EXTRACTO SOLUBLE EN AGUA DE UNA PLANTA DEL GENERO SOLANUM Y PROCEDIMIENTO DE PREPARACION DEL MISMO, Y COMPOSICION FARMACEUTICA QUE CONTIENE EL EXTRACTO SOLUBLE EN AGUA.

Un extracto soluble en agua de una planta del género Solanum que comprende al menos 60% de solamargina y de solasonina

Extracto soluble en agua de una planta del género Solanum y procedimiento de preparación del mismo, y composición farmacéutica que contiene el extracto soluble en agua.

Esta invención se refiere a extractos solubles en agua de una planta del género Solanum, sus procesos de preparación y las composiciones farmacéuticas que los contienen.

El cáncer es globalmente una de las principales causas de muerte y el cáncer de pulmón, el cáncer de hígado y el cáncer de mama son los más comunes. Aunque el mecanismo de desarrollo del cáncer todavía no ha sido totalmente comprendido, se cree que el inicio del cáncer en un sujeto puede ser producido por una división celular anormal e incontrolable que se produce en dicho sujeto (Chen. P. L. et al. (1990), Science, 250, 1576-1580; Finlay, C. A. et al. (1989), Cell, 57, 1083-1093, y Baker, S. J. et al. (1990) Science, 249, 912-915).

Generalmente, el crecimiento y la diferenciación de las células en un cuerpo humano o animal están controlados estrictamente por las hormonas del crecimiento presentes en el cuerpo humano o animal. Cuando las células acumulan en ellas mutaciones genéticas producidas por factores intrínsecos y/o extrínsecos, dichas células generarán transmisiones de señal incorrectas que, a su vez, conducen al crecimiento y división incontrolables de las células, produciendo de este modo gradualmente la formación de células cancerosas (Kerr, J. F. R. (1971), J. Pathol., 105, 13-20).

En los últimos años, investigadores en todo el mundo se han esforzado en trabajos de investigación sobre cánceres. Sin embargo, las terapias desarrolladas y usadas habitualmente no proporcionan efectos terapéuticos satisfactorios. Además de los factores personales de los pacientes, los importantes efectos secundarios de los fármacos anticancerosos y la resistencia de las células cancerosas a dichos fármacos son los problemas principales encontrados en la terapia clínica.

En vista del hecho de que las medicinas occidentales conocidas empleadas en la terapia clínica no logran mejorar de forma efectiva las terapias habituales para las enfermedades cancerosas, algunos investigadores, basándose en los resultados de la investigación en el mecanismo de inicio de la enfermedad cancerosa, han intentado encontrar ingredientes activos de las medicinas tradicionales chinas (abreviadas generalmente como TCM por sus iniciales en inglés: traditional Chinese medicines) o de hierbas que se pueden usar para curar o aliviar los síntomas de los cánce- res.

Se considera que la apóptosis es un mecanismo natural que regula el crecimiento celular animal (Martin, S. J. y Green, D. R. (1995), Crit. Rev. Oncol. Hemat., 18, 137-153), y que tiene un papel importante en la regulación de la muerte celular natural, tal como la contracción natural de los tejidos y la absorción que se producen durante el proceso de crecimiento de los animales. Además, cuando se dañan las células humanas y no se pueden reparar se iniciará la apóptosis de forma que se evita la formación de células cancerosas.

Las principales características morfológicas de la apóptosis incluyen: formación de cuerpos apoptóticos, condensación de la cromatina y fragmentación del ADN (Arends, M. J. y Willye, A. H. (1991), Int. Rev. Exp. Pathol., 32, 223-254; Dive, C. et al., (1992) Biochim. Biophys. Acta 1133, 275-285; y Darzynkiewicz, Z. et al., (1992) Cytometry, 13, 795-808). Durante la apóptosis, los residuos de las células muertas serán rápidamente ingeridos por las células y los macrófagos vecinos por fagocitosis sin inducir una respuesta inflamatoria (Sarraf, F. E. y Bowen, I. D. (1988) Cell Tissue Res. 21, 45-49). Además, cuando se detecta la variación del ciclo celular por citometría de flujo se puede observar la presencia de un pico sub-G1 (Alzerreca, A. y Hart, G. (1982) Toxicology Lett. 12, 151-155; y Lin, C. N. et al., (1986) J. Taiwan Pharm. Assoc. 38, 166). Por lo tanto, se considera que el pico sub-G1 es un marcador típico para identificar células que están sufriendo apóptosis.

