FORMULACIONES DE PROTEINA CONCENTRADAS DE VISCOSIDAD REDUCIDA.

Formulación líquida estable que comprende una inmunoglobulina en una cantidad de por lo menos 80 mg/ml y una sal y/o tampón en una cantidad de por lo menos 100 mM,

y que tiene una viscosidad cinemática de 50 mm 2 /s o menos a 25ºC

Formulaciones de proteína concentradas de viscosidad reducida.

Antecedentes de la invención

La presente invención pertenece a formulaciones de proteínas concentradas con una viscosidad reducida, que son particularmente adecuadas para la administración subcutánea. La invención también se refiere a un procedimiento de reducción de la viscosidad de las formulaciones de proteínas concentradas.

En los últimos diez años, los avances en la biotecnología han hecho posible la producción de una variedad de proteínas para aplicaciones farmacéuticas utilizando técnicas de ADN recombinante. Como las proteínas son más grandes y más complejas que los fármacos tradicionales orgánicos e inorgánicos (es decir, poseen múltiples grupos funcionales además de las estructuras tridimensionales complejas), la formulación de estas proteínas presenta problemas especiales. Uno de los problemas es el elevado valor de viscosidad de las formulaciones de proteínas, especialmente a alta concentración. El suministro de una concentración de proteínas es a menudo requerido para la administración subcutánea debido a las limitaciones de volumen (= 1,5 ml) y requerimientos de dosis (normalmente = 50 mg, preferiblemente = 100 mg). Por ejemplo, si una proteína debe administrarse a pacientes a 2 mg/kg sobre una base semanal, la dosis semanal promedio será de 130 mg considerando 65 kg como peso promedio de los pacientes. Como volúmenes de inyección mayores de 1,5 mg no se toleran bien para la administración subcutánea, la concentración de proteínas para una administración subcutánea semanal será de aproximadamente 100 mg/ml (130 mg de proteínas en menos de 1,5 ml de volumen). Sin embargo, las formulaciones de proteínas muy concentradas presentan varios problemas. Un problema es la tendencia de las proteínas a formar partículas durante su procesamiento y/o almacenamiento, que hace difícil la manipulación durante el procesamiento adicional. En el caso de formulaciones líquidas reconstituidas, esto se soluciona normalmente añadiendo un surfactante adecuado (por ejemplo, un polisorbato) durante la liofilización o después de la liofilización mientras se reconstituye la formulación. Aunque los surfactantes han mostrado que reduce de manera significativa el grado de formación de partículas de las proteínas, no solucionan otro problema asociado con la manipulación y la administración de formulaciones de proteínas concentradas. Las proteínas tienden a formar soluciones viscosas en alta concentración debido a su naturaleza macromolecular y potencial para interacciones intermoleculares. Además, muchas proteínas a menudo se liofilizan en presencia de grandes cantidades de lioprotectores, tal como azúcar para mantener su estabilidad. El azúcar puede mejorar las interacciones intermoleculares y aumentar la viscosidad. Formulaciones muy viscosas son difíciles de fabricar, colocar en una jeringuilla e inyectar de manera subcutánea. La utilización de fuerzas en la manipulación de las formulaciones viscosas provoca una formación de espuma excesiva, y la acción resultante a modo detergente de la formación de espuma tiene el potencial de desnaturalizar y desactivar la proteína terapéuticamente activa. Además, la solución viscosa aumenta la presión trasera durante el proceso UF/DF y hace difícil la recuperación de la proteína. Esto puede provocar una pérdida considerable del producto de la proteína. No hay una solución satisfactoria de este problema de la técnica anterior. Por lo tanto, existe la necesidad de desarrollar un procedimiento de reducción de la viscosidad de una formulación que contiene una alta concentración de proteínas.

Formulaciones de proteínas liofilizadas isotónicas estables se describen en la publicación PCT WO 97/04801, publicada el 13 febrero de 1997. Las formulaciones liofilizadas descritas se pueden reconstituir para generar formulaciones líquidas con una alta concentración de proteínas sin una pérdida aparente de estabilidad. Sin embargo, los aspectos potenciales asociados con la alta viscosidad de las formulaciones reconstituidas no se contemplan.

