PROCEDIMIENTOS PARA AMPLIFICAR Y SECUENCIAR ACIDOS NUCLEICOS.

Método para la secuenciación de ácidos nucleicos, que comprende:

(a) fragmentar moléculas grandes de ácido nucleico de molde para generar una pluralidad de ácidos nucleicos fragmentados;

(b) administrar los ácidos nucleicos fragmentados en microrreactores acuosos en una emulsión de agua en aceite de manera que una pluralidad de microrreactores acuosos comprende una única copia de un ácido nucleico fragmentado, una única perla capaz de unirse al ácido nucleico fragmentado, y solución de reacción de amplificación que contiene los reactivos necesarios para llevar a cabo la amplificación del ácido nucleico;

(c) amplificar los ácidos nucleicos fragmentados en los microrreactores, formando copias amplificadas de dichos ácidos nucleicos y la unión de las copias amplificadas a las perlas en los microrreactores;

(d) administrar las perlas en una serie de por lo menos 10.000 cámaras de reacción sobre una superficie plana, en la que una pluralidad de las cámaras de reacción comprende no más de una única perla; y

(e) llevar a cabo una reacción de secuenciación simultáneamente en una pluralidad de las cámaras de reacción

Tipo: Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: W04002570US.

Solicitante: 454 CORPORATION.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 20 COMMERCIAL STREET,BRANFORD, CT 06405.

Inventor/es: LEAMON,JOHN,H, LOHMAN,KENTON, ROTHBERG,JONATHAN,M, WEINER,MICHAEL,P.

Fecha de Publicación: 9 de Diciembre de 2009.

Fecha Concesión Europea: 29 de Julio de 2009.

Clasificación PCT:

C12N15/10 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

Clasificación antigua:

C12Q1/00 C12Q […] › Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones.

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