MÉTODO PARA LA PREPARACIÓN DE 2-BENCILOXICICLOHEXILAMINA ÓPTICAMENTE ACTIVA.

Método para la preparación de compuestos ópticamente activos de las fórmulas ((R,

R)-I) y/o ((S,S)-I) que comprende los siguientes pasos: (a) reacción de una mezcla enantiomérica del trans-estereoisómero del compuesto de la fórmula (I) con un agente de acilación en presencia de una hidrolasa, en cuyo caso se obtiene una mezcla en la que un enantiómero del trans-estereoisómero del compuesto (I) está presente esencialmente en la forma acilada y el otro enantiómero del trans-estereoisómero del compuesto (I) se presenta esencialmente en la forma no acilada; (b) separación del enantiómero no acilado del trans-estereoisómero del compuesto (I) de la mezcla obtenida en el paso (a); (c) Hidrólisis del enantiómero esencialmente acilado, obtenido en el paso (b), del trans-estereoisómero del compuesto (I) para producir el enantiómero no acilado correspondiente de la amina (I); (d) trransformación de los compuestos ópticamente activos de las fórmulas ((R,R)-I) o ((S,S)-I), obtenidos, en el paso (b) o (c), mediante adición de un formador ácido de sal, en sus sales de amonio, en cuyo caso el formador ácido de sal se adiciona en forma de una solución acuosa y en cuyo caso, después de adicionar la solución acuosa, el agua se retira al menos parcialmente de la solución de reacción; (e) Aislamiento de las sales de amonio; y (f) liberación de las bases libres de las fórmulas ((R,R)-I) o ((S,S)-I) de las sales de amonio

La presente invención se refiere a un método para la preparación de trans-estereoisómeros ópticamente activos de 2-benciloxiciclohexilamina. Los compuestos ópticamente activos poseen un significado inmenso ante todo en el campo de la industria farmacéutica, ya que con frecuencia sólo un isómero ópticamente activo es activo terapéuticamente. De esta manera existe una demanda que crece permanentemente de los compuestos ópticamente activos en calidad de sustancias reactantes para la síntesis enantioselectiva de principios activos. Uno de estos bloques de construcción claves para la síntesis de nuevos principios activos es la trans-2-benciloxiciclohexilamina ópticamente activa.

15 La WO 96/23894 describe en general un método para la separación de racematos de aminas primarias y secundarias, sustituidas por heteroátomos, mediante reacción con un éster en presencia de una hidrolasa y mediante separación, a continuación, del enantiómero acilado enantioselectivamente de la amina sustituida con heteroátomo del enantiómero no convertido. Sin embargo, las unidades enantioméricas de los productos no son aún satisfactorias.

Fue objeto de la presente invención suministrar un proceso eficiente para la preparación de 2benciloxiciclohexilamina trans-estereoisomérica en esencia enantioméricamente pura. En especial, el proceso debe permitir la preparación de (R,R)-2-benciloxiciclohexilamina enantioméricamente pura en esencia, ante todo en una pureza enantiomérica de al menos 99 % ee, preferentemente de al menos 99,5 % ee y en especial de al menos 99,9 % ee.

De manera sorprendente se encontró que se obtiene 2-benciloxiciclohexilamina ópticamente activa si una mezcla de enantiómeros, en especial el racemato de estas aminas se N-acila de manera enantioselectiva en presencia de una hidrolasa.

Además se encontró que los trans-enantiómeros respectivos se obtienen en forma altamente pura si se obtienen mediante adición de un ácido (por ejemplo, ácido carboxílico, ácido mineral) en forma de sus sales de adición ácidas. Es objeto de la invención un proceso para la preparación de compuestos ópticamente activos de las fórmulas ((R,R)-I) y/o ((S,S)-I),

**(Ver fórmula)**

el cual comprende los siguientes pasos:

(a) Reacción de una mezcla enantiomérica del trans-estereoisómero del compuesto de la fórmula (I)

**(Ver fórmula)**

40 con un agente de acilación en presencia de una hidrolasa, en cuyo caso se obtiene una mezcla en la que un enantiómero del trans-estereoisómero del compuesto (I) se encuentra presente esencialmente en la forma acilada y el otro enantiómero del trans-estereoisómero del compuesto (I) está presente esencialmente en forma no acilada;

(b) Separación del enantiómero no acilado del trans-isómero del compuesto (I) de la mezcla obtenida en el paso (a);

(c) Hidrólisis del enantiómero esencialmente acilado, obtenido en el paso (b), del trans-estereoisómero del compuesto (I) para producir el enantiómero correspondiente no acilado de la amina (I);

(d) Conversión de los compuestos ópticamente activos obtenidos en el paso (b) o (c) de las fórmulas ((R,R)-I) o ((S,S)-I) en sus sales de amonio mediante adición de un formador ácido de sal, en cuyo caso el formador ácido de

45 sal se adiciona en forma de una solución acuosa y en cuyo caso después de la adición de la solución acuosa, el agua se retira de la solución de reacción al menos parcialmente;

(e) Aislamiento de las sales de amonio; y

(f) Liberación de las bases libres de las fórmulas ((R,R)-I) o ((S,S)-I) de las sales de amonio.