Los solicitantes han descubierto que la preparación de una formulación proteinácea liofilizada con 100 mM NaCl de diluyente puede producir una solución ligeramente hipertónica. Se ha creído previamente que las formulaciones farmacéuticas deben mantenerse en un pH fisiológico y ser isotónicas. Esta creencia se basó por lo menos en parte en la percepción que la administración de una formulación hipertónica podría provocar la deshidratación y por lo tanto podría dañar el tejido en el sitio de la inyección. Sin embargo, la creencia del requerimiento de isotonicidad absoluta de una formulación farmacéutica puede no estar bien fundada. Por ejemplo, Zietkiewicz et al., Grzyby Drozdzopodobne 23: 869-870 (1971) han mostrado que la isotonicidad absoluta de los fármacos no es necesaria. Se encontró que es suficiente evitar que las soluciones del fármaco superen los límites críticos de hipertonicidad. Por ejemplo, se observaron daños en los tejidos solamente cuando se administró una solución hipertónica de 1300 mOsmol/Kg (~650 mM NaCl) o mayor de manera subcutánea o intramuscular en animales experimentales. Como resultado, las formulaciones que son ligeramente hipertónicas, o fuera del rango del pH fisiológico no parecen presentar un riesgo de daños en el tejido en el sitio de administración.

La patente EP 0 661 060 describe preparaciones de inmunoglobulina concentrada que tienen una baja osmolaridad y una baja viscosidad.

La patente WO 97/04-801 describe formulaciones de anticuerpos liofilizados isotónicos estables.

Los solicitantes también han encontrado que las soluciones proteináceas que tienen un pH bajo (4,0-5,3) o elevado (6,5-12,0) también fueron efectivas en la reducción de la viscosidad de las formulaciones de proteínas de alta concentración.

La presente invención se dirige a proporcionar una formulación de inmunoglobulina de alta concentración con una viscosidad reducida, que es fácil de manipular y que es adecuada para la administración subcutánea. La presente invención también se dirige a proporcionar un procedimiento de reducción de la viscosidad de formulaciones de inmunoglobulina concentrada.

Descripción de la invención

La presente invención se refiere a un procedimiento de disminución de la viscosidad de una composición de inmunoglobulina concentrada mediante: aumentar la resistencia iónica total de la formulación a través de la visión de sales o componentes de tampón tal como se define en las reivindicaciones sin comprometer de manera significativa la estabilidad o actividad biológica. En consecuencia, la invención se refiere a procedimientos y medios para reducir la viscosidad de formulaciones de inmunoglobulina concentrada, principalmente para asegurar una fácil manipulación antes y durante la administración a un paciente.

En un aspecto, la presente invención proporciona una formulación estable de viscosidad reducida que comprende inmunoglobulina en una cantidad de por lo menos aproximadamente 80 mg/ml y una sal o un tampón en una cantidad de por lo menos aproximadamente 100 mM, y que tiene una viscosidad cinemática de aproximadamente 50 mm²/s o menos a 25ºC. Las sales y/o tampones son farmacéuticamente aceptables y se derivan de varios ácidos conocidos (inorgánicos y orgánicos) o base que forman metales y aminas. Alternativamente, las sales y/o tampones se pueden derivar de aminoácidos. En un aspecto específico, las sales eligen entre el grupo que consiste en cloruro de sodio, clorhidrato de arginina, tiocianato de sodio, tiocianato de amonio, sulfato de amonio, cloruro de amonio, cloruro de calcio, cloruro de zinc y acetato de sodio. En otro aspecto, las sales o tampones son monovalentes. En otro aspecto, la formulación contiene los componentes de sal o tampón en una cantidad de aproximadamente 100-200 mM, y tiene una viscosidad de aproximadamente 2 a 30 mm²/s. En una realización particular, la inmunoglobulina en la formulación tiene un peso molecular de por lo menos aproximadamente 15-20 kD. Otra vez en particular, la formulación es hipertónica. En otro aspecto particular, la formulación también puede comprender un surfactante tal como polisorbato. La invención también contempla una formulación reconstituida que también comprende un lioprotector tal como el azúcar. En otro aspecto, el azúcar lioprotector puede ser, por ejemplo, sacarosa o trehalosa, y puede estar presente en una cantidad...

1. Formulación líquida estable que comprende una inmunoglobulina en una cantidad de por lo menos 80 mg/ml y una sal y/o tampón en una cantidad de por lo menos 100 mM, y que tiene una viscosidad cinemática de 50 mm²/s o menos a 25ºC.

2. Formulación según la reivindicación 1, que comprende:

(a) dicha sal y/o tampón en una cantidad de 100-200 mM; o

(b) dicha sal y/o tampón en una cantidad de 200 mM.