En la bibliografía se ha informado de que las células se vuelven células cancerosas si su mecanismo apoptótico está fuera de control (Carson, D. A. y Ribeiro, J. M. (1993) Lancet 341, 1251-1254; y Kaufmann, S. H. (1989) Cancer Res. 49, 5870-5878). Por lo tanto, la apóptosis se ha convertido en un sujeto de estudio en oncología. Además, se ha publicado que la apóptosis puede ser inducida por algunos fármacos anticancerosos (Wyllie, A. H. et al. (1980) Int. Rev. Cytol. 68, 251-306; Wyllie, A. H. et al. (1984) J. Pathol. 142, 67-77; Barry, M. A. et al. (1990) Biochem. Pharmacol. 40, 2353-2362; y Hickman, J. A. (1992) Cancer Metaest. Rev. 11, 121-139). Por lo tanto, la apóptosis señala una dirección principal en el desarrollo global de fármacos anticancerosos.

El uso de medicinas chinas tradicionales o de medicinas de hierbas para tratar enfermedades tiene una larga historia. Hasta el presente, no pocos investigadores están intentando encontrar fármacos anticancerosos útiles a partir de medicinas chinas tradicionales o medicinas de hierbas. Sin embargo, la aplicación de las medicinas chinas tradicionales o de las medicinas de hierbas se basa todavía en datos empíricos y no está soportada por una evidencia científica suficiente. Además, debido a que la extracción de los ingredientes activos y la dosificación y el control de calidad de las medicinas chinas tradicionales o de las medicinas de hierbas no se hacen de forma científica, los efectos terapéuticos presentados por las medicinas no son consistentes.

Además, la mayoría de los ingredientes activos de las medicinas chinas tradicionales o de las medicinas de hierbas son insolubles en agua. Cuando se administra oralmente o se inyecta un material insoluble en agua en cuerpos animales, pueden no alcanzarse sus efectos terapéuticos pretendidos debido a la dificultad de absorción. Estas son las principales limitaciones que obstaculizan el desarrollo y la aplicación de las medicinas tradicionales chinas y las medicinas de hierbas.

Las plantas que se pueden usar como medicinas son numerosas. Es bien conocido que muchos inhibidores de proteínas extraídos a partir de materiales de plantas se usan en terapia anticancerosa. Entre estos inhibidores de proteínas con potencial anticanceroso, se encontró que los alcaloides esteroidales de una planta del género Solanum eran un fármaco anticanceroso potencial.

Se sabe que la Solanum incanum L. (también denominada Solanum incanum Ruiz & Pav., Solanum coagulans Forsskal en latín y bitter apple en inglés) contiene un glicoalcaloide esteroidal (Kuo, K. W. et al. (2000) Biochemical Pharmacology 60 (12): 1865-73). Además, se ha publicado que muchas plantas del género Solanum contienen glicoalcaloides esteroidales, incluyendo por ejemplo el Solanum indicum, Solanum nigrum, también conocida como Long Kul en chino y black nightshade en inglés (Hu, K. et al. (1999) Planta Medica 65 (1): 35-8), Solanum capsicastrum (conocida como false Jerusalem cherry en inglés), Solanum xanthocarpum, Solanum melongena (Blankemeyer, J. T. et al. (1990) Food & Chemical Toxicology, 36 (5):383-9), Solanum coagulans, Solanum tuberosum (Friedman, M. et al. (1996), Journal of Nutrition, 126 (4): 989-99), Solanum sodomeum (conocida en Australia como manzana de Sodoma), Solanum turburosum, Solanum aculeastrum (Wanyonyl, A. W. et al. (2002) Phytochemistry 59 (1): 79-84), Solanum lycocarpum (Peters, V. M. et al., (2001) Contraception 63 (1): 53-5), Solanum khasianum (Putalun, W. et al. (2000) Biological & Pharmaceutical Bulletin 23 (1): 72-5), Solanum suaveolens (Ripperger, H. et al. (1997) Phytochemistry 46 (7): 1279-82), Solanum uporo (Ripperger, H. et al. (1997) Phytochemistry 44 (4): 731-4), Solanum abutiloides (Tian, R. H. et al. (1997) Phytochemistry 44 (4): 723-6), Solanum coccineum (Lorey, S. et al. (1996) Phytochemistry 41 (6): 1633-5), Solanum unguiculatum (Sarg, T. M. et al. (1995) Pharmacy World & Science 17 (6): 191-4; Solanum robustum (Ripperger, H. (1995), Phytochemistry 39 (6): 1475-7), Solanum anguivi (Ripperger, H. et al....

1. Un extracto soluble en agua de una planta del género Solanum que comprende al menos 60% de solamargina y de solasonina.

2. El extracto soluble según la reivindicación 1, que se extrae de una planta del género Solanum que es la Solanum incanum L., Solanum indicum, Solanum nigrum, Solanum capsicastrum Solanum xanthocarpum, Solanum melongena, Solanum coagulans, Solanum tunigrum, Solanum sodomeum, Solanum turburosum, Solanum aculeastrum, Solanum lycocarpum, Solanum khasianum, Solanum suaveolens, Solanum uporo, Solanum abutiloides, Solanum coccineum, Solanum unguiculatum, Solanum robustum, Solanum anguivi, Solanum platanifolium o Solanum mammosum o una combinación de cualquiera de ellas.

