Solución acuosa para la preservación de tejidos y órganos.

Se proporciona una solución acuosa mejorada para la preservación de tejidos y órganos que comprende carvedilol,

tacrolimus y trimetazidina. Se observa un efecto sinérgico para esta solución de preservación que es especialmente efectiva en órganos marginales como los hígados esteatósicos

Solución acuosa para la preservación de tejidos y órganos.

Esta invención está relacionada con una solución acuosa para preservar tejidos y órganos, el uso de la misma, particularmente, para preservar órganos marginales, así como con un método para preservar tejidos y órganos.

Estado de la técnica anterior

El trasplante de órganos es el tratamiento a escoger para pacientes que padecen enfermedades crónicas en fase terminal. A pesar de los avances en la mejoría de las técnicas del trasplante, la lesión que sufre el injerto durante el período de isquemia y la subsiguiente reperfusión continúa siendo un problema sin resolver en la práctica clínica.

Desde el momento en que se realiza la extracción del donante hasta que se procede a la implantación del injerto en el receptor, el/los órgano(s) y los tejidos se someten a un inherente período de isquemia. Así pues, las soluciones líquidas utilizadas para preservar los órganos y los tejidos tienen que cumplir una serie de requisitos: eliminación de la sangre del donante, conseguir un enfriamiento rápido del órgano y asegurar una prevención y protección efectiva frente a las lesiones causadas por la isquemia.

La preservación hipotérmica estática es un método efectivo para la preservación de órganos durante cortos períodos de isquemia. Sin embargo, períodos de isquemia prolongados están asociados con el fallo primario del injerto en el trasplante hepático, y con disfunción del injerto en el trasplante renal. Además de la necesidad de ampliar el período de isquemia, la escasez de donantes y en consecuencia el aumento en las listas de espera en el trasplante de órganos ha derivado en la aceptación de órganos marginales, los cuales presentan poca tolerancia frente a la lesión ocasionada por una isquemia prolongada. En el caso del trasplante hepático, la utilización de órganos marginales, como es el caso de injertos esteatósicos está asociada con un mayor riesgo de padecer fallo primario o disfunción del injerto tras realizar el trasplante, comparado con los no esteatósicos. Además, algunos hígados esteatósicos no se consideran aptos para ser trasplantados, acentuando aún más la falta de órganos para el trasplante. Es bien conocido que la mayoría de la lesión que presenta un órgano marginal durante el trasplante está relacionada con el período de preservación hipotérmica. Estas observaciones indican la necesidad de optimizar la preservación de órganos. Por tanto, el principal objetivo en la preservación de órganos, es procurar prolongar la tolerancia del órgano a la isquemia.

Existen pruebas que indican que la composición de las soluciones de preservación es un factor crítico para la calidad de órganos conservados durante períodos de isquemia prolongados. La solución de preservación, Universidad de Wisconsin (UW), está considerada como la solución estándar para la preservación hepática, ya que ha resultado efectiva para reducir el daño ocasionado por la isquemia fría y ha extendido los límites de los tiempos de almacenamiento. Esta solución de preservación contiene diferentes componentes encaminados a mejorar la preservación del órgano, incluyendo el coloide hidroxietil almidón, para prevenir el edema celular, la adenosina como fuente de ATP durante la reperfusión, el alopurinol y el glutation con efectos antioxidantes, y agentes impermeables a la membrana celular tales como el ácido lactobiónico y la rafinosa. Sin embrago, esta solución de preservación, UW, presenta limitaciones en cuanto a la eficacia, ya que se han observado lesiones irreversibles en los órganos sometidos a trasplante cuando se prolonga el período de isquemia fría (16 h-24 h).

El tacrolimus (TCR) es un compuesto macrólido con efectiva actividad immunosupresora, anti-microbiana y otras actividades farmacológicas, siendo de un valor para la prevención del rechazo en el trasplante de órganos y tejidos, así como para desórdenes de origen autoimmune e infeccioso. Es conocido que su adición a las soluciones de preservación puede proteger frente a la lesión ocasionada por la reperfusión. En la literatura se ha descrito una solución de preservación UW que contiene tacrolimus (K. G. Rajesh et al., "Mitochondrial Permeability transition-pore inhibition enhances functional recovery after long-time hypothermic heart preservation", Transplantation, 2003, vol. 76 (9), pp. 1314-20). Su acción en la preservación se ensayó en corazones. Sin embargo, se concluyó que el tacrolimus no tenía ningún efecto en la preservación.

El carvedilol (CVD) es un agente bloqueador ß-adrenérgico no selectivo y lipofílico, con efectos vasodilatadores ejercidos principalmente a través del bloqueo selectivo del receptor a1, y con una potente actividad antioxidante. La capacidad del carvedilol de inhibir la lipoperoxidación es mucho mayor que aquella obtenida con otros bloqueadores ß-adrenérgicos, lo cual explicaría su superioridad en cuanto a los efectos protectores en modelos de isquemia-reperfusión. A pesar de que la adición de antioxidantes como el carvedilol en las soluciones de preservación se ha sugerido en la literatura (cf. B. Yard et al., "Prevention of cold-preservation injury of cultured endothelial cells by catecholamines andrelated compounds", American Journal of transplantation, 2004, vol. 4, pp. 22-30), no se ha descrito ninguna solución de preservación específica que comprenda carvedilol.

Un estudio reciente indica que la adición de trimetazidina (TMZ) a la solución de preservación UW mejoró la capacidad de esta solución de preservación estándar para proteger ambos, hígados no-esteatósicos y, especialmente, hígados esteatósicos sujetos a períodos de isquemia prolongados (cf. I. Ben Mosbah et al. "Trimetazidine: Is it a promising drug for use in steatotic grafts?", World J Gastroenterol, 2006, vol. 12(6), pp. 908-914).

