Un método para diagnosticar o controlar una enfermedad o afección inflamatoria en una muestra obtenida de un individuo,

con la salvedad de que la enfermedad o afección inflamatoria no sea lupus eritematoso sistémico (LES) o escleroderma, en el que la enfermedad o afección es una complicación de un procedimiento de trasplante, comprendiendo el método:

(a) determinar el nivel de componente del complemento C4d, C3d e iC3b en un eritrocito del individuo; y

(b) comparar el nivel de C4d, C3d e iC3b con un nivel de control correspondiente de C4d, C3d e iC3b, en el que un nivel elevado de C4d, C3d e iC3b en comparación con el correspondiente nivel de control de C4d, C3d e iC3b indica que el individuo tiene la enfermedad o afección inflamatoria

Control de enfermedades inmunológicas, hematológicas e inflamatorias.

Campo de la invención

Esta invención se refiere al diagnóstico y/o control de pacientes con enfermedades o afecciones inflamatorias, por ejemplo, inmunológicas, hematológicas, vasculares, o enfermedades o afecciones infecciosas, mediante la determinación de los niveles de componentes de la ruta del complemento en eritrocitos. También se han descrito métodos para diagnosticar enfermedades o afecciones vasculares determinando los niveles de componentes de las rutas del complemento en plaquetas.

Antecedentes de la invención

Esta invención esta relacionada con el diagnóstico y/o control de pacientes con enfermedades y afecciones inmunológicas, hematológicas e inflamatorias. La medición del ligando del complemento C4d y su receptor CR1 en la superficie de los eritrocitos proporciona un ensayo específico y muy sensible para el diagnóstico y medida de actividad de enfermedad en pacientes con lupus eritematoso sistémico (LES) o escleroderma. Véase el ejemplo PCT/US02/28910.

Ross et al han sugerido que se observa un número reducido de CR1 por eritrocito en pacientes con lupus eritematoso sistémico (LES) (Ross et al, Journal of Immunology, 135(3):2005-2014 (1985)).

Kanto et al realizaron un estudio que concluyó que niveles bajos de E-CR1 estaban relacionados con un alto nivel de CI y con la gravedad de la enfermedad hepática en una infección por VHC (Kanto et al, Hepatology, 22 (4 PARTE 2):339A (1995)).

Kanto et al también realizaron un estudio que mostraba una correlación inversa entre los niveles de complejos inmunológicos de C3d y CR1 de eritrocitos en infecciones virales de hepatitis C (r= -0,300, P=0,032) Kanto et al, Journal of Medical Virology, 50(2):126-134, (1996)).

Sølling notificó que se observaba una correlación entre la función renal y un elevado C3d en pacientes con glomerulonefritis (GN) y en pacientes con trasplantes renales a corto y largo plazo. (Sølling J, Acta Pathologica Microbiologica et Immunologica Scandinavica Section C Immunology, 92(4):213-220 (1984).

Racusen et al presentan un criterio de consenso internacional y una clasificación del rechazo mediado por Anticuerpos (AbAR) desarrollado basándose en las conversaciones mantenidas en la Sexta Conferencia Banff sobre Patología de Aloinjertos en 2001. (Racusen et al, American Journal of Transplantation 3(6): 708-714 (2003)).

Segerer et al notifican que el receptor antigénico Duffy para quimiocinas (DARC) es una proteína de unión a quimiocinas regulada positivamente en los capilares peritubulares (CPT) durante el rechazo de aloinjertos de células renales (Segerer et al, Transplantation 75(7):1030-1034 (2003)).

Regele et al llevaron a cabo un estudio en el cual se investigó la asociación entre la deposición del C4d endotelial en los capilares peritubulares (CPT) detectada inmunohistoquímicamente con caracteres morfológicos de una lesión renal crónica de aloinjerto en una amplia cohorte de estudio. Se detectaron depósitos de C4d en CPT en 73 (34%) de las 213 biopsias tardías de aloinjerto realizadas en 213 pacientes más de 12 meses después del trasplante (media, 4,9 años) debido a la disfunción crónica del aloinjerto (Regele et al, Journal of the American Society of Nephrology, 13(9):2371-2380 (2002)).

