La invención se refiere a secuencias de péptidos, composiciones que comprenden las secuencias de péptidos, y en particular vacunas de la gripe que comprenden las secuencias y las composiciones, y uso de las secuencias. La presente invención se refiere especialmente a vacunas que son protectoras contra una pluralidad de cepas del virus de la gripe, que incluyen los virus existentes a través de diferentes especies (por ejemplo, protectoras contra gripe humana y aviar) así como virus futuros que han mutado de virus existentes (tal como una forma mutada de gripe aviar que es fácilmente transmisible de ser humano a ser humano, que potencialmente puede originar a una gripe pandémica). La defensa contra la enfermedad es crítica para la supervivencia de todos los animales, y el mecanismo de defensa empleado para este fin es el sistema inmunológico del animal. La comprensión del sistema inmunológico es en consecuencia una clave para la comprensión del desarrollo de tratamientos nuevos y más sofisticados para seres humanos y animales similares. El mecanismo de operación del sistema inmunológico ha estado bajo investigación durante muchos años. El sistema está compuesto de numerosos tipos celulares y una variedad de moléculas, lo que lo hace extremadamente complejo. Aun después de muchos años de estudio, la extensión completa de los componentes del sistema inmunológico, y sus interacciones entre sí, no está perfectamente entendida. Hace muchos años que se reconoció que una persona que se recupera de una enfermedad particular puede obtener alguna protección en el futuro contra esa enfermedad, pero no contra una enfermedad que esa persona no ha contraído todavía. Este aspecto fundamental del sistema inmunológico se interpretó en ese momento por la consideración de que el sistema inmunológico adquirió una clase de memoria contra ciertos patógenos una vez que ha ocurrido la exposición a tales patógenos, esta memoria es específica para una enfermedad determinada. En forma gradual, se ha conocido que la exposición a variantes menos perjudiciales de un patógeno podría inducir la protección contra variantes más perjudiciales (por ejemplo, la exposición a la viruela de la vaca para proteger contra la viruela, o exposición a un ántrax inactivado para proteger contra un ántrax vivo). En consecuencia, surgió la idea de la vacunación contra una enfermedad. En la actualidad se sabe que el sistema inmunológico tiene al menos dos divisiones: inmunidad innata e inmunidad adaptativa. El sistema innato es completamente funcional antes de que un patógeno entre al sistema, mientras que el sistema adaptativo cambia después que el patógeno entra en el sistema, Posteriormente este desarrolla un ataque específico para el patógeno. El sistema innato comprende numerosos componentes, que incluye fagocitos tales como macrófagos, los cuales (como sugiere el nombre) comen o ingieren cuerpos extraños tales como patógenos. Normalmente, pero no en forma exclusiva, la presente invención se refiere al sistema inmunológico adaptativo, y a menos que indique específicamente lo contrario, sistema inmunológico en el presente contexto se refiere al sistema inmunológico adaptativo. A fin de entender más completamente cómo funciona el sistema inmunológico, se debe considerar cuidadosamente el papel de sus componentes individuales. Con respecto al sistema inmunológico adaptativo, es bien conocido que la inmunidad contra los patógenos es provista por la acción de los linfocitos, que constituyen el tipo celular más común del sistema inmunológico. Existen dos tipos de linfocitos: el linfocito B y el linfocito T. Estos se denominan generalmente células B y células T respectivamente. Las células B tienen la capacidad de desarrollarse en células plasmáticas, que fabrican anticuerpos. Los anticuerpos son componentes muy importantes del sistema inmunológico animal. Estos se producen en respuesta a alguna porción distintiva del patógeno invasor (un antígeno del patógeno los antígenos de la presente se definen como cualquier sustancia extraña reconocida por el sistema inmunológico) y son usualmente específicos para ese patógeno. Sin embargo, si dos patógenos son muy similares, o al menos contienen el mismo antígeno, entonces los anticuerpos producidos contra uno pueden no obstante ser efectivos contra el otro (pueden reaccionar en forma cruzada). Esto explica por qué la inoculación con virus de la viruela bovina puede proteger contra la viruela. Es importante interpretar que los anticuerpos `reconocen solo una pequeña porción de la molécula antigénica del patógeno más que el patógeno como un todo. Estas porciones se denominan epitopes. Las células T no poseen o producen anticuerpos. En cambio, reconocen fragmentos (es decir, epitopes) del antígeno extraño complejado con el complejo de histocompatibilidad mayor (MHC) (o en el caso de los seres humanos, antígeno leucocitario humano (HLA)) por medio de un receptor especializado conocido como TCR (receptor de células T). Las células T son divisibles por sí mismas en subconjuntos que pueden tener una función regulatoria o una función efectora. Las células efectoras están involucradas en la realización de la eliminación de las sustancias extrañas. Por ejemplos, las células T citotóxicas (CTL) son células efectoras que pueden destruir las células infectadas, así como otras especies no deseadas tales como células tumorales. Las células T regulatorias, a la inversa, cumplen un papel de ayudar a que las células efectoras T y B sean más efectivas. Debido a esta función, 2   estas células T regulatorias se denominan frecuentemente células T `auxiliares. Otras células T regulatorias, denominadas células T `supresoras, se considera que inhiben las respuestas inmunes, pero estas son menos bien entendidas. Las células T regulatorias también pueden interactuar con los componentes del sistema inmunológico innato para reforzar su actividad. En un individuo sano normal, los linfocitos en el sistema inmunológico permanecen en un estado de `reposo inactivo hasta desencadenar una respuesta inmune. Cuando se requiere una respuesta inmune, los linfocitos son activados, proliferan y comienzan a llevar a cabo sus funciones designadas. Por ejemplo, se activa cualquier célula T que despliega sobre su superficie un TCR que reconoce un epitope del patógeno invasor complejado con una molécula MHC, prolifera (esto se denomina expansión clonal) y la descendencia resultante comienza a realizar activamente sus funciones efectoras predeterminadas requeridas para combatir los organismos invasores. Cuando se completa la respuesta inmune, (es decir, los patógenos y/o células infectadas se han eliminado) los linfocitos revierten a un estado en reposo nuevamente. Este estado de reposo no es, sin embargo, equivalente al estado inactivo inicial. Los linfocitos activados, pero en reposo, se pueden reclutar e inducir rápidamente para proliferar en respuesta a una infección con el mismo patógeno, o estrechamente relacionado en un momento posterior. Esta capacidad de los linfocitos en reposo activados, para desencadenar una respuesta más rápida y potente después de un segundo encuentro con un patógeno invasor, proporciona efectivamente el sistema inmunológico con `memoria. El aprovechamiento de la memoria inmunológica del sistema es la base para los fármacos inmunoprofilácticos de largo plazo (por ejemplo, vacunas) y aún es el objetivo del desarrollo de fármacos inmunoterapéuticos al largo plazo. A fin de que las células realicen sus funciones dentro de los sistemas complejos de un animal, las células deben tener `receptores en sus superficies. Estos receptores son capaces de `reconocer sustancias específicas que controlan varios procesos esenciales tales como activación, proliferación y adherencia a otras células o sustratos. Por ejemplo, en el caso del sistema inmunológico, los receptores de las células T y B les permiten no solo reconocer el antígeno sino también interactuar entre sí y de este modo regular sus actividades. Sin estos receptores, las células pueden carecer de un medio esencial de comunicación y pueden ser incapaces de actuar efectivamente en la forma concertada que es esencial para el sistema inmunológico de un organismo multicelular. A fin de poder reconocer específicamente y tratar con la amplia variedad de patógenos presentes en el ambiente, el sistema inmunológico ha desarrollado dos tipos de receptor de antígeno altamente variables en los linfocitos: anticuerpos en las células B y receptores de las células T, o TCR, en las células T. Existe una gran cantidad de diferentes receptores posibles en el organismo, para permitir que el sistema inmunológico reconozca una amplia variedad de patógenos invasores. En efecto hay aproximadamente 10 12 receptores de células B y T diferentes en un individuo.... [Seguir leyendo]

