Identificación de un microARN que activa la expresión de la cadena pesada beta de la miosina.

Un inhibidor de miR-208 para uso en un procedimiento para la prevención o el tratamiento de la hipertrofia cardíaca patológica,

la insuficiencia cardíaca o el infarto de miocardio, en que el inhibidor de miR-208 es un oligonucleótido no codificante con una secuencia que es complementaria de una secuencia de miR-208.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

1. Campo de la invención La presente invención se refiere en general a los campos de la biología del desarrollo y la biología molecular. Más especialmente, se refiere a la regulación génica y la fisiología celular en miocardiocitos y células del músculo esquelético. Específicamente, la invención se refiere a la inhibición de un miARN que resulta en una reducción de la expresión de la cadena pesada β de la miosina (β-MHC) , tratando de este modo la hipertrofia cardíaca y la insuficiencia cardiaca.

2. Descripción de la técnica relacionada La hipertrofia cardíaca en respuesta a un aumento de la carga de trabajo impuesta sobre el corazón es un mecanismo adaptativo fundamental. Es un proceso especializado que refleja un aumento cuantitativo del tamaño y la masa celulares (más que del número de células) como resultado de cualquier estímulo neural, endocrino o mecánico o de una combinación de estos. La hipertensión, otro factor implicado en la hipertrofia cardíaca, es un precursor frecuente de la insuficiencia cardíaca congestiva. Cuando se produce una insuficiencia cardíaca, normalmente el ventrículo izquierdo se hipertrofia y dilata y los índices de la función sistólica, como la fracción de eyección, disminuyen. Claramente, la respuesta hipertrófica cardíaca es un síndrome complejo y la elucidación de las rutas que conducen a la hipertrofia cardíaca será beneficiosa para el tratamiento de las cardiopatías que resultan de diversos estímulos.

La hipertrofia miocárdica patológica se caracteriza por un aumento de la proteína de miocardiocitos y por la expresión de un perfil génico reminiscente del desarrollo embrionario temprano. Específicamente, aumenta la expresión de la cadena pesada β de la miosina (β-MHC) , la α-actina de músculo esquelético (sACT) y los péptidos natriuréticos atriales y cerebrales (ANP y BNP, respectivamente) , mientras que disminuye la de los genes específicos del músculo cardíaco adulto, la cadena pesada α de la miosina (α-MHC) y la Ca2+-ATPasa del retículo endoplásmico (SERCA) . En particular, hay evidencia convincente que indica que los cambios en la expresión de las isoformas de la MHC desempeñan un papel en la patogénesis de la insuficiencia cardíaca en humanos. De hecho, los niveles de ARNm y proteína de la α-MHC están notablemente reducidos en corazones humanos con insuficiencia cardíaca y una mejora de la fracción de eyección del ventrículo izquierdo mediante el tratamiento con betabloqueantes se asocia con la normalización de la expresión de la α-MHC. Adicionalmente, se ha identificado una mutación en el gen de la α-MHC humana asociada con la miocardiopatía hipertrófica, lo que demuestra que, a pesar de su poca abundancia, el nivel de expresión de la α-MHC es crítico para una función cardíaca normal. Por lo tanto, está claro que tanto la α-MHC como la β-MHC desempeñan un papel en la aparición de la hipertrofia cardíaca, pero las características concretas mediante las que estos productos actúan para crear y/o mantener el estado patológico siguen siendo desconocidas.

RESUMEN

De acuerdo con la presente invención, se proporciona lo siguiente:

1. Un inhibidor de miR-208 para uso en un procedimiento para la prevención o el tratamiento de la hipertrofia cardíaca patológica, la insuficiencia cardíaca o el infarto de miocardio, en que el inhibidor de miR-208 es un oligonucleótido no codificante con una secuencia que es complementaria de una secuencia de miR-208.

