PROCEDIMIENTO PARA EL RASTREO Y DIAGNOSTICO PRECOZ DEL CANCER COLORRECTAL.
Procedimiento para el rastreo y diagnóstico precoz del cáncer colorrectal,
que consiste en el control cuantitativo o estudio del perfil gráfico de los cambios de número de ribosomas por célula (o por unidad de volumen), en un período de tiempo definido, dentro de una media aritmética de las células exfoliadas de la mucosa colorrectal del paciente; en que los registros obtenidos forman una curva patrón/media del número de ribosomas por unidad de volumen, con relación a las células de la mucosa del colon y recto, aisladas y separadas de las heces. La información recogida de fracciones subcelulares, puede ser correlacionada con otros parámetros de mensuración biológica celular cuantitativa (como por ejemplo, algunos marcadores tumorales, e.g. CEA.); y porque a partir del conocimiento del intervalo de valores "cantidad (número) media de ribosomas libres" considerados dentro de la normalidad se podrán considerar otros intervalos
Tipo: Patente de Invención. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: P200701216.
Solicitante: MARTINS-FERREIRA ALEMAO,ALVARO.
Nacionalidad solicitante: Portugal.
Dirección: MANUEL MARQUES 16 3 A EDIF. ROTTERDAM,LISBOA 1750.
Inventor/es: MARTINS-FERREIRA ALEMAO,ALVARO.
Fecha de Solicitud: 7 de Mayo de 2007.
Fecha de Publicación: .
Fecha de Concesión: 18 de Febrero de 2010.
Clasificación Internacional de Patentes:
- G01N1/28M
- G01N33/483B
Clasificación PCT:
- G01N1/28 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 1/00 Muestreo; Preparación de muestras para la investigación (manipulación de materiales para un análisis automático G01N 35/00). › Preparación de muestras para el análisis (montaje de muestras sobre las placas del microscopio G02B 21/34; medios de soporte para los objetos o para los materiales a examinar en un microscopio electrónico H01J 37/20).
- G01N33/483 G01N […] › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Análisis físico de material biológico.
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Fragmento de la descripción:
Procedimiento para el rastreo y diagnóstico precoz del cáncer colorrectal.
Objeto de la invención
La invención, tal como expresa el enunciado, se refiere a un procedimiento para el rastreo y diagnóstico precoz del cáncer colorrectal.
De forma más concreta, el objeto de la invención consiste en un procedimiento basado en el control cuantitativo o estudio del perfil gráfico de los cambios de número de ribosomas por célula (o por unidad de volumen), en un período de tiempo definido, dentro de una media aritmética de las células exfoliadas de la mucosa colorrectal de un paciente cuyos registros secuenciales formarán una curva patrón/media del número de ribosomas por unidad de volumen, con relación a las células de la mucosa del colon y recto, aisladas y separadas de las heces, lo cual permitirá el rastreo, control y diagnóstico precoz del cáncer colorrectal (en adelante cáncer CCR).
Antecedentes de la invención
Como es sabido, el cáncer CCR es una de las principales causas de muerte por cáncer en el mundo con estilo de vida occidental, pero está dentro de los cánceres mejor curables cuando es identificado en un estadio precoz. Este tipo de cáncer tiene una fase pre-maligna larga y una progresión lenta desde la fase de enfermedad confinada a la pared del órgano hasta las fases de invasión local y de enfermedad metastática distante. Por eso, hay una amplia oportunidad para identificar a los pacientes en un estadio curable con la realización de rastreos vastos.
En un estudio sobre rastreo del CCR se explicaron las ventajas y desventajas de los varios métodos de tests o pruebas a 100 pacientes y después se les preguntó cuál de los métodos conocidos preferían como rastreo. Los resultados fueron: (a) colonoscopia 38% (más elevado para personas que ya anteriormente se habían sometido a una colonoscopia, que para las personas que anteriormente se habían sometido al test de la sangre oculta en las heces, o no se habían sometido a cualquier test previo), (b) test de sangre oculto de las heces 31% (los que rechazan todas las formas de test invasivo, (c) Enema de bario 14%, (d) sigmoidoscopia flexible 13%. Estos hallazgos sugieren que muchos pacientes (casi un tercio) declinan cualquier forma de test invasivo, pero se someterían a una prueba no invasiva.
