UN MÉTODO Y UN DISPOSIIVO PARA DEFINIR UN VOLUMEN PEQUEÑO DE UNA MUESTRA DE LÍQUIDO.

Un método y un dispositivo para definir un volumen pequeño de una muestra de líquido La presente invención se refiere a un método y a un dispositivo para definir un pequeño volumen de una muestra de liquido separándolo de un volumen indefinido relativamente grande de dicha muestra y que resulta útil, por ejemplo, en análisis de sangre, para proporcionar un volumen definido con precisión de una muestra de sangre. En análisis o pruebas de sangre, es de crucial importancia definir un volumen preciso de una muestra de sangre, puesto que tal volumen definido con precisión se utiliza posteriormente para ciertas pruebas. El volumen definido de manera precisa de la muestra de sangre se diluye normalmente mediante un volumen definido con precisión de un agente diluyente o lisogénico, con objeto de tener un desleimiento o dilución generalmente de 1:400 cuando se refiere a glóbulos blancos y generalmente de 1:40.000 cuando se refiere a contar glóbulos rojos, en el ultimo caso la dilución normalmente se lleva a cabo en dos etapas. Es evidente, que las mediciones de los volúmenes de muestra y de los volúmenes de líquido de dilución se deben realizar de un modo preciso y repetible de tal manera que no solo se pueda garantizar siempre un grado de dilución correcto sino también se asegure una mezcla minuciosa y uniforme de los dos volúmenes. Aparentemente, la medición precisa de los volúmenes de muestra es la operación más crítica en el procedimiento de dilución, dado que los volúmenes implicados son extremadamente pequeños comparados los correspondientes volúmenes de diluyente. Un volumen de muestra típico en el estado de la técnica de dispositivos de análisis de sangre es de 20 µl. El estado de la técnica de dispositivo utiliza frecuentemente válvulas giratorias para definir un volumen de muestra a diluirse. En los documentos WO 98/22797, WO 99/01742 y WO 03/44488 se describen ejemplos de tales dispositivos. Una válvula giratoria comprende un cuerpo de válvula cilíndrico recibido de manera giratoria en el interior de una abertura cilíndrica correspondiente de un alojamiento de válvula. Entre posiciones opuestas en la periferia del cuerpo de válvula se prolonga un canal de medición que tiene un volumen definido. Al hacer girar el cuerpo de válvula entre posiciones definidas, los extremos opuestos del canal de medición se ponen en comunicación con las embocaduras de varios canales en la abertura cilíndrica del cuerpo de válvula. De esta manera, en una posición giratoria del alojamiento de válvula, el canal de medición se puede llenar con el volumen definido de una muestra que fluye entre dos embocaduras opuestas de primer canal en la periferia interna de la apertura cilíndrica. Después de hacer girar hasta otra posición de giro, separando de ese modo el volumen definido de las dos embocaduras opuestas de primer canal y poniendo simultáneamente en comunicación los extremos opuestos del canal de medición con dos embocaduras opuestas de segundo canal en la periferia interior de la abertura cilíndrica que permiten lavar el canal de medición con un liquido diluyente con objeto de lograr una relación de dilución deseada. Aunque funcionan bien, debido a su relativa complejidad, las válvulas rotativas no son convenientes para la producción masiva deseable para una producción económica de equipo de muestras de sangre desechables. La presente invención pretende proporcionar un método simple y fiable para separar al menos un pequeño volumen definido de una muestra de liquido de un volumen indefinido relativamente grande de dicha muestra así como un dispositivo igualmente simple, fiable y barato para llevar a cabo el método, particularmente adaptado para producciones masivas reproducibles. El método según la presente invención implica las operaciones de proporcionar en una superficie de un primer cuerpo al menos una cavidad que contenga dicho pequeño volumen definido; aplicando dicho volumen relativamente grande de dicha muestra sobre dicha superficie y dentro de dicha al menos una cavidad; desplazando relativamente dicho primer cuerpo y unos medios de raspado de modo que dichos medios de raspado pasen por dicha al menos una cavidad, raspando de este modo un volumen de dicho relativamente gran volumen de él, dejando dicho pequeño volumen definido en dicha al menos una cavidad. El dispositivo según la presente invención para realizar el método incluye un primer cuerpo y un segundo cuerpo. En una superficie del mismo el primer cuerpo tiene al menos una cavidad (depresión, rebajo, muesca, cavidad, grabado, deformación) que