Las características y formas de realización preferidas, descritas a continuación, del proceso de la invención son válidas cada una de manera independiente o en especial en combinación entre sí. En el contexto de la presente invención, los descriptores "trans" y "cis" describen la disposición de ambos sustituyentes en el anillo de ciclohexilo en su relación uno con respecto al otro. La expresión trans-estereoisómero comprende de esta manera (R,R)-2-benciloxiciclohexilamina y (S,S)-2-benciloxiciclohexilamina. La expresión cisestereoisómero comprende el otro diastereómero que se compone de (R,S)-2-benciloxiciclohexilamina y (S,R)-2benciloxiciclohexilamina.

La expresión "enantioselectiva" describe una reacción en la que los posibles productos de reacción, que son imágenes especulares unos de otros, se forman en partes desiguales. En el contexto de la presente invención esta expresión describe reacciones en las que el enantiómero deseado se forma preferiblemente con al menos 95 % ee, particularmente preferible con al menos 96 % ee, más fuertemente preferible con al menos 98 % ee, aún más fuertemente preferible con al menos 99 % ee, en particular con al menos 99,5 % ee y especialmente con al menos 99,9 % ee.

En el contexto de la presente invención la expresión "enantioméricamente pura en esencia" describe de esta manera una pureza de enantiómeros en cada caso de al menos 95 % ee, preferentemente de al menos 96 % ee, más fuertemente preferible de al menos 98 % ee, aún más fuertemente preferible de al menos 99 % ee, en particular de al menos 99,5 % ee y especialmente de al menos 99,9 % ee.

La unidad "% ee" se refiere al exceso de enantiómeros y de esta manera es una medida de la pureza enantiomérica que también se denomina pureza óptica. Esta se calcula de la diferencia de las porciones molares de ambos enantiómeros en una mezcla enantiomérica. A manera de ejemplo, 95 % ee significa que la porción del enantiómero principal en la mezcla enantiomérica es de 97,5 % y la porción del compuesto que es imagen especular del principal es de 2,5%.

En la acilación enantioselectiva del trans-estereoisómero del compuesto (I) se obtiene preferentemente una mezcla en la cual el (S,S)-enantiómero está presente esencialmente en forma no acilada y el (R,R)-enantiómero está esencialmente en forma acilada.

La expresión "enantiómero esencialmente no acilado" describe que al menos 95%, preferentemente al menos 97%, en particular al menos 98% de este enantiómero no están acilados. De manera análoga es válido para la expresión

45 "enantiómero esencialmente acilado" que al menos 95%, preferentemente al menos 97%, particularmente preferible al menos 98%, de este enantiómero estén presentes en forma acilada.

De manera correspondiente, la expresión "(S,S)-enantiómero esencialmente no acilado del compuesto (I)" debe entenderse de tal manera que al menos 95%, preferentemente al menos 97%, en particular al menos 98% del (S,S)enantiómero del compuesto (I) no están acilados. De manera análoga es válido para la expresión "(R,R)enantiómero del compuesto (I) esencialmente acilado", que al menos 95%, preferentemente al menos 97%, particularmente preferible al menos 98%, del (R,R)-enantiómero del compuesto (I) está presente en forma acilada.

Las hidrolasas empleadas en el proceso de la invención son preferentemente una proteasa y en particular una

55 lipasa. Esta produce una N-acilación (amidación) selectiva de solo uno de los dos enantiómeros respectivos del trans-estereoisómero. De manera particularmente preferible produce la amidación selectiva del (R,R)-enantiómero del compuesto (I).

La hidrolasa se obtiene preferentemente de un microorganismo, particularmente preferible de una bacteria o de una levadura. Así mismo son adecuadas hidrolasas que pueden obtenerse mediante métodos recombinantes. La hidrolasa puede usarse en forma purificada o parcialmente purificada o en forma del microorganismo mismo. Para el experto en la materia son suficientemente conocidos métodos para la extracción y purificación de hidrolasas a partir de microorganismos, por ejemplo de EP-A-1149849 o EP-A-1069183. De manera preferente la hidrolasa se emplea en forma purificada.