El rastreo del CCR ha probado ser efectivo, tanto en la disminución de la mortalidad por CCR, como, más recientemente, en la disminución de la incidencia. Existe un desafío mayor, sin embargo, para los clínicos, así como para los pacientes, para conseguir un beneficio claro en los programas de rastreo de CCR.
Existen ciertas condiciones que disminuyen las potencialidades de los resultados de los rastreos, que están asociadas con algunos factores, incluyendo el número de estrategias del rastreo, sus esquemas variados de recomendación, manipulación e inadecuación impropia para los tests de sangre fecal, consumo excesivo de tiempo y preparación incómoda para el paciente en las etapas de limpieza intestinal, y la naturaleza invasiva de muchas modalidades de rastreo riguroso. Más aún, a pesar de su clara eficiencia, ni todos los médicos utilizan completamente las potencialidades del CCR y no rastrean "agresivamente" sus pacientes.
Todos estos factores contribuyen a bajar las ventajas y disminuyen el valor global del esfuerzo de indagación. El rastreo de CCR no ha penetrado adecuadamente en la muestra de población susceptible de ser estudiada y con indicaciones para tal, como por ejemplo, los mayores de 50 años de edad.
En los Estados Unidos hay cerca de un 20,6% de pacientes que refieren haber hecho un test de sangre oculta en las heces dentro del año anterior a esa cuestión, y solamente 33,6% se refieren a haber hecho una sigmoidoscopia flexible dentro de los cinco años, previos. La creación de sistemas de recordación clínica de rastreos de CCR para garantizar que los pacientes mantengan fidelidad a programas de rastreo apretados es igualmente necesaria, y condicionada por la complejidad que conlleva la preparación de los organigramas de rastreos.
Explicación de la invención
Investigadores han demostrado que las células cancerosas con expresión elevada de las proteínas ribosómicas tienen contenidos más elevados de ribosomas. Las alteraciones genéticas asociadas con el desarrollo del cáncer implican, muy frecuentemente, cambios de las vías de señalización que llevan su efecto hasta el rADN. El panorama anteriormente descrito reitera lo conocido por los biólogos del cáncer: la biogénesis de los ribosomas y la oncogénesis están íntimamente ligadas.
El propósito de la invención, con estos conocimientos básicos de biología molecular, es definir algunos principios orientadores sobre el valor del número aumentado de ribosomas libres, como traducción clínica de la dinámica del proceso bioquímico hacia la malignización de las células en una comunidad celular específica de un tejido, u órgano, mediante la verificación y comprobación en el ámbito de observaciones de microscopia electrónica de las cantidades de ribosomas libres en tejidos neoplásicos, o pre-malignos y de la construcción de una curva gráfica de las cantidades de ribosomas libres de esos tejidos, que pueda definir la tendencia de malignización de una comunidad celular, bajo ciertas condiciones que predisponen para el crecimiento de un tejido en la dirección de la malignización.
En las décadas de 60 y 70 fueron publicados estudios sobre ribosomas libres y ribosomas ligados a membranas y sobre su acumulación durante la inducción de crecimiento en muchos órganos y tejidos. En la secuencia de estas investigaciones se publicaron estudios que han intentado cuantificar la acumulación de ribosomas en las zonas interfoliculares de la piel del dorso de ratones durante la inducción química de crecimiento neoplásico, en dos fases, mediante iniciación por 7,12-dimetilbenz(a)antraceno y promoción provocada por 12-O-tetradecanoil-forbol-13-acetato.
La epidermis es un epitelium de superficie y, como otros epitelios, que están en contacto directo con el medio externo, tales como los revestimientos de los aparatos respiratorio y gastrointestinal, muestra una elevada incidencia de neoplasias. De este modo, la epidermis ha servido como un modelo útil para constituir un sistema de desarrollo comprensible del papel de la acumulación de ribosomas durante el crecimiento neoplásico.
