al rechazo mediado inmunológicamente, los más potentes de los antígenos de histocompatibilidad son los complejos mayores de histocompatibilidad (MHC) que son conocidos como los antígenos de los leucocitos humanos HLA-A, HLA-B y HLA-C. A pesar de haber sido originalmente definidos por su presencia en las membranas celulares de los leucocitos humanos, hace mucho tiempo que se ha reconocido que dichos antígenos están presentes en virtualmente todas las células nucleadas del cuerpo humano. Puesto que cada persona recibe genes que codifican un conjunto de los antígenos de cada progenitor, las células humanas típicamente expresan seis antígenos HLA mayores. Además de los antígenos mayores de histocompatibilidad, hay varios antígenos menores de histocompatibilidad.

Al proceder a trasplantar tejidos o células, es deseable igualar en la máxima medida posible los antígenos de histocompatibilidad del donante y del receptor. La mejor coincidencia inmunológica entre donante y receptor es la que se da entre los gemelos idénticos, puesto que los mismos comparten los mismos seis antígenos HLA mayores. Por añadidura, los gemelos idénticos también comparten los mismos antígenos menores de histocompatibilidad, y por consiguiente los órganos o células trasplantados de un gemelo idéntico al otro son tolerados inmunológicamente. En la situación mucho más común en la cual el donante y el receptor no son genéticamente idénticos, regularmente se da un cierto nivel de rechazo inmunológico del tejido trasplantado. Para minimizar este rechazo y permitir la supervivencia del tejido injertado, se hacen rutinariamente esfuerzos para hallar la mejor coincidencia entre donante y receptor. Si no está disponible un gemelo idéntico, la siguiente mejor elección es típicamente un hermano no idéntico del receptor que comparta los mismos seis antígenos HLA mayores, la cual es una situación que se da por término medio en uno de cada cuatro hermanos. Tal coincidencia de seis de seis HLA entre hermanos es preferible a una coincidencia de seis de seis entre individuos no emparentados, porque los hermanos coincidentes también más probablemente compartirán al menos algunos antígenos menores de histocompatibilidad heredados de sus progenitores comunes. Sin embargo, debido al hecho de no ser hermanos idénticos, hay una alta probabilidad de cierta diferencia en los antígenos menores de histocompatibilidad, y el donante y el receptor serán casi con certeza lo suficientemente distintos en términos de los antígenos celulares como para que se produzca un cierto nivel de rechazo a continuación de un trasplante de tejido de un hermano a otro.

Las reacciones adversas que siguen al trasplante de un órgano o tejido de un individuo genéticamente distinto a otro pueden ser profundamente peligrosas. La reacción adversa primaria es el rechazo inmunológico del órgano o tejido trasplantado. Si el órgano es sustentador de la vida,...

1. Método para tratar una cantidad extracorpórea de sangre de un donante de médula ósea o de células troncales, siendo dicho método ejecutado con vistas a suprimir selectivamente la respuesta inmunológica de dicho futuro donante antes de trasplantar la médula ósea o las células troncales de dicho donante al futuro receptor,

comprendiendo dicho método los pasos de

(a) tratar una cantidad extracorpórea de sangre del donante para inducir al menos uno de los miembros del grupo que consta de la apoptosis o la necrosis de las células T que están presentes en la cantidad extracorpórea de sangre, estando dichas células T presentes en dicha cantidad extracorpórea de sangre como una respuesta inmunológica de dicho donante a la piel sacada de cada uno de los progenitores biológicos del futuro receptor y aloinjertada al donante de dicha médula ósea o de dichas células troncales;

(b) tratar la cantidad extracorpórea de sangre del donante haciendo que la sangre fluya a través de un aparato que tiene conductos de plástico;

(c) incubar la cantidad extracorpórea de sangre.

2. El método de la reivindicación 1, donde la apoptosis de las células T que están presentes en la cantidad extracorpórea de sangre es inducida añadiendo un agente fotoactivable capaz de inducir la apoptosis en las células T a la cantidad extracorpórea de sangre, e irradiando la cantidad extracorpórea de sangre.

3. El método de la reivindicación 2, donde el agente fotoactivable es 8-MOP.

4. El método de la reivindicación 3, donde la apoptosis o necrosis de las células T que están presentes en la cantidad extracorpórea de sangre es inducida tratando la sangre usando un tratamiento seleccionado de entre los miembros del grupo que consta de shock por calor, radiación ultravioleta, shock por frío, irradiación con rayos X, irradiación gamma, presión hidrostática y soluciones hipotónicas.

5. El método de la reivindicación 1, donde la cantidad extracorpórea de sangre es incubada por espacio de un periodo de tiempo de 6 a 48 horas.

6. El método de la reivindicación 5, donde la cantidad extracorpórea de sangre es incubada por espacio de un periodo de tiempo de 12 a 24 horas.

7. El método de la reivindicación 1, donde antes del paso (a) el método comprende adicionalmente el paso de:

separar los monocitos y las células T de la cantidad extracorpórea de sangre del donante sometiendo a la sangre a un proceso de leucaféresis.

8. El método de la reivindicación 2, donde los pasos de irradiar la cantidad extracorpórea de sangre y de tratar la cantidad extracorpórea de sangre haciendo que la sangre fluya a través de un aparato que tiene conductos de plástico son llevados a cabo en un aparato de Fotoféresis.

9. El método de la reivindicación 1, donde la cantidad extracorpórea de sangre es tratada haciendo que la sangre fluya a través de un aparato que tiene conductos de plástico de un diámetro de 1 mm o menos.