3. Formulación según la reivindicación 1, en la que dicha sal y/o tampón deriva de:

(a) un ácido orgánico o inorgánico y un metal o una amina que forman una base; o

(b) un aminoácido.

4. Formulación según la reivindicación 3, en la que:

(a) el metal que forma la base se selecciona entre el grupo que consiste en metales alcalinos, metales alcalinotérreos, Al, Zn y Fe; o

(b) la amina que forma la base es NR₄⁺, donde R es independientemente H o C_1-4 alquilo.

5. Formulación según la reivindicación 1, en la que la sal y/o tampón derivan de un aminoácido.

6. Formulación según la reivindicación 1, en la que dicha sal se selecciona entre el grupo que consiste en cloruro de sodio, tiocianato de sodio, tiocianato de amonio, sulfato de amonio, cloruro de amonio, cloruro de calcio, clorhidrato de arginina, cloruro de zinc y acetato de sodio.

7. Formulación según la reivindicación 1, que:

(a) tiene una viscosidad cinemática de 40 mm²/s o menos a 25ºC; o

(b) tiene una viscosidad cinemática de 30 mm²/s o menos a 25ºC; o

(c) tiene una viscosidad cinemática de 20 mm²/s o menos a 25ºC; o

(d) tiene una viscosidad cinemática de 10 a 30 mm²/s a 25ºC.

8. Formulación según la reivindicación 1, que también comprende un lioprotector.

9. Formulación según la reivindicación 8, en la que dicho lioprotector es un azúcar.

10. Formulación según la reivindicación 9, en la que dicho azúcar es sacarosa o trehalosa.

11. Formulación según la reivindicación 9, que comprende dicho azúcar en una cantidad de 60-300 mM.

12. Formulación según la reivindicación 1, que también comprende un tensoactivo.

13. Formulación según la reivindicación 1, que es hipertónica.

14. Formulación según la reivindicación 1, que es una formulación reconstituida.

15. Formulación según la reivindicación 14, en la que la concentración de proteína inmunoglobulina en la formulación reconstituida es 2-40 veces mayor que la concentración de proteína inmunoglobulina en la mezcla antes de la liofilización.

16. Formulación según la reivindicación 1, en la que dicha inmunoglobulina tiene un peso molecular de por lo menos 15-20 kD.

17. Formulación según la reivindicación 1, en la que dicha inmunoglobulina es un anticuerpo dirigido contra un antígeno específico.

18. Formulación según la reivindicación 17, en la que dicho anticuerpo está dirigido contra IgE, un elemento de la familia de receptores HER, una molécula de adhesión celular o una subunidad de la misma, o un factor de crecimiento.

19. Formulación según la reivindicación 18, en la que el anticuerpo es rhuMAb-E25, rhuMAb-E26 o rhuMAb-E27.

20. Formulación según la reivindicación 1, que es una formulación farmacéutica líquida.

21. Formulación según la reivindicación 20, que es para administración subcutánea.

22. Procedimiento de reducción de la viscosidad cinemática de una formulación que contiene una inmunoglobulina en una cantidad de por lo menos 80 mg/ml, que comprende la adición de una sal y/o tampón en una cantidad de por lo menos 100 mM.

23. Procedimiento según la reivindicación 22, en el que dicha sal se selecciona entre el grupo que consiste en cloruro de sodio, tiocianato de sodio, tiocianato de amonio, sulfato de amonio, cloruro de amonio, cloruro de calcio e clorhidrato de arginina.

24. Procedimiento según la reivindicación 22, en el que dicha inmunoglobulina es un anticuerpo dirigido contra un antígeno específico.

25. Procedimiento según la reivindicación 24, en el que dicho anticuerpo está dirigido contra IgE.

26. Procedimiento según la reivindicación 25, en el que el anticuerpo es rhuMAb-E25, rhuMAb-E26 o rhuMAb-E27.

27. Procedimiento según la reivindicación 22, en el que dicha formulación es una formulación reconstituida.

28. Procedimiento según la reivindicación 22, en el que la formulación es hipertónica.

29. Procedimiento según la reivindicación 27, en el que la concentración de proteína en dicha formulación reconstituida es 2-40 veces mayor que la concentración de proteína en la mezcla antes de la liofilización.

30. Procedimiento según la reivindicación 22, en el que la viscosidad cinemática de dicha formulación se reduce a 50 mm²/s o menos tal como se determina a 25ºC.

31. Artículo de fabricación que comprende un recipiente que contiene la formulación según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21.

32. Artículo de fabricación según la reivindicación 31, que también comprende instrucciones para la administración de dicha formulación.