Será muy importante la producción de modelos predictivos mecanísticos (conteo de ribosomas libres) basados en la dinámica tumoral, con traducción en el fenotipo celular, como, por ejemplo, con el conteo de ribosomas libres en una célula en proceso de alteración fenotípica, bajo el estímulo oncogénico. Será más útil para la práctica clínica concreta que los investigadores puedan abstraerse del significado de los detalles biológicos más avanzados relativamente a la oncogénesis y progresión tumoral, que dependen de incontables factores variables.
La identificación de los cambios de la estructura del citoplasma, como por ejemplo el aumento acentuado del número de ribosomas (método cuantitativo) acumulados en el citoplasma de una comunidad de células de un determinado tejido puede constituir uno de los aspectos fenotípicos de la expresión de malignidad de la estructura fina de las células transformadas, lo que puede ser esencial para caracterizar la evolución del comportamiento celular. En este sentido, la invención preconiza estudiar el perfil gráfico de los cambios del número de ribosomas por célula (o por unidad de volumen), en un período de tiempo definido, dentro de una media aritmética de las células exfoliadas de la mucosa colorrectal de un paciente cuyos registros secuenciales formarán una curva patrón/media del número de ribosomas por unidad de volumen, con relación a las células de la mucosa del colon y recto, aisladas y separadas de las heces.
Esto puede permitir una fuerte motivación para integrar diversos campos del conocimiento en la biología del cáncer e introducir nueva armazón conceptual y teorética que pueda mejorar la comprensión de los investigadores sobre la dinámica de la formación tumoral para, así, poder desarrollar mejores métodos preventivos, diagnósticos y terapéuticos.
Aunque sea cierto que el cáncer es una enfermedad multifacética con una variedad de desencadenantes o "triggers" cercanos en diferentes tejidos y en diferentes pacientes, hay también una fuerte posibilidad de que los cánceres comparten una funcionalidad central originándose a partir de una maquinaria celular...
Reivindicaciones:
1. Procedimiento para el rastreo y diagnóstico precoz del cáncer colorrectal, caracterizado por el hecho de consistir en el control cuantitativo o estudio del perfil gráfico de los cambios de número de ribosomas por célula (o por unidad de volumen), en un período de tiempo definido, dentro de una media aritmética de las células exfoliadas de la mucosa colorrectal del paciente.
2. Procedimiento para el rastreo y diagnóstico precoz del cáncer colorrectal, según la reivindicación 1, caracterizado por el hecho de que los registros secuenciales obtenidos a partir dicho control cuantitativo forman una curva patrón/media del número de ribosomas por unidad de volumen, con relación a las células de la mucosa del colon y recto, aisladas y separadas de las heces.
3. Procedimiento para el rastreo y diagnóstico precoz del cáncer colorrectal, según las reivindicaciones 1 y 2, caracterizado por el hecho de que se realiza un registro de la evaluación cuantitativa de los ribosomas libres, en el sentido estático y dinámico, como información recogida de fracciones subcelulares, que puede ser correlacionada con otros parámetros de mensuración biológica celular cuantitativa (como por ejemplo, algunos marcadores tumorales, e.g. CEA.); y porque a partir del conocimiento del intervalo de valores "cantidad (número) media de ribosomas libres" considerados dentro de la normalidad se podrán considerar otros intervalos.
4. Procedimiento para el rastreo y diagnóstico precoz del cáncer colorrectal, según las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado por el hecho de que para la consecución del control cuantitativo o cuenteo de ribosomas libres en la unidad de volumen a estudio se utilizarán las siguientes técnicas y/o fases:
- - Cosecha de heces
- - Colecta de colonocitos exfoliados
- - Fraccionamiento subcelular
- - Homogeneización
- - Rotura de tejidos y células
- - Centrifugación
- - Sedimentación
- - Centrifugación diferencial
- - Equilibrio de sedimentación
- - Marcación y preparación de ribosomas.
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