3. El extracto soluble en agua según la reivindicación 2 que se extrae de la Solanum incanum L.

4. El extracto soluble en agua según la reivindicación 2 que se extrae de la Solanum nigrum.

5. El extracto soluble en agua según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 que está en forma de partículas solubles en agua con un tamaño de partícula menor que 1 µm.

6. Un procedimiento para preparar un extracto soluble en agua de una planta del género Solanum, cuyo procedimiento comprende:

7. El procedimiento según la reivindicación 6, en el que en la etapa (a), el material de dicha planta del género Solanum ha sido triturado en un tratamiento preliminar.

8. El procedimiento según la reivindicación 6 ó 7, en el que en la etapa (a) el material de la planta es al menos uno del fruto, la raíz, el tallo o la hoja de dicha planta del género Solanum.

9. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 8, en el que en la etapa (a) el material de la planta es la planta completa de dicha planta del género Solanum.

10. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 9, en el que en la etapa (a) el material de una planta del género Solanum es de Solanum incanum L., Solanum indicum, Solanum nigrum, Solanum capsicastrum Solanum xanthocarpum, Solanum melongena, Solanum coagulans, Solanum tunigrum, Solanum sodomeum, Solanum turburosum, Solanum aculeastrum, Solanum lycocarpum, Solanum khasianum, Solanum suaveolens, Solanum uporo, Solanum abutiloides, Solanum coccineum, Solanum unguiculatum, Solanum robustum, Solanum anguivi, Solanum platanifolium o Solanum mammosum o una combinación de cualquiera de ellas.

11. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 10, en el que en la etapa (a) la disolución acuosa se obtiene realizando una centrifugación subsiguiente al tratamiento de extracción.

12. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 11, en el que en la etapa (a) la disolución acuosa ácida en el tratamiento de extracción es una disolución acuosa que contiene ácido fórmico, ácido acético o ácido clorhídrico.

13. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 12, en el que en la etapa (b) la base es una disolución acuosa alcalina que contiene un hidróxido alcalino o hidróxido de amonio.

14. El procedimiento según la reivindicación 13, en el que en la etapa (b) la base es una disolución acuosa alcalina que contiene hidróxido de sodio.

15. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 14, en el que en la etapa (b) el precipitado se obtiene realizando una centrifugación subsiguiente al ajuste del valor del pH.

16. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 15, en el que en la etapa (c) el tratamiento de secado es liofilización, secado por pulverización, evaporación o secado térmico o una combinación de cualquiera de ellos.

17. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 16, en el que en la etapa (c) el producto seco se obtiene lavando el precipitado formado en la etapa (b) con agua y poniendo en suspensión el precipitado lavado en agua, seguido por liofilización.

18. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 17, en el que en las etapas (d) y (e) el alcohol es metanol, etanol o alcohol propílico o una combinación de cualquiera de ellos.

19. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 18, en el que en la etapa (f) la eliminación de la fase con base de cloroformo se realiza por centrifugación.

20. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 19, en el que en la etapa (g) el tratamiento de secado es liofilización, secado por pulverización, evaporación o secado térmico o una combinación de cualquiera de ellos.

21. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 20, en el que el producto resultante de la etapa (g) está en forma de partículas solubles en agua con un tamaño de nanopartículas.

22. El procedimiento según la reivindicación 21, en el que el producto resultante de la etapa (g) está en forma de partículas solubles en agua con un tamaño de partícula menor de 1 µm.

23. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 22, en el que el producto resultante de la etapa (g) comprende al menos 60% de solasonina y solamargina.

24. El procedimiento según la reivindicación 23, en el que el producto resultante de la etapa (g) comprende al menos 75% de solasonina y solamargina.

25. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 24, en el que el producto resultante de la etapa (g) tiene una relación entre la solasonina y la solamargina que varía de 0,3:1,0 a 1,0:0,6.

26. El procedimiento según la reivindicación 25, en el que el producto resultante de la etapa (g) tiene una relación entre la solasonina y la solamargina que varía de 0,4:1,0 a 0,9:1,0.

27. El procedimiento según la reivindicación 25 ó 26, en el que el producto resultante de la etapa (g) tiene una relación entre la solasonina y la solamargina de aproximadamente 0,7:1,0.

28. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 27, en el que el producto resultante de la etapa (g) tiene una solubilidad en agua que varía de 2 a 20 mg/ml o superior.

29. Un extracto soluble en agua que se puede obtener por un procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 6 a 28.

30. Una composición farmacéutica que comprende un extracto soluble en agua según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 ó 29 y, opcionalmente, un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

31. Un extracto soluble en agua según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 ó 29 para usarlo para inhibir el crecimiento de las células tumorales/cancerosas.

32. Uso de un extracto soluble en agua según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5 ó 29 en la elaboración de un medicamento para usarlo para inhibir el crecimiento de las células tumorales/cancerosas.

33. Uso según la reivindicación 32 en el tratamiento de un cáncer.