contiene dicho volumen definido. El segundo cuerpo incluye un borde relativamente deslizable a lo largo de dicha superficie y sobre la cavidad, que de ese modo separa (rascando) de esa superficie un volumen excesivo de muestra, dejando el volumen definido dentro de la cavidad. A continuación se describirán realizaciones de las presentes invenciones, haciéndose referencia a los dibujos que se acompañan en los que: Las Figuras 1a y 1b son vistas de secciones en esquema que muestran el principio de un dispositivo según la invención mostradas en una primera y en una segunda posición respectivamente; La Figura 2 es una vista en perspectiva que muestra en esquema una primera realización principal del dispositivo; La Figura 3 es una vista similar que muestra una segunda realización principal del dispositivo; La Figura 4 es una vista similar que muestra una tercera realización principal del dispositivo; 2   Las Figuras 5a y 5b, son vistas similares a las de las Figuras 1a y 1b, pero mostrando también un elemento de cierre entre los dos cuerpos; La Figura 5c es una ampliación de una porción de la Figura 5b; La Figura 6 es una vista en planta que muestra una realización de un elemento de cierre La Figura 7a es una vista similar a la de Figura 1, pero mostrando una realización alternativa del dispositivo que tiene un cuerpo separado para recibir una muestra; La Figura 7b es una vista en planta del cuerpo separado de la Figura 7a; Las Figuras 8a, 8b y 8c son vistas similares a las de las Figuras 1a y 1b, pero mostrando tres operaciones consecutivas en el funcionamiento de un dispositivo que tiene un raspador separado; y Las Figuras 9a 9e muestran varios ejemplos de configuraciones de cavidad y de diseños. El principio de un dispositivo que realiza la presente invención se muestra en particular en las Figuras 1a y 1b. Un primer cuerpo 10 tiene una superficie 11 en la que se dispone una cavidad 12 que tiene un volumen pequeño definido de una manera precisa. sobre la superficie 11 se aplica un volumen 13 indefinido, relativamente grande de una muestra, tal como una muestra de sangre, de tal manera que se asegura que la cavidad se llena con la muestra. Un segundo cuerpo 14 tiene un borde 15 que esta en contacto con la superficie 11 del primer cuerpo. Los cuerpos 10 y 14 son relativamente deslizables a lo largo de la superficie 11 como se indica por una flecha A, de modo que el borde después de pasar la cavidad raspa o corta un volumen 16 de la muestra a lo largo de la superficie 11 dejando justo lo definido con exactitud, una pequeña muestra de volumen17 en el interior de la cavidad 12. Esta situación se muestra en la Figura 1 b. En la práctica, el segundo cuerpo 14 tiene una superficie 18 que empieza en el borde 15 y enfrentada y en contacto con la superficie 11 del primer cuerpo de manera hermética a fluidos. Con el fin de diluir el volumen 17 de muestra pequeña, definida con precisión, a través del segundo cuerpo se prolongan dos canales 19, 20 y se abren en su superficie 18 en posiciones que permiten o habilitan la comunicación respectiva de fluido con la cavidad 12 como se muestra en la Figura 1b. Los canales se muestran aquí para prolongarse de una manera que converge en forma de V hacia la superficie 18. Evidentemente, los canales se pueden prolongar en otras direcciones hacia la superficie 11 y la cavidad 12 situada dentro de la misma, incluyendo direcciones de canal mutuamente paralelas. Los conductos 21, 22 indicados por líneas discontinuas conectan uno de los respectivos canales 19, 20 con uno de los respectivos receptáculos 23, 24. El receptáculo 23 se muestra en la Figura 1a para contener un volumen definido de un liquido 25, tal como un diluyente o un agente lisogénico. Cuando el primer y segundo cuerpos están en la posición relativa mostrada en la Figura 1b, el flujo desde el receptáculo 23 se dirigirá a través del conducto 21 al interior de la cavidad 12, enrasando de ese modo su volumen 17 de muestra y llevándolo a través del conducto 22 al interior del receptáculo 24 para proporcionar allí dentro un volumen de muestra diluida con una relación de dilución definida. El volumen de muestra diluida se puede llevar para que fluya de un lado a otro entre los dos receptáculos para asegurar la mezcla y dilución adecuadas,... [Seguir leyendo]