Mauiyyedi et al realizaron un estudio diseñado para ensayar el valor relativo de la tinción, histología y serología de C4d en el diagnóstico de un rechazo humoral agudo (RHA). Los autores abogan por la tinción de rutina del C4d de biopsias de aloinjertos renales (Mauiyyedi et al, Journal of the American Society of Nephrology 13(3):779-787 (2002)).

El documento WO03022223 revela métodos para el diagnóstico y control del lupus eritematoso sistémico (LES) o escleroderma mediante la determinación, en una muestra de sangre del individuo que esta siendo diagnosticado o controlado, el componente del complemento C4d depositado en superficies de glóbulos rojos en la muestra, y opcionalmente también la determinación del receptor del complemento CR1 depositado en las superficies de los glóbulos rojos.

Chaplin et al presentan una modificación minoritaria a un método para proporcionar glóbulos rojos (GR) recubiertos por una ruta alternativa (AP) que están recubiertos fuertemente por C3b, que aumenta adicionalmente la cantidad de C3b unido (Chaplin et al, Transfusion (Bethesda) 20(3):256-262 (1980)).

Stroncek et al llevaron a cabo un estudio que concluyó que el análisis citométrico de flujo es más sensible que el ensayo en tubo para la detección de C3d asociado a GR, pero debe tenerse en cuenta que hacen falta estudios adicionales para determinar la correlación de los niveles de C3d con las secuelas clínicas (Stroncek et al Transfusion Medicine 13:35- 41 (2003)).

No se han identificado patrones de expresión de ligando del complemento y receptor que faciliten el diagnóstico y el control de la actividad de la enfermedad en otras afecciones y enfermedades humanas inmunológicas, hematológicas e inflamatorias.

La presente invención aborda estas y otras necesidades.

Breve resumen de la invención

La presente invención proporciona un método para el diagnóstico o control de una enfermedad o afección inflamatoria en un individuo, con la salvedad de que la enfermedad o afección inflamatoria no sea lupus eritematoso sistémico o escleroderma. El método implica (a) determinar, en una muestra sanguínea del individuo que contiene eritrocitos, el nivel de un componente de la ruta del complemento en la superficie de los eritrocitos de la muestra, y (b) comparar el nivel del componente de la ruta del complemento con el nivel de control del componente de la ruta del complemento, en el cual una diferencia en el nivel de control del componente de la ruta del complemento indica que el individuo tiene la enfermedad o afección inflamatoria. La enfermedad o afección inflamatoria es una complicación de un procedimiento de trasplante. Los componentes de la ruta del complemento ejemplares útiles para diagnosticar o controlar una complicación de un procedimiento de trasplante incluyen el componente C4d de la ruta del complemento, el componente C3d de la ruta del complemento y el componente iC3b de la ruta del complemento. Los niveles de C4d, C3d e iC3b pueden determinarse de forma individual o conjunta para hacer el diagnóstico. Pueden usarse anticuerpos específicos para C4d, C3d e iC3b para determinar sus niveles. Los anticuerpos pueden marcarse y pueden utilizarse anticuerpos monoclonales o policlonales. Pueden determinarse niveles de componentes adicionales de la ruta del complemento.

La presente invención también proporciona un kit para diagnosticar o controlar una enfermedad o afección inflamatoria en un individuo, con la salvedad de que la enfermedad o afección inflamatoria no sea lupus sistémico eritematoso o escleroderma, en los cuales la enfermedad es una complicación de un procedimiento de trasplante. El kit incluye anticuerpos específicos para los componentes de la ruta del complemento y un medio para comparar el nivel de los componentes de la ruta del complemento con niveles de control de componentes de la ruta del complemento, en el cual los componentes de la ruta del complemento comprenden C4d, C3d e iC3b.

La presente invención también proporciona un soporte informático de lectura que comprende (a) un código para recibir datos correspondientes a la determinación de un componente de la ruta del complemento depositado en las superficies de los eritrocitos, (b) un código para recuperar un valor de referencia para el componente de la ruta del complemento depositado en las superficies de los eritrocitos de individuos; (c) un código para comparar los datos de (a) con el valor de referencia de (b), donde la comparación de los datos se utiliza para diagnosticar o controlar una enfermedad o afección inflamatoria en un individuo, con la salvedad de que la enfermedad o afección inflamatoria no sea lupus sistémico eritematoso o escleroderma, donde la enfermedad es una complicación de un procedimiento de trasplante y donde los componentes de la ruta del complemento comprenden C4d, C3d e iC3b.

