METODO FLUORIMETRICO PARA EL SEGUIMIENTO Y LA DETECCION DE LA AMPLIFICACION DE ACIDOS NUCLEICOS.

Procedimiento para detectar la amplificación de ácidos nucleicos en una muestra que comprende realizar la amplificación de ácidos nucleicos sobre un polinucleótido diana en presencia de

(a) una polimerasa de ácidos nucleicos, (b) un cebador capaz de hibridar con dicho polinucleótido diana y (c) una sonda oligonucleotídica que es capaz de hibridar con dicho polinucleótido diana y que comprende una molécula donadora de fluorescencia y una molécula aceptora de fluorescencia, separadas en longitud por una distancia a la que la fluorescencia de la donadora es reducida por la aceptora, y una secuencia de cadena sencilla reconocida por una enzima de restricción que corta a dicha secuencia cuando está en forma de doble cadena, estando localizada dicha secuencia entre dicha molécula donadora y dicha molécula aceptora; aplicar dicha enzima de restricción al producto de amplificación de tal modo que se corta el producto de amplificación de doble cadena para liberar a la molécula aceptora de la molécula donadora y detectar una señal fluorescente a partir de la mezcla, donde la reacción de amplificación se efectúa usando nucleótidos modificados que son resistentes al corte por enzimas de restricción.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: THE SECRETARY OF STATE FOR DEFENCE.

Nacionalidad solicitante: Reino Unido.

Dirección: DSTL PORTON DOWN,SALISBURY WILTSHIRE SP4 0JQ.

Inventor/es: LEE, MARTIN, ALAN.

Fecha de Publicación: .

Fecha Solicitud PCT: 27 de Noviembre de 1998.

Fecha Concesión Europea: 5 de Marzo de 2008.

Clasificación PCT:

  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Técnicas de mutación o de ingeniería genética;... > C12N15/09 (Tecnología del ADN recombinante)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS... > Procesos de medida, investigación o análisis en... > C12Q1/68 (en los que intervienen ácidos nucleicos)
  • SECCION G — FISICA > METROLOGIA; ENSAYOS > INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION... > Investigación o análisis de materiales por métodos... > G01N33/50 (Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre, de orina; Investigación o análisis por métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Investigación o análisis inmunológico (procedimientos de medida, de investigación o análisis diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto; procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q))
  • SECCION G — FISICA > METROLOGIA; ENSAYOS > INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION... > Investigación o análisis de materiales por métodos... > G01N33/533 (con un marcador fluorescente)

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Portugal, Irlanda, Finlandia.

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METODO FLUORIMETRICO PARA EL SEGUIMIENTO Y LA DETECCION DE LA AMPLIFICACION DE ACIDOS NUCLEICOS.