Procedimiento de producción de un producto de fermentación microbiana.

Un procedimiento de producción de 1-(2-hidroxietil)-2,5,5,8a-tetrametildecahidronaftalen-2-ol representado por la fórmula (2):

**Fórmula**

en el que el procedimiento comprende cultivar un microorganismo usando un medio que contiene un compuesto o unos compuestos representados por la fórmula (1a) y/o (1b) **Fórmula**

como un sustrato, secar el fluido de cultivo que contiene el diol de manera que el contenido de humedad en el producto seco del fluido de cultivo sea de entre el 0,01% y el 20%, añadir un disolvente al producto seco del fluido de cultivo, de manera que el valor SP del medio sea ajustado para estar comprendido en el intervalo entre 9,5 y 16 [(cal/cm3)1/2], obteniendo, de esta manera, una dispersión, eliminar posteriormente el microorganismo dela disolución y cristalizar el diol.

Procedimiento de producción de un producto de fermentación microbiana.

Campo de la invención La presente invención se refiere a un procedimiento de producción de 1- (2-hidroxietil) -2, 5, 5, 8atetrametildecahidronaftalen-2-ol, que es útil como un intermedio para la producción de 3a, 6, 6, 9atetrametildodecahidronafto[2, 1-b]furano.

Antecedentes de la invención El 3a, 6, 6, 9a-tetrametildodecahidronafto[2, 1-b]furano (en adelante, indicado como "compuesto A") es un componente de fragancia que está contenido en el ámbar gris, que es una secreción patológica producida en el cuerpo del cachalote, y es un compuesto importante, indispensable como un perfume basado en ámbar. El compuesto A se produce principalmente mediante un procedimiento de síntesis química usando esclareol, que se extrae del almaro (Salvia sclarea L.) , como material de partida. Como un intermedio del compuesto A, se conocen 3a, 6, 6, 9atetrametildecahidronafto[2, 1-b] furan-2 (1H) -ona (en adelante, en la presente memoria, indicado como "esclareólido") y 1- (2-hidroxietil) -2, 5, 5, 8a-tetrametildecahidronaftalen-2-ol (en adelante, en la presente memoria, indicado como "diol") .

Sin embargo, el procedimiento de síntesis química descrito anteriormente tiene un problema en el sentido de que la carga ambiental del procedimiento es elevada, y el rendimiento o la pureza no pueden obtenerse suficientemente.

Mientras, se ha informado acerca de procedimientos de producción del compuesto A obteniendo un intermedio del compuesto A a partir de esclareol mediante conversión microbiana y ciclización del intermedio (por ejemplo, los documentos de patente 1 y 2) . Específicamente, en los documentos de patente 1 y 2, la separación y la purificación del diol obtenido mediante conversión microbiana son llevadas a cabo sometiendo un fluido de cultivo a extracción con disolvente usando acetato de etilo, posteriormente secando el extracto obtenido del mismo, disolviendo el extracto en hexano/acetato de etilo o hexano/cloroformo caliente, y cristalizando el diol a partir de la solución.

Además, con respecto a la separación y la purificación del diol obtenido a partir de esclareol mediante conversión microbiana, se ha informado acerca de un procedimiento de filtración de un fluido de cultivo usando un filtro que tiene un tamaño de malla de un intervalo específico para separar las células bacterianas, disolviendo posteriormente las células bacterianas en un disolvente que tiene un valor SP de 8, 3 a 20, y filtrando la solución de nuevo (documento de patente 3) .

Documentos de la técnica anterior

Documentos de patente Documento de Patente 1: JP-A-3-224478

Documento de Patente 2: JP-A-62-74281

Documento de Patente 3: JP-A-2008-212087

El documento EP- A- 0 419 026 se refiere a un procedimiento y a medios de producción de diol y de lactona, tales como 1- (2-hidroxietil) -2, 5, 5, 8a-tetrametildecahidronaftalen-2-ol. Los medios comprenden un microorganismo seleccionado de entre el grupo que consiste en (i) Cr y ptococcus albidus (Saito [Skinner var. albidus], ATCC 20918; (ii) Bensingtonia ciliata, ATCC 20919; (iii) Cr y ptococcus laurentii, ATCC 20920; y (iv) Cr y ptococcus albidus, ATCC 20921 o mezclas de dos o más de los mismos.

El documento EP-A-2 123 765 se refiere a un procedimiento de producción de 1- (2-hidroxietil) -2, 5, 5, 8-atetrametildecahidronaftalen-2-ol que comprende un cultivo y una etapa de purificación. El fluido de cultivo obtenido después del cultivo se filtra, el residuo se lava con agua o un disolvente que tiene un valor SP específico, la torta obtenida se disuelve en un disolvente que tiene un valor SP particular y, finalmente, la solución se filtra o centrifuga.

El documento WO-A-02/072110 da a conocer un procedimiento de producción de un compuesto de poliol (caloporosido) que comprende un cultivo y una etapa de purificación. Después del cultivo, el cultivo microbiano se liofiliza, a continuación, se extrae con un disolvente orgánico miscible en agua, tal como metanol o propanol, posteriormente se filtra para eliminar los residuos y se separa mediante cromatografía en columna.