La hidrolasa puede emplearse libre (es decir en forma nativa) o inmovilizada. Por enzima inmovilizada se entiende una enzima que se fija en un soporte inerte. Se conocen materiales soporte adecuados así como las enzimas inmovilizadas sobre éstos a partir de las EP-A-1149849, EP-A-1 069183 y la DE-OS 10019377, así como de la bibliografía allí citada. Los materiales soporte adecuados incluyen arcillas, minerales arcillosos como caolinita, tierras diatomáceas, perlita, dióxido de silicio, óxido de aluminio, carbonato de sodio, carbonato de calcio, polvo de celulosa, materiales de intercambio... [Seguir leyendo]

1. Método para la preparación de compuestos ópticamente activos de las fórmulas ((R,R)-I) y/o ((S,S)-I)

**(Ver fórmula)**

que comprende los siguientes pasos:

(a) reacción de una mezcla enantiomérica del trans-estereoisómero del compuesto de la fórmula (I)

**(Ver fórmula)**

con un agente de acilación en presencia de una hidrolasa, en cuyo caso se obtiene una mezcla en la que un 10 enantiómero del trans-estereoisómero del compuesto (I) está presente esencialmente en la forma acilada y el otro enantiómero del trans-estereoisómero del compuesto (I) se presenta esencialmente en la forma no acilada;

(b) separación del enantiómero no acilado del trans-estereoisómero del compuesto (I) de la mezcla obtenida en el paso (a);

(c) Hidrólisis del enantiómero esencialmente acilado, obtenido en el paso (b), del trans-estereoisómero del compuesto (I) para producir el enantiómero no acilado correspondiente de la amina (I);

(d) trransformación de los compuestos ópticamente activos de las fórmulas ((R,R)-I) o ((S,S)-I), obtenidos, en el paso

15 (b) o (c), mediante adición de un formador ácido de sal, en sus sales de amonio, en cuyo caso el formador ácido de sal se adiciona en forma de una solución acuosa y en cuyo caso, después de adicionar la solución acuosa, el agua se retira al menos parcialmente de la solución de reacción;

(e) Aislamiento de las sales de amonio; y

(f) liberación de las bases libres de las fórmulas ((R,R)-I) o ((S,S)-I) de las sales de amonio.

2. Método según la reivindicación 1, donde el enantiómero esencialmente no acilado obtenido en el paso (a) es el

(S,S)-enantiómero del compuesto (I) y el enantiómero esencialmente acilado es el (R,R)-enantiómero del compuesto 30 (I).

3. Método según una de las reivindicaciones precedentes, dondel el agente de acilación se selecciona entre ésteres cuyo componente ácido tiene un grupo que contiene oxígeno, nitrógeno, flúor o azufre en posición α, β o γ respecto del átomo de carbono en el carbonilo.

4. Método según una de las reivindicaciones precedentes, donde el agente de acilación se emplea en el paso (a) en una cantidad de 1,0 a 1,5 equivalentes respecto de la cantidad molar del enantiómero a acilar.

5. Método según una de las reivindicaciones precedentes, donde la hidrolasa se selecciona entre lipasas de 40 bacterias del género Burkholderia o Pseudomonas o de levaduras del género Candida.

6. Método según la reivindicación 5, donde la lipasa son lipasas B de Candida antarctica.

7. Método según una de las reivindicaciones precedentes,donde la reacción con el agente de acilación se realiza en 45 presencia de la hidrolasa sin adición de solventes.

8. Método según una de las reivindicaciones 1 a 6, donde la reacción con el agente de acilación se realiza en presencia de la hidrolasa en un medio de reacción no acuoso.

9. Método según una de las reivindicaciones precedentes, donde el formador ácido de sal se selecciona entre ácidos 5 próticos y sus sales de metal alcalino.

10. Método según una de las reivindicaciones precedentes, donde el trans-estereoisómero del compuesto de la fórmula (I) se obtiene:

10 (i) haciendo reacciona óxido de ciclohexeno con amoniaco y se obtiene el compuesto de la fórmula (II)

**(Ver fórmula)**

y

(ii) se hace reaccionar el trans-estereoisómero del compuesto de la fórmula (II) con un compuesto adecuado de 15 bencilo para producir el trans-estereoisómero del compuesto de la fórmula (I) según la reivindicación 1 o

(iii) se hace reaccionar una mezcla de cis-y trans-isómero del compuesto de la fórmula (II) con un compuesto adecuado de bencilo para producir una mezcla de los éteres de bencilo cis y trans correspondientes y aislando el trans-estereoisómero de la misma.