ANALISIS DE LA SECUENCIA DE MATERIAL SACARIDO.
SE PRESENTA UN METODO DE ANALISIS DE MATERIAL SACARIDO, COMO GLICOSAMINOGLICANOS (GAG'S),
PARA DETERMINAR LA SECUENCIA DE LAS UNIDADES DE MONOSACARIDO, EN CADENAS OLIGOSACARIDAS DE DICHOS GAGS, SIENDO DICHAS CADENAS MARCADAS EN SUS EXTREMOS REDUCTORES, P.EJ. MEDIANTE ETIQUETADO O MARCAJE, Y SOMETIENDO EL MATERIAL SACARIDO A UNA DESPOLIMERIZACION PARCIAL CONTROLADA, UTILIZANDO UN AGENTE DE ESCISION SELECTIVA, P.EJ. ACIDO NITROSO DE BAJO PH, QUE ESCINDE LOS ENLACES GLICOSIDICOS INTERNOS, DE ACUERDO CON UNA ESPECIFICIDAD DE ENLACE CONOCIDA, PRODUCIENDO UN CONJUNTO MEZCLADO DE FRAGMENTEOS DE CADENAS DE SACARIDO, CON DIFERENTES LONGITUDES, QUE CUBREN TODO EL ESPECTRO DE POSIBLES LONGITUDES, RESULTANTES DE LA ESPECIFICIDAD PARA UN ENLACE GLICOSIDICO PARTICULAR, PROPIA DEL REACTIVO DE ESCISION SELECTIVA EMPLEADO. A CONTINUACION, SE TRATAN MUESTRAS DEL CONJUNTO DE FRAGMENTOS DE CADENA MEZCLADOS, CON EXOENZIMAS SELECCIONADAS, INCLUYENDO EXOGLICOSIDASAS QUE ESCINDEN SOLO ENLACES GLICOSIDICOS DETERMINADOS, SITUADOS EN LOS EXTREMOS NO REDUCTORES DE LAS CADENAS SACARIDAS, Y EXOSULFATASAS, QUE ELIMINAN SELECTIVAMENTE GRUPOS SULFATO, A PARTIR DE RESIDUOS MONOSACARIDOS, SITUADOS EN LOS EXTREMOS EXTREMOS NO REDUCTORES DE LAS CADENAS SACARIDAS. DICHOS EXOENZIMAS, SE APLICAN A LAS MUESTRAS, BIEN SOLOS, O EN COMBINACION, DE ACUERDO CON UNA ESTRATEGIA PREDETERMINADA. LAS MUESTRAS TRATADAS, SON ANALIZADAS ULTERIORMENTE, MEDIANTE ELECTROFORESIS EN GEL DE POLIACRILAMIDA (PAGE), PARA DETECTAR LOS FRAGMENTOS DE CADENA PRESENTES QUE TIENEN UN EXTREMO REDUCTOR, DERIVADO DEL EXTREMO REDUCTOR DE LA CADENA CORRESPONDIENTE, EN EL MATERIAL SACARIDO ORIGINAL. UTILIZANDO PAGE, PREFERIBLEMENTE PAGE DE GRADIENTE, LAS DISTINTAS MUESTRAS SE ELUYEN SIGUIENDO TRAYECTORIAS PARALELAS EN EL GEL, Y SE OBTIENE UN PATRON DE MIGRACION, QUE PROPORCIONA INFORMACION, LA CUAL PERMITE OBTENER LA SECUNCIA MONOSACARIDA EN EL MATERIAL SACARIDO ORIGINAL.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: CANCER RESEARCH CAMPAIGN TECHNOLOGY LIMITED.
Nacionalidad solicitante: Reino Unido.
Dirección: 6-10 CAMBRIDGE TERRACE, REGENT'S PARK,LONDON NW1Y 4JL.
Inventor/es: GALLAGHER, JOHN, THOMAS, TURNBULL, JEREMY, EWAN, HOPWOOD, JOHN, JOSEPH.
Fecha de Publicación: .
Fecha Solicitud PCT: 30 de Octubre de 1995.
Fecha Concesión Europea: 12 de Enero de 2000.
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12Q1/34 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que interviene una hidrolasa.
- G01N33/50 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre o de orina; Ensayos mediante métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Ensayos inmunológicos (procedimientos de medida o ensayos diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto, procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q).
Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Países Bajos, Suecia, Portugal, Irlanda, Oficina Europea de Patentes, Burkina Faso, Benin, República Centroafricana, Congo, Costa de Marfil, Camerún, Gabón, Guinea, Malí, Mauritania, Niger, Senegal, Chad, Togo, Organización Africana de la Propiedad Intelectual.
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