Patrón cuantitativo para espectrometría de masas de proteínas.
Un método para determinar la cantidad absoluta de un polipéptido diana en una muestra,
comprendiendo dicho método las siguientes etapas:
(a) añadir
(aa) un polipéptido de fusión a dicha muestra, comprendiendo dicho polipéptido de fusión (i) al menos una secuencia marcadora y (ii) una subsecuencia del polipéptido diana; y
(ab) una cantidad absoluta conocida de un polipéptido marcador que comprende o consiste en dicha secuencia marcadora de acuerdo con (aa)
a dicha muestra, en el que dicho polipéptido de fusión por un lado tiene masa alterada en comparación con dicho polipéptido diana y dicho polipéptido marcador por otro lado, por ejemplo, dicho polipéptido de fusión por un lado y dicho polipéptido diana y dicho polipéptido marcador por otro lado están marcados con isótopos de forma diferente;
(b) realizar una digestión proteolítica de la mezcla obtenida en la etapa (a);
(c) someter el resultado de la digestión proteolítica de la etapa (b), opcionalmente después de cromatografía, a un análisis espectrométrico de masas; y
(d) determinar la cantidad absoluta de dicho polipéptido diana de (i) las intensidades pico en el espectro de masas adquirido en la etapa (c) de dicho polipéptido de fusión, dicho polipéptido marcador y dicho polipéptido diana y (ii) dicha cantidad absoluta conocida de dicho polipéptido marcador.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2012/056234.
Solicitante: MAX-PLANCK-GESELLSCHAFT ZUR FORDERUNG DER WISSENSCHAFTEN E.V..
Nacionalidad solicitante: Alemania.
Dirección: HOFGARTENSTRASSE 8 80539 MUNCHEN ALEMANIA.
Inventor/es: UHLEN, MATHIAS, MANN,MATTHIAS, STRAUBE,WERNER, ZEILER,MARLIS, LUNDBERG,EMMA.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C07K19/00 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › Péptidos híbridos (Inmoglobulinas híbridas compuestas solamente de inmoglobulinas C07K 16/46).
- G01N33/68 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › en los que intervienen proteínas, péptidos o aminoácidos.
PDF original: ES-2602033_T3.pdf
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