Diagnóstico y/o pronóstico de la disfunción renal.

Un método para el pronóstico de una disfunción renal inducida por un trauma físico,

hipotensión, sepsis y/o síndrome de choque séptico, en donde el método comprende las operaciones de:

a) determinar el nivel de una citocina antiinflamatoria presente en una muestra de orina de un sujeto antes de un trauma físico, antes de un proceso hipotensivo, antes de una sepsis y/o antes de un síndrome de choque séptico;

b) determinar el nivel de la citocina antiinflamatoria presente en una muestra de orina del sujeto después de un trauma físico, después o durante un proceso hipotensivo, después o durante una sepsis y/o después o durante un síndrome de choque séptico;

c) calcular la diferencia entre el nivel de la citocina antiinflamatoria determinado en la operación a) y el nivel de la citocina antiinflamatoria determinado en la operación b); y

d) proporcionar un diagnóstico y/o pronóstico basándose en una comparación entre la diferencia calculada en la operación c) y la diferencia calculada en la operación c) cuando las operaciones a) y b) se llevan a la práctica sobre un grupo testigo, en donde los sujetos que muestran una diferencia calculada en la operación c) que es más pequeña que la diferencia calculada en la operación c) cuando las operaciones a) y b) se llevan a la práctica sobre un grupo testigo presentan un riesgo de desarrollar disfunción renal mayor que el normal, consistiendo el grupo testigo en individuos que no presentan disfunción renal el quinto día después de un trauma físico; después o durante un proceso hipotensivo; después o durante una sepsis; y/o después o durante un síndrome de choque séptico.

Diagnóstico y/o pronóstico de la disfunción renal

La presente invención se refiere a un método para diagnosticar y/o pronosticar una disfunción renal.

Aparte del negativo impacto directo de un trauma físico sobre el cuerpo (por ejemplo, de las lesiones causadas por la cirugía o por accidentes de tráfico, o de procedimientos quirúrgicos tales como un baipás sanguíneo a través de una máquina de corazón-pulmón) , los sujetos que padecen un trauma físico desarrollan a menudo una disfunción renal aguda. Otras causas de una disfunción renal aguda similar incluyen estados hipotensivos prolongados (asociados con isquemia de la mucosa intestinal y con translocación de endotoxinas del intestino a la circulación) , sepsis y síndromes de choque séptico.

En una población de pacientes que tienen una función renal normal, el diagnóstico de una disfunción renal postraumática, inducida por un estado hipotensivo, inducida por una sepsis y/o inducida por un síndrome de choqueséptico se puede llevar a cabo basándose en una caída del Índice de Filtración Glomerular (GFR; del inglés, Glomerular Filtration Rate) en comparación con el GFR normal o de línea de base, según se mide, por ejemplo, mediante la prueba de MDRD (explicada más adelante con mayor detalle) . La limitación de un diagnóstico o pronóstico basado en dichas mediciones es que normalmente lleva varios días el estimar por MDRD que han caído los valores de GFR. Cuando se detecta la caída del GFR, a menudo es demasiado tarde para establecer medidas terapéuticas para evitar el ulterior deterioro de la función renal. El reto a que se enfrenta, por ejemplo, el médico "perioperativo" (implicado en la preparación, ejecución y/o recuperación de una cirugía) o el médico de cuidados intensivos es identificar un marcador biológico de disfunción renal 48 horas antes de que se materialice dicha disfunción (es decir, mientras existe aún la posibilidad de que se tomen medidas preventivas en la unidad de cuidados intensivos; tal como llevar rápidamente las presiones sanguíneas de dichos pacientes a valores supranormales, una intervención que por derecho propio no está exenta de riesgo en el contexto posoperativo a no ser que esté justificada por la presencia de un riesgo aún mayor de una insuficiencia renal inminente, tal como se podría identificar mediante la prueba de acuerdo con la presente invención) .

Está bien documentado que un trauma en el cuerpo induce una respuesta proinflamatoria plasmática aguda (a menudo transitoria) . Se ha mostrado que la magnitud de esta respuesta proinflamatoria plasmática aguda se correlaciona con una disfunción renal postraumática (Gormley et al., Anesthesiology, 2000, 93) . Otras causas de una similar respuesta proinflamatoria nefrotóxica aguda incluyen estados hipotensivos prolongados, asociados con isquemia de la mucosa intestinal y con translocación de endotoxinas del intestino a la circulación) , y sepsis y síndromes de choque séptico, todos los cuales van normalmente precedidos por, o están normalmente asociados con, una respuesta inflamatoria sistémica (SIRS) caracterizada por aumentos agudos de mediadores proinflamatorios en la sangre. Un mecanismo de cómo dichas respuestas proinflamatorias agudas, cuando se filtran de la sangre, dañan los túbulos renales fue sugerido por Chatterjee, quien demostró que el TNF-α aplicado in vitro a túbulos proximales en cultivo celular conduce a un daño celular (Markewitz, J. Clin. Invest. 1993; 91; Chatterjee et al., Exp. Nephrol. 1999; 7: 438-8) . Después de una estimulación con la combinación de las citocinas inflamatorias IL1-beta, TNF-alfa e IFN-gamma, las células tubulares proximales presentan in vitro un aumento, dependiente del tiempo, de inducción de NO sintasa inducible y la correspondiente producción de NO hasta una concentración citotóxica, un efecto que era inhibido por L-NMMA (Chatterjee et al., Exp. Nephrol. 1999; 7: 438-8) . La estimulación de células epiteliales de riñón de rata con TNF-alfa e IFN-gamma aumentó drásticamente el nivel de mRNA de óxido nítrico sintasa inducible (Markewitz, J. Clin. Invest. 1993; 91) .

