Conjugados de señalización y procedimientos de uso.
Un procedimiento para detectar una primera diana en una muestra biológica,
que comprende:
poner en contacto la muestra biológica con una primera sonda de detección que comprende un fragmento de oligonucleótido o un anticuerpo de una especie particular capaz de unirse específicamente a la primera diana, en la que el fragmento de oligonucleótido incluye un hapteno;
poner en contacto la muestra biológica con un primer conjugado de marcaje que incluye un anticuerpo antiespecie o antihapteno acoplado a una primera enzima, en el que la primera enzima es una 10 oxidorreductasa o peroxidasa, y en el que el primer conjugado de marcaje, mediante su inclusión de un anticuerpo antiespecie o antihapteno, se une selectivamente a la primera sonda de detección;
poner en contacto la muestra biológica con un primer conjugado de señalización que comprende un primer resto reactivo latente y un primer resto cromógeno;
iluminar la muestra biológica con una fuente de luz espectralmente estrecha que tiene una emisión espectral con una anchura a media altura (AMA) de entre 30 nm y 250 nm; y
detectar la primera diana detectando una primera señal coloreada seleccionada entre rojo, naranja, amarillo, verde, añil o violeta, estando asociada la primera señal coloreada asociada con una absorbancia espectral con el primer resto cromógeno del primer conjugado de señalización;
en la que la primera enzima cataliza la conversión del primer resto reactivo latente en un primer resto reactivo, que se une covalentemente a la muestra biológica proximalmente a o directamente sobre la primera diana al reaccionar con un residuo de tirosina de la muestra biológica, el primer conjugado de marcaje, la primera sonda de detección o combinaciones de los mismos;
en el que el primer resto reactivo latente tiene la fórmula general **Fórmula**
en la que R25 se selecciona del grupo que consiste en hidroxilo, éter, amina y amina sustituida; R26 se selecciona del grupo que consiste en alquilo, alquenilo, alquinilo, arilo, heteroarilo, -ORm, -NRm y -SRm, en la que m es 1-20; n es 1-20; Z se selecciona del grupo que consiste en oxígeno, azufre y NRa en la que Ra se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno, alifático, arilo, y alquilarilo; y en el que la absorbancia espectral asociada con el primer resto cromógeno del primer conjugado de señalización tiene una anchura a media altura (AMA) de entre 30 nm y 250 nm.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2013/033462.
Solicitante: VENTANA MEDICAL SYSTEMS, INC..
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 1910 E. INNOVATION PARK DRIVE TUCSON, ARIZONA 85755 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.
Inventor/es: KOSMEDER,JEROME W, DAY,William, LEFEVER,MARK, MORRISON,LARRY, ALEXANDER,NELSON, PEDATA,ANNE, STANISLAW,STACEY.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- G01N33/542 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › con inhibición estérica o modificación de la señal, p. ej. extinción de fluorescencia.
- G01N33/58 G01N 33/00 […] › en los que intervienen sustancias marcadas (G01N 33/53 tiene prioridad).
PDF original: ES-2678211_T3.pdf
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