REIVINDICACIONES:

1. Un polipéptido que consiste en hasta 40 aminoácidos, tal polipéptido comprende una secuencia que tiene al menos 95% de homología con la SEQ ID 1:

SEQ ID 1 DLEALMEWLKTRPILSPLTKGILGFVFTLTVP

en la que, el polipéptido es inmunogénico en un vertebrado que expresa un alelo del complejo de histocompatibilidad mayor (MHC) y es inmunogénica para una pluralidad de cepas del virus de la gripe.

2. Un polipéptido de acuerdo con la reivindicación 1, tal polipéptido comprende un epitope del linfocito T citotóxico (CTL) .

3. Un polipéptido de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, que consiste en hasta 35 residuos de aminoácidos.

4. Una composición de polipéptido que comprende uno o más polipéptidos definidos en cualquier reivindicación precedente, además que comprende uno o más polipéptidos que tienen no más de 100 aminoácidos, los polipéptidos que comprende: una secuencia que tiene al menos 85% de homología con cualquiera de las SEQ ID 2-6; o que comprende dos o más epitopes que tienen 7 aminoácidos o más, cada epitope que tiene al menos 85% de homología con una subsecuencia de cualquiera de las SEQ ID 2-6 que tiene la misma longitud que el epitope:

SEQ ID 2 LLYCLMVMYLNPGNYSMQVKLGTLCALCEKQASHS

SEQ ID 3 DLIFLARSALILRGSVAHKSC

SEQ ID 4 PGIADIEDLTLLARSMVVVRP

SEQ ID 5 LLIDGTASLSPGMMMGMFNMLSTVLGVSILNLGQ

SEQ ID 6 IIGILHLILWILDRLFFKCIYRLF

5. Un polipéptido, o composición de polipéptido, definido en cualquier reivindicación precedente para usar en medicina.

6. Un método de producir un polipéptido como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1-5, tal método comprende combinar dos o más epitopes para formar el polipéptido.

7. Una composición de medicamento o vacuna contra la gripe, que comprende un polipéptido, o una composición de polipéptido, que se define en cualquiera de las reivindicaciones 1-5, y opcionalmente un excipiente y/o adyuvante apropiado.

8. Un método para producir una composición de medicamento o vacuna definida en la reivindicación 7, tal método comprende mezclar un polipéptido, o una composición de polipéptido, que se define en cualquiera de las reivindicaciones 1-5; con un excipiente y/o adyuvante apropiado.

9. Uso de un polipéptido, una composición de polipéptido, o una composición de medicamento o vacuna , que se define en cualquiera de las reivindicaciones 1-5, y 7 en la fabricación de un medicamento o vacuna en el tratamiento o prevención de la gripe.

10. Un polipéptido, método, medicamento, vacuna o uso de acuerdo con cualquier reivindicación precedente, en el que la gripe es una cepa de gripe A o la gripe es una cepa de gripe B.

Figura 1 Figura 2 Figura 3