Orificios de acceso para alimentar una placa de filtración de múltiples pocillos.

Una placa de filtración de múltiples pocillos (10,101) que comprende:



una multiplicidad de pocillos (42;100) que se extiende desde una placa (40), comprendiendo cada uno de dichos pocillos (42; 100)

(a) un miembro hueco (42a) que tiene dos aberturas (106) y que se extiende desde dicha placa (40) y

(b) una barrera permeable (43;104) asegurada alrededor de una de dichas aberturas (106) que se extienden desde la placa (40);

un primer orificio de acceso (50,52;116) a través de dicha placa (40) para el paso de líquido a través de dicha placa (40) para efectuar el contacto de dicho líquido con la totalidad de dichas barreras permeables (43;104); y

un conjunto de segundos orificios de acceso (45;102) que se extienden a través de dicha placa (40), cada uno de dichos segundos orificios de acceso (43;102) situados adyacentes cada una de dicha multiplicidad de pocillos (42;100).

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2002/018403.

Solicitante: EMD Millipore Corporation.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 290 CONCORD ROAD BILLERICA, MA 01821 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: DESILETS, KENNETH, RISING, DONALD, PHILLIPS, JEANNE.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • B01L3/00 SECCION B — TECNICAS INDUSTRIALES DIVERSAS; TRANSPORTES.B01 PROCEDIMIENTOS O APARATOS FISICOS O QUIMICOS EN GENERAL.B01L APARATOS DE LABORATORIO PARA LA QUIMICA O LA FISICA, DE USO GENERAL (aparatos de uso médico o farmacéutico A61; aparatos para aplicaciones industriales o aparatos de laboratorio cuya estructura y funciones son comparables a las de aparatos industriales similares, ver las clases relativas a los aparatos industriales, en particular las subclases B01 y C12; aparatos de separación o de destilación B01D; dispositivos de mezcla o de agitación B01F; atomizadores B05B; tamices, cribas B07B; tapones, capuchones B65D; manipulación de líquidos en general B67; bombas de vacío F04; sifones F04F 10/00; grifos, válvulas F16K; tubos, empalmes para tubos F16L; aparatos especialmente adaptados al estudio y análisis de materiales G01, particularmente G01N; aparatos eléctricos u ópticos, ver las subclases apropiadas en las secciones G y H). › Recipientes o utensilios para laboratorios, p. ej. cristalería de laboratorio (botellas B65D; equipos para enzimología o microbiología C12M 1/00 ); Cuentagotas (recipientes para volumetría G01F).
  • B01L9/00 B01L […] › Dispositivos de soporte; Dispositivos de sujeción (tenacillas, pinzas B25B).
  • B01L99/00 B01L […] › Materia no prevista en otros grupos de esta subclase.
  • C12M1/00 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12M EQUIPOS PARA ENZIMOLOGIA O MICROBIOLOGIA (instalaciones para la fermentación de estiércoles A01C 3/02; conservación de partes vivas de cuerpos humanos o animales A01N 1/02; aparatos de cervecería C12C; equipos para la fermentación del vino C12G; aparatos para preparar el vinagre C12J 1/10). › Equipos para enzimología o microbiología.
  • C12M1/34 C12M […] › C12M 1/00 Equipos para enzimología o microbiología. › Medida o ensayo de detección de las condiciones del medio, p. ej. por contadores de colonias.
  • C12M3/00 C12M […] › Equipos para el cultivo de tejidos, de células humanas, animales o vegetales, o de virus.

PDF original: ES-2409655_T3.pdf

 


Fragmento de la descripción:

Orificios de acceso para alimentar una placa de filtración de múltiples pocillos

Antecedentes de la invención Esta invención se refiere a una placa de filtración de múltiples pocillos para retener un líquido y que se utiliza con un aparato de ensayo de múltiples pocillos adecuado para fomentar las interacciones de fluidos, tal como mediante el crecimiento de las células en un medio nutriente dentro de los pocillos. Más particularmente, esta invención se refiere a una placa de filtración de múltiples pocillos de un aparato de ensayo de múltiples pocillos que permite la adición o eliminación de líquido de la bandeja de alimentación de un aparato de ensayo de múltiples pocillos sin alterar un material tal como las células dentro de los pocillos.

En la actualidad, los aparatos de ensayo de múltiples pocillos para ensayar muestras incluyen una placa de filtración de múltiples pocillos que tiene una multiplicidad de pocillos, una bandeja de alimentación, una placa receptora de múltiples pocillos y una tapa. Los pocillos de la placa de filtración de múltiples pocillos están formados de un miembro tubular con un extremo abierto al que está unida una membrana tal como una membrana microporosa. Los miembros tubulares se pueden insertar en la bandeja de alimentación que contiene un medio líquido rico en nutrientes para que las células en los pocillos puedan estar unidas a la membrana y se desarrollen en ella. Las células se alimentan a medida que los nutrientes pasan desde el medio nutriente a través de la membrana y a las células a una velocidad controlada por el gradiente de concentración de nutrientes desde el medio nutriente a las células. El medio nutriente en la bandeja de alimentación se repone periódicamente para mantener el crecimiento celular. Es deseable efectuar la reposición del medio nutriente rápidamente y de una manera que evite daños a las membranas y a las células.