1.- Un método para separar al menos un pequeño volumen definido de una muestra de líquido de un volumen indefinido relativamente grande de dicha muestra, caracterizado por las operaciones de: - proporcionar en una superficie de un primer cuerpo al menos una cavidad con dicho pequeño volumen definido; - aplicar dicho volumen relativamente grande de dicha muestra sobre dicha superficie y dentro de al menos una cavidad; - desplazar relativamente dicho primer cuerpo y unos medios de raspado de modo que dichos medios de raspado pasen dicha al menos una cavidad, rascando por consiguiente un volumen de dicha superficie de dicho volumen relativamente grande y dejando dicho pequeño volumen definido en dicha al menos una cavidad. 2.- El método según la reivindicación 1, caracterizado porque dichos medios de raspado es un borde de un segundo cuerpo deslizable con respecto a dicho primer cuerpo 3.- El método según la reivindicación 1, caracterizado porque antes de que se aplique a dicha superficie dicho volumen relativamente grande de dicha muestra se aplica a una superficie receptora de muestra 4.- El método según la reivindicación 3, caracterizado porque dicho volumen relativamente grande de dicha muestra se aplica a dicha superficie poniendo en contacto dicha superficie receptora de muestra con dicha superficie. 5.- El método según la reivindicación 1, para diluir dicho volumen definido de dicha muestra, caracterizado por la operación de poner en contacto dicho pequeño volumen definido con un flujo de fluido diluyente que pasa por dicha al menos una cavidad. 6.- Un dispositivo que define un volumen de muestra para separar al menos un pequeño volumen definido de una muestra de liquido de un volumen indefinido relativamente grande de dicha muestra, incluyendo dicho dispositivo un primer cuerpo (10; 27; 36; 46) y un segundo cuerpo (14; 25;40; 50) desplazables entre si, caracterizado porque: dicho primer cuerpo (10; 27; 36; 46) tiene al menos una cavidad (12; 30; 39; 49) en una superficie (11; 28; 37; 47) del mismo, teniendo dicha al menos una cavidad dicho volumen definido; y dicho segundo cuerpo (14; 25; 40; 50; 14; 70) incluye un borde (15; 31; 41; 52; 57; 70) que se puede deslizar a lo largo de dicha superficie y sobre dicha superficie bajo un desplazamiento relativo de dichos cuerpos; la está disposición de tal manera que un volumen excesivo de dicho volumen indefinido de dicha muestra, después de depositar dicho volumen indefinido de dicha muestra sobre dicha superficie, se separa de dicho volumen indefinido bajo dicho desplazamiento relativo, dejando por consiguiente dentro de dicha cavidad un volumen de dicha muestra igual a dicho volumen definido. 7.- El dispositivo según la reivindicación 6, caracterizado porque dicho borde es un borde (15) del otro de dichos cuerpos (14). 8.- El dispositivo según la reivindicación 6, caracterizado porque dicho borde es un borde (57) de un medio de cierre (57) llevado por el otro de dichos cuerpos (14) 9.- El dispositivo según la reivindicación 8, caracterizado porque el otro de dichos cuerpos lleva dicho medio de cierre (57) en una superficie del mismo enfrentada a dicha superficie de dicho primer cuerpo (10). 10.- El dispositivo según la reivindicación 9, caracterizado porque dichos medios de cierre tienen una abertura situada de manera enfrentada a dicha cavidad (12) en una posición deslizante definida respecto a dichos dos cuerpos. 11.- El dispositivo según la reivindicación 10, caracterizado porque una porción de dichos medios de cierre (57) situada entre dicha abertura y dicho borde (57) de los mismos tiene una anchura que excede la dicha cavidad (12). 12.- El dispositivo según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 11 adaptado para diluir dicho pequeño volumen definido de dicha muestra, caracterizado por los medios (19, 20) para dirigir un liquido (25) al interior y al exterior de dicha cavidad (12). 13.- El dispositivo según la reivindicación 12, caracterizado porque dichos medios incluyen medios de conducción enfrentados a dicha al menos una cavidad (12) en una posición deslizante definida respeto a dichos cuerpos (10, 14; 10, 14). 14.- El dispositivo según la reivindicación 13, caracterizado porque dichos medios de conducción incluyen medios de 6   un primer canal (19) dirigidos hacia dicha cavidad (12) y medios de un segundo canal (20) dirigidos desde aquella. 15.- El dispositivo según la reivindicación 14, caracterizado por unos primeros medios de receptáculo (23) para un liquido conectado a dichos primeros medios de conducción (19, 21) y por unos segundos medios de receptáculo (24) para diluir una muestra conectada a dichos segundos medios de conducción (20, 22) 16.- El dispositivo según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 15, particularmente para realizar análisis de sangre, caracterizado por dos cavidades (29, 30) que tienen volúmenes diferentes. 7   8   9     11   12