El documento JP-A-4 282 319 da a conocer un procedimiento en el que un producto de cultivo a partir de células cultivadas de líquenes se seca mediante congelación y se extrae con un disolvente polar a una temperatura baja.

El documento WO-A-01/09074 se refiere a un procedimiento de recuperación de un ácido orgánico a partir de un caldo de fermentación que comprende el secado del caldo de fermentación para obtener un producto seco, la adición del producto seco a un alcohol inferior en presencia de un ácido y, a continuación, la eliminación del material insoluble para obtener un ácido orgánico.

Sumario de la invención

Problema a resolver por la invención Sin embargo, se conoce que los productos de cristalización del diol obtenido mediante procedimientos de extracción con disolventes usando acetato de etilo o similares, tal como se ha descrito anteriormente, tienen una alta intensidad de olor anormal. Particularmente, debido a que un olor del cultivo causado por el microorganismo es extraído por el disolvente, incluso si el diol se obtiene mediante cristalización, se necesitan además diversos procedimientos de purificación para reducir el olor del cultivo. De esta manera, se encontró que el procedimiento de producción se complica mucho. Además, el procedimiento de separación de las células bacterianas con un filtro, disolviendo las células bacterianas en un disolvente particular, y filtrando la solución, requiere dos filtraciones, y este procedimiento implica también una etapa de producción complicada.

Por otro lado, a pesar de que la intensidad de olor anormal podría ser disminuida, si la tasa de recuperación del propio diol es demasiado baja, la eficiencia de producción del diol disminuye, y el diol no puede ser producido, de manera eficiente, con alta pureza.

Por lo tanto, la presente invención proporciona un procedimiento que es capaz de producir eficientemente el diol con una baja intensidad de olor anormal y alta pureza.

Medios para resolver el problema Convencionalmente, en el caso en el que sustancias útiles que son escasamente solubles en agua o hidrófobas se producen fuera de las células bacterianas, se añade un disolvente hidrófobo a un fluido de cultivo que contiene las sustancias útiles, y la recuperación de las sustancias útiles se lleva a cabo mediante clasificación o extracción en vista de la eficiencia de la operación. Sin embargo, en la práctica, cuando el diol se produce mediante conversión microbiana, tal como se ha descrito anteriormente, el fluido de cultivo contiene esclareol o esclareolido sin reaccionar, microorganismos, componentes del medio y similares presentes en una mezcla, además del diol. Por lo tanto, los componentes distintos del diol se recuperan también al mismo tiempo durante la clasificación o la extracción, y el diol obtenido de esta manera tiene una alta intensidad de olor anormal o un alto grado de coloración.

De esta manera, los inventores de la presente invención llevaron a cabo una investigación exhaustiva del procedimiento de producción de diol. En consecuencia, los presentes inventores encontraron que cuando un fluido de cultivo que contiene el diol es secado antes de ser puesto en contacto con un disolvente para obtener un producto seco del fluido de cultivo, posteriormente el producto seco se pone en contacto con un disolvente tal que el valor SP del medio obtenible después del contacto del producto seco y el disolvente se regula a un intervalo específico, posteriormente las células bacterianas se retiran, y se lleva a cabo una cristalización; el diol se puede ser obtenido con alto rendimiento. Los presentes inventores han encontrado también que el diol obtenido de esta manera tiene un menor nivel de olor o coloración del cultivo derivado de microbios, de manera que pueden reducirse los procedimientos subsiguientes, tales como la desodorización o repurificación.

Es decir, la presente invención proporciona un procedimiento de producción de 1- (2-hidroxietil) -2, 5, 5, 8atetrametildecahidronaftalen-2-ol representado por la fórmula (2) :

en el que el procedimiento comprende cultivar un microorganismo usando un medio que contienen un compuesto o unos compuestos representados por la fórmula (1a) y/o (1b)

como un sustrato, secar el fluido de cultivo que contiene diol, de manera que el contenido de humedad en el producto seco del fluido de cultivo sea del 0, 01% al 20%, añadir un disolvente al producto seco del fluido de cultivo, de manera que el valor SP del medio sea ajustado para que esté comprendido entre 9, 5 y 16 [ (cal/cm3) ½],... [Seguir leyendo]

1. Un procedimiento de producción de 1- (2-hidroxietil) -2, 5, 5, 8a-tetrametildecahidronaftalen-2-ol representado por la fórmula (2) :

en el que el procedimiento comprende cultivar un microorganismo usando un medio que contiene un compuesto o unos compuestos representados por la fórmula (1a) y/o (1b)

como un sustrato, secar el fluido de cultivo que contiene el diol de manera que el contenido de humedad en el producto seco del fluido de cultivo sea de entre el 0, 01% y el 20%, añadir un disolvente al producto seco del fluido de cultivo, de manera que el valor SP del medio sea ajustado para estar comprendido en el intervalo entre 9, 5 y 16