2. El inhibidor para uso de acuerdo con el punto 1, en que el inhibidor es un oligonucleótido monocatenario de poca longitud, manipulado químicamente y complementario de miR-208 que bloquea la función de miR-208.

3. El inhibidor para uso de acuerdo con el punto 1, en que el oligonucleótido no codificante tiene una secuencia complementaria de SEQ ID NO:5.

4. El inhibidor para uso de acuerdo con el punto 1, en que el oligonucleótido no codificante contiene al menos un nucleótido modificado con 2’-O-metilo.

5. El inhibidor para uso de acuerdo con el punto 1, en que el inhibidor se administra a un sujeto que lo necesita por vía intravenosa, oral, transdérmica, por liberación mantenida, liberación controlada, liberación retardada, mediante supositorios, por vía subcutánea, intraperitoneal o sublingual o por inyección directa en el tejido cardíaco.

6. El inhibidor para uso de acuerdo con el punto 1, en que el inhibidor se administra a un sujeto que lo necesita en combinación con un segundo tratamiento cardíaco.

7. El inhibidor para uso de acuerdo con el punto 6, en que dicho segundo tratamiento se selecciona del grupo que consta de un betabloqueante, un inótropo, un diurético, un inhibidor de ECA, un antagonista de A II, BNP, un bloqueante de Ca2+, un antagonista de receptores de endotelina y un inhibidor de HDAC.

8. El inhibidor para uso de acuerdo con el punto 1, en que la administración del inhibidor mejora uno o más síntomas de la hipertrofia cardíaca patológica, la

insuficiencia cardíaca o el infarto de miocardio en un sujeto, en que dicha mejora de uno o más síntomas se selecciona del grupo que consta de un aumento de la capacidad de ejercicio, un aumento del volumen de eyección cardíaca, una disminución de la presión diastólica final del ventrículo izquierdo, una disminución de la presión de enclavamiento capilar pulmonar, un aumento del gasto cardíaco o del índice cardíaco, una reducción de las presiones de las arterias pulmonares, una disminución de las dimensiones sistólica y diastólica finales del ventrículo izquierdo, una disminución del estrés de las paredes de los ventrículos izquierdo y derecho, una disminución de la tensión de la pared, un aumento de la calidad de vida y una disminución de la morbilidad o la mortalidad relacionadas con la enfermedad.

9. El uso de un inhibidor de miR-208 para la preparación de una composición farmacéutica para uso en un procedimiento para la prevención o el tratamiento de la hipertrofia cardíaca patológica, la insuficiencia cardíaca o el infarto de miocardio, en que el inhibidor de miR-208 es un oligonucleótido no codificante con una secuencia que es complementaria de una secuencia de miR-208.

Se desvela un procedimiento para regular la contractilidad y la remodelación cardíacas que comprende la administración de un modulador de la expresión o la actividad de miR-208 a células del corazón. Se desvela un procedimiento para regular la expresión génica de las proteínas contráctiles cardíacas que comprende la administración de un modulador de la expresión o la actividad de miR-208 a células del corazón. El modulador puede ser un agonista o un antagonista de la expresión o la actividad de miR-208. Se desvela un procedimiento para reducir la expresión de β-MHC en células del corazón que comprende la administración de un inhibidor de la expresión o la actividad de miR-208 a las células del corazón. Se desvela un procedimiento para aumentar la expresión de β-MHC en células del corazón que comprende el aumento de la expresión o la actividad del miR-208 endógeno o la administración de un miR-208 exógeno a las células del corazón. Se desvela un procedimiento para aumentar la expresión de un gen de una proteína contráctil del músculo esquelético rápido en células del corazón que comprende la administración de un inhibidor de la expresión o la actividad de miR-208 a las células del corazón. Se desvela un procedimiento para disminuir la expresión de un gen de una proteína contráctil del músculo esquelético rápido en células del corazón que comprende el aumento de la expresión o la actividad del miR-208 endógeno o la administración de un miR-208 exógeno a las células del corazón. Algunos ejemplos de genes de proteínas contráctiles del músculo esquelético rápido que pueden aumentarse o disminuirse de acuerdo con los procedimientos desvelados incluyen: troponina I de músculo esquelético, troponina T3, cadena ligera de miosina o α-actina de músculo esquelético.