Después de que se ha alcanzado el nivel deseado de crecimiento de las células en las membranas de los pocillos, la placa de filtración de múltiples pocillos se puede utilizar en métodos de ensayo convencionales. Estos métodos de ensayo se efectúan generalmente situando las membranas y las células en la placa de filtración de múltiples pocillos en el interior de los pocillos de la placa receptora de múltiples pocillos, tal como una placa de 96 pocillos situada por debajo de la placa de filtración de múltiples pocillos o justo tiene que tener el mismo número de pocillos en coincidencia con la célula/placa de filtración. Los pocillos de la placa de filtración de múltiples pocillos contienen una composición líquida a ensayar. La composición a ensayar se difunde en las células y luego a través de la membrana en la placa receptora inferior. El producto líquido resultante dentro de los pocillos de la placa de filtración de múltiples pocillos o en los pocillos de la placa receptora de múltiples pocillos se somete a ensayo a continuación para determinar la capacidad de la composición que se está ensayando para impregnar la barrera celular.

Un componente importante en el proceso de descubrimiento de fármacos y desarrollo es la determinación de la absorción oral y la biodisponibilidad de compuestos nuevos. Con el fin de realizar esta evaluación en un ensayo a un coste efectivo, de alto rendimiento y sensible, es ideal para utilizar un dispositivo in vitro con una multitud de pocillos, que contiene células, una pequeña cantidad de material de ensayo y automatización. Clásicamente, la determinación de las características de absorción oral in vitro se lleva a cabo utilizando una estirpe de células epiteliales definida y midiendo la velocidad de transporte aparente del fármaco a través de una monocapa de las células. Más recientemente, es posible clasificar / ordenar la velocidad de transporte pasiva de los candidatos potenciales de los fármacos utilizando una barrera de membrana artificial. Los valores generados a partir de estos experimentos in vitro son métodos valiosos para el cribado de los candidatos más probables de fármacos con éxito mucho antes de que la tasa de absorción oral sean validados por medidas in vivo. Un experimento típico para determinar las características de absorción de los fármacos de un compuesto químico conocido o desconocido se realiza como sigue. El dispositivo de múltiples pocillos se siembra con células epiteliales en la parte superior del filtro en un medio de nutrientes definido. El mismo medio se añade también a la bandeja de alimentación de un solo pocillo, situado debajo y en contacto fluido con el dispositivo que contiene las células. Las células se dejan proliferar y diferenciar en un número de días. El medio nutriente se sustituye de forma periódica con medio recién preparado para reponer los nutrientes agotados y quitar los residuos y las células muertas. Al final de un tiempo de crecimiento, las células y el dispositivo de múltiples pocillos se lavan suavemente con un tampón isotónico para eliminar la proteína y el medio nutriente residual. En este momento, la placa de filtración de múltiples pocillos es transferida a la placa receptora de múltiples pocillos y los productos químicos a ensayar se introducen bien en el compartimento por encima de la capa de células o por debajo de las células y del soporte del filtro en la bandeja receptora de múltiples pocillos. La cámara opuesta se llena con tampón libre de fármacos y el dispositivo de múltiples pocillos se incuba durante un cierto período de tiempo, típicamente a 37 grados centígrados con agitación. Si se desean múltiples momentos temporales, las muestras se toman de cualquiera de los compartimientos y el tampón se añade a continuación para reponer el líquido eliminado. Típicamente, si las muestras se toman del compartimiento inferior, primero debe retirarse la placa de filtración, corriendo por tanto el riesgo de contaminación del material en los pocillos. La cantidad de fármaco/producto químico que se transporta a través de la barrera de células puede ser determinada mediante diversos métodos analíticos, pero típicamente se determina usando LC-MS/MS (cromatografía líquida-espectrometría de masas/espectrometría de masas) .

Por consiguiente, sería deseable proporcionar una placa de filtración de múltiples pocillos de un aparato de ensayo de múltiples pocillos que facilite la reposición de un medio nutriente en una bandeja de alimentación de forma rápida y de una manera que preserve la integridad de las membranas y de las células sobre la membrana. Además, sería deseable proporcionar una placa de filtración de múltiples pocillos tal filtro que puede ser utilizado junto con una placa receptora de múltiples pocillos subsiguiente para uso en conjunción con la bandeja de alimentación.

