Expresión de proteínas en plantas.

Un método basado en la expresión transitoria para producir grandes cantidades de un polipéptido heterólogo en Nicotiana tabacum que comprende las etapas de:



(i) aplicar una prueba de necrosis para preseleccionar una variedad, línea de mejoramiento, o cultivar de una planta de Nicotiana tabacum y una cepa seleccionada de una especie de Agrobacterium, dicha variedad, línea de mejoramiento, o cultivar, muestra menos de 10 % de necrosis 5 días después que las hojas de dicha variedad, línea de mejoramiento, o cultivar se han inyectado mediante jeringa con la cepa de Agrobacterium seleccionada a una densidad celular de DO600 de 0,32, en donde la necrosis se determina mediante la medición de las áreas de una o más hojas necróticas y las áreas totales de las una o más hojas que se han infiltrado por células de Agrobacterium;

(ii) infiltrar una planta completa de la variedad, línea de mejoramiento, o cultivar seleccionados de Nicotiana tabacum con una suspensión de la cepa seleccionada de la especie de Agrobacterium a una DO600 de entre 0,1 y 4,0, donde dicha cepa comprende una secuencia de nucleótidos expresable que codifica al polipéptido;

(iii) incubar la planta infiltrada durante un período de entre 5 días y 10 días en condiciones que permitan la expresión de la secuencia de nucleótidos expresable en la planta infiltrada y la acumulación del polipéptido heterólogo; y, opcionalmente;

(iv) comprende además después de la etapa (iii), una etapa (iv) para infiltrar la planta infiltrada completa con Agrobacterium con una o más enzimas que degradan la pared de las células vegetales; en donde el polipéptido heterólogo se expresa en una cantidad de al menos 200 mg por kg de masa de tejido vegetal

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2012/050645.

Solicitante: PHILIP MORRIS PRODUCTS S.A..

Nacionalidad solicitante: Suiza.

Dirección: QUAI JEANRENAUD 3 2000 NEUCHATEL SUIZA.

Inventor/es: BEUCHAT,JULIEN, CAMPANONI,PRISCA, DAI,SHUNHONG, FACCHINETTI,CLAUDIO, LUGON-MOULIN,NICOLAS, MUNDELL,RICHARD, OISHI,KAREN, RAMIREZ,GUSTAVO, ROESTI,SANDRINE, LAPARRA,HELENE, CABRERA,ROSA.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • A01H5/00 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A01 AGRICULTURA; SILVICULTURA; CRIA; CAZA; CAPTURA; PESCA.A01H NOVEDADES VEGETALES O PROCEDIMIENTOS PARA SU OBTENCION; REPRODUCCION DE PLANTAS POR TECNICAS DE CULTIVO DE TEJIDOS.Angiospermas,es decir, plantas con flores, caracterizadas por sus partes vegetales; Angiospermas caracterizadas de forma distinta que por su taxonomía botánica.
  • C12N15/82 QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › para células vegetales.

PDF original: ES-2637825_T3.pdf

 

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