Análisis masivo en paralelo de células individuales.

Un método que comprende:

(a) distribuir una muestra que comprende una pluralidad de células en cualquier matriz de micropocillos;



(b) poner en contacto una célula individual en un único micropocillo con un único soporte sólido, en el que el soporte sólido es una microesfera que comprende una pluralidad de oligonucleótidos, comprendiendo cada oligonucleótido un marcador celular, un marcador molecular y una región de unión a diana;

(c) hibridar o ligar un ácido nucleico diana de la célula individual a la región de unión a diana de un oligonucleótido de la pluralidad de oligonucleótidos para generar un ácido nucleico diana marcado;

(d) opcionalmente amplificar el ácido nucleico diana marcado o complemento del mismo; y

(e) determinar una cantidad del ácido nucleico diana o complemento del mismo detectando y/o secuenciando el ácido nucleico diana marcado, amplicón o complemento del mismo, y contando el número de marcadores moleculares para el ácido nucleico diana,

en el que el marcador celular comprende una secuencia de ácido nucleico que proporciona información para la célula que están en contacto con el oligonucleótido, y en el que el marcador celular de cada uno de la pluralidad de oligonucleótidos en una microesfera es igual, y en el que los marcadores celulares de los oligonucleótidos en una primera microesfera son diferentes de los marcadores celulares de los oligonucleótidos en una segunda microesfera, en el que el marcador molecular comprende una secuencia de ácido nucleico que proporciona información de identificación para el ácido nucleico diana marcado, y en el que cada marcador molecular de cada uno de la pluralidad de oligonucleótidos en una microesfera es diferente, y

en el que la región de unión a diana comprende una secuencia de ácido nucleico que puede unirse al ácido nucleico diana.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2014/053301.

Solicitante: BECTON, DICKINSON AND COMPANY.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 1 BECTON DRIVE FRANKLIN LAKES, NJ 07417 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: FODOR, STEPHEN, P., A., FU,GLENN K, WILHELMY,JULIE, FAN,CHRISTINA, FACER,GEOFFREY RICHARD.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/68 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

PDF original: ES-2711168_T3.pdf

 

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