El documento US 5.801.055A describe un aparato de ensayo de múltiples pocillos que comprende una placa de inserción de múltiples pocillos dispuesta para ser recibida en una placa o bandeja de un solo pocillo. La placa de inserción incluye una pared superior sustancialmente plana en un borde periférico que se extiende hacia abajo desde la pared superior. Una pluralidad de pocillos está acoplada a la pared superior y se extienden hacia abajo desde allí. Cada pocillo incluye un extremo superior que define una abertura superior y un extremo inferior que define una abertura en le fondo. Una pared lateral de cada pocillo conecta de manera generalmente frustocónica los extremos superior e inferior. Una abertura radial se extiende a través de la pared lateral a una parte del extremo superior de cada pocillo. El extremo inferior de cada pocillo incluye una cara del extremo anular al que se fija una membrana microporosa semipermeable. Una pluralidad de aberturas en la pared se extiende a través de la pared superior de la placa de inserción y se une respectivamente a las aberturas radiales en los pocillos, en donde las aberturas de la pared y las aberturas radiales definen una pluralidad de aberturas de pipeta que permiten a la pipeta acceder al pocillo respectivo y a un espacio periférico adyacente al pocillo cuando la placa de inserción es recibida en otra placa receptora de múltiples pocillos.

Sumario de la invención Esta invención se describirá en la presente memoria haciendo referencia al crecimiento y al uso de células en una barrera permeable, tal como una membrana porosa o una malla de fibra de vidrio, situada y asegurada al fondo de cada uno de una multiplicidad de pocillos. Sin embargo, debe comprenderse que la presente invención no tiene por qué usarse junto con las células. Otros usos representativos incluyen filtración, diálisis o similar.

La presente invención proporciona una placa de filtración de múltiples pocillos como se define en la reivindicación... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Una placa de filtración de múltiples pocillos (10, 101) que comprende:

una multiplicidad de pocillos (42;100) que se extiende desde una placa (40) , comprendiendo cada uno de dichos pocillos (42; 100)

(a) un miembro hueco (42a) que tiene dos aberturas (106) y que se extiende desde dicha placa (40) y

(b) una barrera permeable (43;104) asegurada alrededor de una de dichas aberturas (106) que se extienden desde la placa (40) ;

un primer orificio de acceso (50, 52;116) a través de dicha placa (40) para el paso de líquido a través de dicha placa

(40) para efectuar el contacto de dicho líquido con la totalidad de dichas barreras permeables (43;104) ; y

un conjunto de segundos orificios de acceso (45;102) que se extienden a través de dicha placa (40) , cada uno de dichos segundos orificios de acceso (43;102) situados adyacentes cada una de dicha multiplicidad de pocillos (42;100) .

2. La placa de filtración de múltiples pocillos de la reivindicación 1, que incluye un orificio de acceso adicional (50;52) para pasar líquido a través de dicha placa (40) para retirar el líquido del contacto con la totalidad de dichas barreras (43;104) .

3. La placa de filtración de las reivindicaciones 1 ó 2, en donde dichos segundos orificios de acceso (45;102) están separados de las aberturas respectivas de los pocillos en la placa (40) .

4. La placa de filtración de múltiples pocillos de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que incluye una pluralidad de patas (44) que se extienden desde una superficie de dicha placa (40) desde la que se extienden dichos pocillos (42) y a una distancia mayor que la longitud de dichos miembros huecos (42a) .

5. La placa de filtración de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, que comprende además un estante (110;110a;110b;110c) que se extiende hacia dentro desde una pared (103a; 103b) del miembro hueco adyacente a la membrana porosa (104) asegurada alrededor de dicha abertura (106) .

6. La placa de filtración de la reivindicación 1, en donde dicho estante (110b) se forma mediante un rebaje de dicha pared (103b) .

7. La placa de filtración de las reivindicaciones 5 ó 6, en donde dicho estante (110c) tiene una superficie superior cóncava (120) .

8. Un aparato de ensayo de múltiples pocillos que comprende:

una placa de filtración de múltiples pocillos (10; 101) de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7; y

una bandeja de alimentación (28;200) que soporta dicha placa de filtración (10; 101) , teniendo dicha bandeja de alimentación una superficie de apoyo inclinada (70) que tiene un área de drenaje (32) de la que puede retirarse líquido y un área de introducción (30) en la que se puede suministrar líquido, estando inclinada, dicha superficie de apoyo inclinada (70) , en una configuración para efectuar el drenaje de líquido desde dicha área de introducción (30) hasta dicha área de drenaje (32) , y las paredes (12, 14, 16, 18) que rodean dicha superficie inclinada (70) para encerrar dicha superficie inclinada.