Numerosas publicaciones muestran que los niveles de citocinas antiinflamatorias urinarias muestran drásticos aumentos después de un trauma y, en realidad, reflejan el susodicho aumento en el nivel de respuestas proinflamatorias. Véase, por ejemplo, Gormley et al., Cytokine, 21 de enero de 2002, 17 (2) . Además de esto, se ha demostrado que la magnitud de los aumentos postraumáticos de citocinas antiinflamatorias se correlaciona con la magnitud de la lesión y la disfunción renales. Véanse, por ejemplo: Litalien et al., Pediatr. Nephrol., noviembre de 1999, 13 (9.) ; Gretchen et al., Anesthesiology, noviembre de 2000; Gormley et al., Anesthesiology, 2000, 93; y la Publicación de Patente Europea nº 1962092 A (Renovar, Inc.) . De la presentación de estos resultados en las publicaciones anteriormente mencionadas resulta evidente que el drástico aumento de citocinas antiinflamatorias se propone como un marcador directamente proporcional para la disfunción renal.

Los inventores se vieron por lo tanto sorprendidos al hallar que, cuando analizaron las respuestas de citocinas antiinflamatorias urinarias de un grupo de sujetos postraumáticos mayor que el previamente analizado, una población de esos sujetos presentaba sólo una respuesta de citocinas antiinflamatorias moderada o insignificante después de un trauma físico, a diferencia de la esperada elevación drástica de respuestas de citocinas antiinflamatorias previamente comunicada y como la experimentada por la mayoría de los sujetos. Tras otro análisis de este subgrupo, resultó sorprendente hallar que sus miembros presentaban un riesgo elevado de desarrollar disfunción renal cuando se comparaban con aquellos que mostraban la esperada elevación drástica de respuestas de citocinas antiinflamatorias urinarias después de un trauma físico. Tales hallazgos son contrarios a la previamente aceptada conclusión de que los aumentos postraumáticos de citocinas antiinflamatorias urinarias se correlacionan con la magnitud de la lesión y la disfunción renales.

Sin pretender una restricción por la teoría, pero en interés de la claridad, los inventores creen que la razón de que los estudios previos sugirieran que las citocinas antiinflamatorias urinarias reflejaban directamente la lesión renal era que los marcadores de lesión renal que se utilizaron en esos estudios previos eran generalmente marcadores subclínicos. Los presentes inventores proponen ahora que estos marcadores subclínicos no reflejaban necesariamente una disfunción renal clínicamente significativa porque los efectos nefrotóxicos del estímulo nocivo que causaba la lesión subclínica eran adecuadamente contrarrestados, en los pacientes en que esto bien ocurría, por una adecuada respuesta inmune antiinflamatoria urinaria y compensatoria simultáneamente generada. Los pacientes que no desarrollan una adecuada respuesta inmune antiinflamatoria urinaria y compensatoria son los que, como proponen los presentes inventores, van a desarrollar una lesión renal clínicamente significativa, una hipótesis que no puede ser desarrollada a partir de los estudios previamente disponibles. Además, a causa de restricciones económicas, los estudios previos se llevaron a la práctica sobre un número relativamente pequeño de personas (menos de 30 personas) , lo que significó que el subgrupo de individuos con una escasa respuesta antiinflamatoria compensatoria no proporcionó un impacto estadísticamente significativo sobre los resultados previamente obtenidos (el presente estudio fue llevado a la práctica sobre casi 400 personas) .

Después de una amplia experimentación, los inventores han proporcionado una evidencia que sustenta el concepto de que controlando un nivel reducido de respuesta de citocinas antiinflamatorias en un sujeto postraumático o hipotensivo, o en un sujeto que padece sepsis o síndrome de choque séptico, se puede llegar a un método de diagnóstico y/o pronóstico para la disfunción renal.