Breve descripción de los dibujos

La figura 1 proporciona un perfil de componentes de la ruta del complemento de eritrocitos de un individuo infectado por el virus de la hepatitis C (VHC).

La figura 2 proporciona un perfil de componentes...

1. Un método para diagnosticar o controlar una enfermedad o afección inflamatoria en una muestra obtenida de un individuo, con la salvedad de que la enfermedad o afección inflamatoria no sea lupus eritematoso sistémico (LES) o escleroderma, en el que la enfermedad o afección es una complicación de un procedimiento de trasplante, comprendiendo el método:

2. Un método para diagnosticar o controlar una enfermedad o afección inflamatoria en una muestra obtenida de un individuo, con la salvedad de que la afección inflamatoria no sea lupus eritematoso sistémico (LES) o escleroderma, en el que la enfermedad o afección es una complicación de un procedimiento de trasplante, comprendiendo el método:

3. El método de la reivindicación 1 ó 2, en el que el nivel del componente de la ruta del complemento C3d se determina utilizando un anticuerpo específico para el componente de la ruta del complemento C3d.

4. El método de la reivindicación 3, en el que el anticuerpo específico para el componente de la ruta del complemento C3d esta marcado.

5. El método de la reivindicación 3 ó 4, en el que el anticuerpo específico para el componente de la ruta del complemento C3d es un anticuerpo monoclonal.

6. El método de la reivindicación 1 ó 2, en el que el nivel del componente de la ruta del complemento C4d se determina utilizando un anticuerpo específico para el componente del complemento C4d.

7. El método de la reivindicación 6, en el que en el que el anticuerpo específico para el componente de la ruta del complemento C4d esta marcado.

8. El método de la reivindicación 6 ó 7, en el que el anticuerpo específico para el componente de la ruta del complemento C4d es un anticuerpo monoclonal.

9. El método de la reivindicación 1 ó 2, en el que el nivel del componente de la ruta del complemento iC3b se determina utilizando un anticuerpo específico para el componente del complemento iC3b.

10. El método de la reivindicación 9, en el que el anticuerpo específico para el componente del complemento iC3b esta marcado.

11. El método de la reivindicación 9 ó 10, en el que el anticuerpo específico para el componente de la ruta del complemento iC3b es un anticuerpo monoclonal.

12. El método de la reivindicación 2, en el que el nivel del componente de la ruta del complemento CR1 se determina utilizando un anticuerpo específico para el componente del complemento CR1.

13. El método de la reivindicación 12, en el que el que el anticuerpo específico para el componente del complemento CR1 esta marcado.

14. El método de la reivindicación 12 ó 13, en el que el anticuerpo específico para el componente de la ruta del complemento CR1 es un anticuerpo monoclonal.

15. Un kit para diagnosticar o controlar una enfermedad o afección inflamatoria en un individuo, con la salvedad de que la enfermedad o afección inflamatoria no sea lupus eritematoso sistémico (LES) o escleroderma, en el que la enfermedad es una complicación de un procedimiento de trasplante, comprendiendo el kit anticuerpos específicos para componentes de la ruta del complemento y un medio para comparar un nivel de los componentes de la ruta del complemento con un nivel de control de componentes de la ruta del complemento, en el que los componentes de la ruta del complemento comprenden C4d, C3d e iC3b.

16. Un soporte informático de lectura que comprende: (a) código para recibir datos correspondientes a la determinación de componentes de la ruta del complemento depositados en la superficie de los eritrocitos; (b) código para recuperar un valor de referencia para los componentes de la ruta del complemento depositados en la superficie de los eritrocitos de los individuos; (c) código para comparar los datos de (a) con un valor de referencia de (b), en el que la comparación de datos se utiliza para diagnosticar o controlar una enfermedad o afección inflamatoria en un individuo, con la salvedad de que la enfermedad o afección inflamatoria no sea lupus eritematoso sistémico o escleroderma, en el que la enfermedad o afección es una complicación de un procedimiento de trasplante y en el que los componentes de la ruta del complemento comprenden C4d, C3d e iC3b.