Se desvela un procedimiento para el tratamiento de la hipertrofia cardíaca patológica o la insuficiencia cardíaca que comprende: la identificación de un paciente con hipertrofia cardíaca, insuficiencia cardíaca o remodelación después de un infarto de miocardio; y la inhibición de la expresión o la actividad de miR-208 en células del corazón del paciente. Se desvela un procedimiento para la prevención de la hipertrofia patológica o la insuficiencia cardíaca que comprende: la identificación de un paciente con riesgo de padecer una hipertrofia cardíaca patológica o una... [Seguir leyendo]

1. Un inhibidor de miR-208 para uso en un procedimiento para la prevención o el tratamiento de la hipertrofia cardíaca patológica, la insuficiencia cardíaca o el infarto de miocardio, en que el inhibidor de miR-208 es un oligonucleótido no codificante con una secuencia que es complementaria de una secuencia de miR-208.

2. El inhibidor para uso de acuerdo con la reivindicación 1, en que el inhibidor es un oligonucleótido monocatenario de poca longitud, manipulado químicamente y complementario de miR-208 que bloquea la función de miR-208.

3. El inhibidor para uso de acuerdo con la reivindicación 1, en que el oligonucleótido no codificante tiene una secuencia complementaria de SEQ ID NO:5.

4. El inhibidor para uso de acuerdo con la reivindicación 1, en que el oligonucleótido no codificante contiene al menos un nucleótido modificado con 2’-Ometilo.

5. El inhibidor para uso de acuerdo con la reivindicación 1, en que el inhibidor se administra a un sujeto que lo necesita por vía intravenosa, oral, transdérmica, por liberación mantenida, liberación controlada, liberación retardada, mediante supositorios, por vía subcutánea, intraperitoneal o sublingual o por inyección directa en el tejido cardíaco.

6. El inhibidor para uso de acuerdo con la reivindicación 1, en que el inhibidor se administra a un sujeto que lo necesita en combinación con un segundo tratamiento cardíaco.

7. El inhibidor para uso de acuerdo con la reivindicación 6, en que dicho segundo tratamiento se selecciona del grupo que consta de un betabloqueante, un inótropo, un diurético, un inhibidor de ECA, un antagonista de A II, BNP, un bloqueante de Ca2+, un antagonista de receptores de endotelina y un inhibidor de HDAC.

8. El inhibidor para uso de acuerdo con la reivindicación 1, en que la administración del inhibidor mejora uno o más síntomas de la hipertrofia cardíaca patológica, la insuficiencia cardíaca o el infarto de miocardio en un sujeto, en que dicha mejora de uno o más síntomas se selecciona del grupo que consta de un aumento de la capacidad de ejercicio, un aumento del volumen de eyección cardíaca, una disminución de la presión diastólica final del ventrículo izquierdo, una disminución de la presión de enclavamiento capilar pulmonar, un aumento del gasto cardíaco o del índice cardíaco, una reducción de las presiones de las arterias pulmonares, una disminución de las dimensiones sistólica y diastólica finales del ventrículo izquierdo, una disminución del

estrés de las paredes de los ventrículos izquierdo y derecho, una disminución de la tensión de la pared, un aumento de la calidad de vida y una disminución de la morbilidad o la mortalidad relacionadas con la enfermedad.

9. El uso de un inhibidor de miR-208 para la preparación de una composición farmacéutica para uso en un procedimiento para la prevención o el tratamiento de la hipertrofia cardíaca patológica, la insuficiencia cardíaca o el infarto de miocardio, en que el inhibidor de miR-208 es un oligonucleótido no codificante con una secuencia que es complementaria de una secuencia de miR-208.