En consecuencia, en un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un método para el pronóstico de una disfunción renal inducida por un trauma físico, hipotensión, sepsis y/o síndrome de choque séptico, en donde el método comprende las operaciones de:

a) determinar el nivel de una citocina antiinflamatoria presente en una muestra de orina de un sujeto antes de un trauma físico, antes de un proceso hipotensivo, antes de una sepsis y/o antes de un síndrome de choque séptico;

b) determinar el nivel de la citocina antiinflamatoria presente en una muestra de orina del sujeto después de un trauma físico, después o durante un proceso hipotensivo,... [Seguir leyendo]

1. Un método para el pronóstico de una disfunción renal inducida por un trauma físico, hipotensión, sepsis y/o síndrome de choque séptico, en donde el método comprende las operaciones de:

a) determinar el nivel de una citocina antiinflamatoria presente en una muestra de orina de un sujeto antes de un trauma físico, antes de un proceso hipotensivo, antes de una sepsis y/o antes de un síndrome de choque séptico;

b) determinar el nivel de la citocina antiinflamatoria presente en una muestra de orina del sujeto después de un trauma físico, después o durante un proceso hipotensivo, después o durante una sepsis y/o después o durante un síndrome de choque séptico;

c) calcular la diferencia entre el nivel de la citocina antiinflamatoria determinado en la operación a) y el nivel de la citocina antiinflamatoria determinado en la operación b) ; y

d) proporcionar un diagnóstico y/o pronóstico basándose en una comparación entre la diferencia calculada en la operación c) y la diferencia calculada en la operación c) cuando las operaciones a) y b) se llevan a la práctica sobre un grupo testigo, en donde los sujetos que muestran una diferencia calculada en la operación c) que es más pequeña que la diferencia calculada en la operación c) cuando las operaciones a) y b) se llevan a la práctica sobre un grupo testigo presentan un riesgo de desarrollar disfunción renal mayor que el normal, consistiendo el grupo testigo en individuos que no presentan disfunción renal el quinto día después de un trauma físico; después o durante un proceso hipotensivo; después o durante una sepsis; y/o después o durante un síndrome de choque séptico.

2. Un método según la Reivindicación 1, en donde la disfunción renal es disfunción renal aguda.

3. Un método según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la muestra de orina analizada en la operación b) se obtiene del sujeto después de un trauma físico, un proceso hipotensivo, una sepsis y/o un síndrome de choque séptico en menos de 48 horas.

4. Un método según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende además las operaciones de:

a'') determinar el nivel de una o más citocinas antiinflamatorias adicionales presentes en una muestra de orina de un sujeto antes de un trauma físico, antes de un proceso hipotensivo, antes de una sepsis y/o antes de un síndrome de choque séptico;

b'') determinar el nivel de una o más citocinas antiinflamatorias adicionales presentes en una muestra de orina del sujeto después de un trauma físico, después o durante un proceso hipotensivo, después o durante una sepsis y/o después o durante un síndrome de choque séptico;

c'') calcular la diferencia entre el nivel de la una o más citocinas antiinflamatorias adicionales determinado en la operación a'') y el nivel de la una o más citocinas antiinflamatorias adicionales determinado en la operación b'') ; y

d'') proporcionar un diagnóstico y/o pronóstico basándose en una comparación entre la diferencia calculada en la operación c'') y la diferencia calculada en la operación c'') cuando se llevan las operaciones a'') y b'') a la práctica sobre un grupo testigo.

5. Un método según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende además las operaciones de:

a''') determinar el nivel de NGAL y/o IL-18 presentes en una muestra de orina de un sujeto antes de un trauma físico, antes de un proceso hipotensivo, antes de una sepsis y/o antes de un síndrome de choque séptico;

b''') determinar el nivel de NGAL y/o IL-18 presentes en una muestra de orina del sujeto después de un trauma físico, después o durante un proceso hipotensivo, después o durante una sepsis y/o después o durante un síndrome de choque séptico;

c''') calcular la diferencia entre el nivel de NGAL y/o IL-18 determinado en la operación a''') y el nivel de NGAL y/o IL18 determinado en la operación b''') ; y

d''') proporcionar un diagnóstico y/o pronóstico basándose en una comparación entre la diferencia calculada en la operación c''') y la diferencia calculada en la operación c''') cuando se llevan las operaciones a''') y b''') a la práctica sobre un grupo testigo.

6. Un método según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la citocina antiinflamatoria, o la una o más citocinas adicionales, se seleccionan del grupo que consiste en TNFsr1, TNFsr2, IL-1ra y cualquier combinación de los mismos.

7. Un método según la Reivindicación 6, en donde, cuando la citocina es TNFsr2 y la diferencia calculada en la operación c) cuando se llevan las operaciones a) y b) a la práctica sobre un grupo testigo es 7500 o más pg de TNFsr2 en un ml de orina mayor que la diferencia calculada en c) , el sujeto presenta un riesgo de desarrollar disfunción renal mayor que el normal.

8. Un método según la Reivindicación 6, en donde, cuando la citocina es IL-1ra y la diferencia calculada en la operación c) cuando se llevan las operaciones a) y b) a la práctica sobre un grupo testigo es 35.000 o más pg de IL1ra en un ml de orina mayor que la diferencia calculada en c) , el sujeto presenta un riesgo de desarrollar disfunción renal mayor que el normal.

Figura 1

Figura 4 Figura 5

Figura 7 Figura 8