Sin embargo, algunas de las propiedades de la solución UW como son la alta concentración de potasio (requerida para lavar el órgano antes de la reperfusión del injerto en el receptor) y la presencia de hidroxietil almidón (HES) como soporte oncótico (que podría ser responsable de la agregación de glóbulos rojos) no favorecen la preservación del órgano. Estudios recientes han demostrado que ambos tipos de injertos de hígado (injertos esteatósicos y no-esteatósicos) se preservan mejor en una solución de preservación modificada a partir de la UW (llamada IGL-1) que se caracteriza por la inversión en las concentraciones de K⁺ y Na⁺ y en la substitución del HES por el polietilenglicol (PEG) en la solución UW original (cf. I. Ben Mosbah et al., "Preservation of steatotic livers in IGL-1 solution", Liver Transpl, 2006, vol. 12 (8), pp. 1215-23). Por otro lado, a pesar de las mejoras ofrecidas por la solución IGL-1, el daño ocasionado por la isquemia-reperfusión (I/R) continua siendo aún un problema sin resolver.

Todavía existe la necesidad de encontrar soluciones de preservación que permitan prolongar la tolerancia del órgano a la isquemia y minimizar el riesgo inherente que sufren los órganos marginales sometidos a trasplante.

Explicación de la invención

Aunque se conocen o se han sugerido en el estado de la técnica soluciones de preservación que contienen tacrolimus, carvedilol, o trimetazidina, nunca se ha sugerido una solución acuosa para la preservación de tejidos y órganos que comprenda una combinación de los tres principios activos farmacéuticos. Los inventores, sorprendentemente, han encontrado que una solución de preservación que contenga una combinación de tacrolimus, carvedilol y trimetazidina mejora de forma sinérgica la capacidad de preservación de órganos y tejidos sometidos a un período de isquemia prolongado. En particular, este efecto sinérgico es especialmente evidente en órganos marginales, tales como hígados esteatósicos, que hace la solución especialmente ventajosa ya que mejorarían las condiciones iniciales de los órganos marginales disponibles para transplantes pero con deficientes resultados post-operatorios, y se podría aumentar también el uso de órganos que actualmente son descartados para el trasplante y, por tanto, aumentar la cantidad de órganos disponibles para ser trasplantados.

Así, un aspecto de la presente invención está relacionado con una solución de preservación acuosa para la preservación de tejidos y órganos que comprende una cantidad efectiva de carvedilol, una cantidad efectiva de tacrolimus, y una cantidad efectiva de trimetazidina.

La solución de preservación acuosa...

1. Solución acuosa para la preservación de tejidos y órganos que comprende una cantidad efectiva de carvedilol, una cantidad efectiva de tacrolimus y una cantidad efectiva de trimetazidina.

2. Solución según la reivindicación 1, que tiene una concentración de carvedilol comprendida entre 5 y 10 microM, una concentración de tacrolimus comprendida entre 5 y 10 microM, y una concentración de trimetazidina comprendida entre 0.01 microM y 10 microM.

3. Solución según cualquiera de las reivindicaciones 1-2, que tiene un pH de 6.5 a 8 y una osmolaridad de 290 a 320 milimoles/kg y que además comprende:

- polientilenglicol teniendo un peso molecular superior a 15.000 en una concentración de 0.01 a 5 mM,

- rafinosa en una concentración de 20 a 40 mM,

- MgSO₄ en una concentración de 1 a 10 mM,

- H₂PO₄^- en una concentración de 10 a 40 mM,

- iones potasio en una concentración de 30 a 50 mM,

- iones sodio en una concentración de 110 a 160 mM, y

- ácido lactobiónico en una concentración de 70 a 140 mM.

4. Solución según la reivindicación 3, donde el pH es 7.4, la osmolaridad es 320 milimoles/kg, la concentración de polientilenglicol es 0.03 mM, la concentración de rafinosa es 30 mM, la concentración de MgSO₄ es 5 mM, la concentración de H₂PO₄^- es 25 mM, la concentración de iones potasio es 40 mM, la concentración de iones sodio es 120 mM, la concentración de ácido lactobiónico es 100 mM, la concentración de tacrolimus es 5 microM, la concentración de carvedilol es 10 microM, y la concentración de trimetazidina es 1 microM.

5. Solución según la reivindicación 4, que consiste en:

- polientilenglicol que tiene un peso molecular aproximado de 35000 en una concentración de 0.03 mM,

- rafinosa en una concentración de 30 mM,

- MgSO₄ en una concentración de 5 mM,

- H₂PO₄^- en una concentración de 25 mM,

- iones potasio en una concentración de 40 mM,

- iones sodio en una concentración de 120 mM,

- ácido lactobiónico en una concentración de 100 mM,

- tacrolimus en una concentración de 5 microM,

- carvedilol en una concentración de 10 microM, y

- trimetazidina en una concentración de 1 microM.

6. Solución según la reivindicación 5, que además consiste en dexametaxona en una concentración de 16 g/l, y penicilina en una concentración de 200.000 U/l.

7. Uso de la solución como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1-6 para la preservación de un tejido o un órgano.

8. Uso según la reivindicación 7, donde el órgano es un órgano abdominal.

9. Uso según la reivindicación 8, donde el órgano abdominal es un órgano marginal.

10. Método para la preservación de tejidos y órganos que comprende mantener dichos tejidos u órganos en la solución de preservación acuosa como se define en cualquiera de las reivindicaciones 1-6 a una temperatura comprendida entre 2-10ºC.