9. El aparato de ensayo de múltiples pocillos de la reivindicación 8, en donde dicha superficie de apoyo inclinada (70) comprende dos sub-secciones de superficie de apoyo (22, 24;204, 206) inclinada cada una de ellas desde dichas paredes (12, 14, 16, 18) hasta una vía de drenaje (21) conectada a ambas de dichas subsecciones (22, 24;204, 206) de la superficie de apoyo.

10. El aparato de ensayo de múltiples pocillos de las reivindicaciones 8 ó 9, que incluye una multiplicidad de salientes (202) que se extienden desde dicha superficie de apoyo en una dirección sustancialmente igual a la dirección en que dichas paredes se extienden desde dicha superficie de apoyo, teniendo dichos salientes (202) una longitud que permite a dichas paredes soportar dicha placa de filtración de múltiples pocillos (10;101) y que permite el contacto de dichos salientes (202) con cada membrana de un pocillo de dicha placa de filtración (10;101) cuando dicha placa de filtración se retira del soporte mediante dicha bandeja de alimentación.

11. El aparato de ensayo de múltiples pocillos de la reivindicación 10, en donde dichos salientes (202) se seleccionan del grupo que consiste en postes, pirámides, rectángulos, hoyuelos y conos.

12. Un aparato de ensayo de múltiples pocillos que comprende:

una placa de filtración (10;101) de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7; y una placa receptora de múltiples pocillos (29;114) que soporta dicha placa de filtración de múltiples pocillos (10;101) , teniendo dicha placa receptora de múltiples pocillos (29;114) una pluralidad de pocillos no circulares (53; 112) que tienen un volumen primario en el que se extiende una membrana de uno de dichos pocillos de filtración y un volumen secundario que permite recibir una jeringa que se extiende a través de uno de dichos segundos orificios de acceso (45) .

13. Un aparato de ensayo de múltiples pocillos que comprende:

una placa de filtración de múltiples pocillos (10; 101) de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7; y

una bandeja de alimentación (28; 200) que soporta dicha placa de filtración (10;101) , teniendo dicha bandeja de alimentación un área de drenaje (32) de la cual se puede retirar líquido y un área de introducción (30) en la que se puede suministrar líquido, proporcionando dicho primero y adicional orificio de acceso (50; 52) el acceso a dicha área de drenaje (32) y al área de introducción (30) , respectivamente.


 

Patentes similares o relacionadas:

PIPETA DE SUJECIÓN DE OVOCITOS EN PROCEDIMIENTOS DE INYECCIÓN ESPERMÁTICA INTRACITOPLASMÁTICA, del 27 de Diciembre de 2018, de VERGARA ALCAIDE, Francisco: Pipeta de sujeción de ovocitos en procedimientos de inyección espermática intracitoplasmática sin previa aspiración del citoplasma, configurada a partir […]

Mecanismo de transferencia automatizado para aparatos de detección microbiana, del 19 de Noviembre de 2018, de BIOMERIEUX, INC.: Un aparato de detección para la detección rápida no invasiva del crecimiento de microorganismos en una muestra de espécimen, que comprende: (a) un recipiente […]

Método de impresión de elementos biológicos con láser y dispositivo para su realización, del 10 de Octubre de 2018, de Université de Bordeaux: Método de impresión de al menos una tinta biológica, dicho método utilizando al menos una cabeza de impresión de tipo láser para depositar […]

BIORREACTOR TIPO COLUMNA DE BURBUJEO PARA CULTIVO DE CÉLULAS VEGETALES EN SUSPENSIÓN, del 4 de Octubre de 2018, de UNIVERSIDAD DE ALICANTE: La presente invención se refiere a un biorreactor tipo columna de burbujeo para realizar, en condiciones asépticas, el cultivo de células vegetales en […]

Método de cultivo, sistema de cultivo y biomasa de consorcios ad-hoc de microalgas y cianobacterias en biofilm con fines industriales., del 21 de Junio de 2018, de Microalgae Solutions S.L: Un método y un sistema, para el cultivo de consorcios ad-hoc de especies de microalgas y cianobacterias en biofilm, y una biomasa de consorcio […]

Análisis celular de fluidos corporales, del 7 de Marzo de 2018, de ABBOTT LABORATORIES: Un método in vitro para analizar un fluido corporal que contiene células, en que dicho método comprende: teñir un fluido corporal que […]

Inserto de cultivo celular, del 28 de Febrero de 2018, de Naturin Viscofan GmbH: Dispositivo de cultivo celular, que comprende: - un cuerpo tubular externo que tiene un extremo superior (1a) y un extremo inferior (1b), comprendiendo […]

Procedimiento de seguimiento de una reacción y sistema de reacción para su implementación, del 31 de Enero de 2018, de CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE: Sistema de reacción, en particular de cultivos de microorganismos, que comprende: * al menos un depósito (M1) de medio de reacción (1, 1') conectado de forma fluida […]

Otras patentes de EMD Millipore Corporation