Circularización y amplificación de ácidos nucleicos circulantes asistida por ligasa.

Un método para generar un círculo de ADN monocatenario a partir de un ADN lineal,

comprendiendo el método:

(a) proporcionar el ADN lineal;

(b) incubar el ADN lineal con una polinucleótido cinasa en presencia de un donador de fosfato para generar una secuencia de ADN ligable que tiene un grupo fosfato en un extremo 5' terminal y un grupo hidroxilo en un extremo 3' terminal; y

(c) incubar la secuencia de ADN ligable con una ligasa que es capaz de ligación intramolecular independiente de la plantilla de una secuencia de ADN monocatenario para generar el círculo de ADN monocatenario,

donde todas las etapas del método se llevan a cabo en un único recipiente de reacción sin intervención de ninguna etapa de aislamiento o purificación y donde la etapa (b) se lleva a cabo usando un donador de fosfato distinto de adenosina trifosfato o desoxiadenosina trifosfato.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2014/048179.

Solicitante: GENERAL ELECTRIC COMPANY.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 1 River Road 12345 Schenectady ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: KVAM,ERIK LEEMING, NELSON,JOHN RICHARD, HELLER,RYAN CHARLES.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/68 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2721204_T3.pdf

 

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