Supresión de cáncer.

Un polipéptido para su uso en la supresión o tratamiento de cáncer mediante la inhibición de lasecreción de una célula cancerosa en un paciente,

en el que el polipéptido comprende:

(i) una proteasa no citotóxica, proteasa que puede escindir una proteína SNARE expresada en dicha célulacancerosa;

(ii) un resto que elige diana (TM) que puede unirse a un sitio de unión sobre una célula cancerosa, sitio de unión quepuede someterse a endocitosis para incorporarse en un endosoma dentro de la célula cancerosa; y

(iii) un dominio de translocación que puede translocar la proteasa de dentro de un endosoma, a través de lamembrana endosómica y en el citosol de la célula cancerosa;

en el que el polipéptido carece de la función de unión natural de un dominio HCC de neurotoxina clostridial quepermite que la neurotoxina clostridial se una a terminaciones nerviosas en la unión neuromuscular;

con la condición de que la célula cancerosa no sea una célula tumoral neuroendocrina;

y con la condición de que el polipéptido no sea una molécula de neurotoxina clostridial que se produce naturalmente.

Supresión de cáncer

La presente invención se refiere a la supresión de cáncer.

Los cánceres están constituidos por células que dividen e invaden y sobreviven de un modo anómalo en el cuerpo. Los cánceres se desarrollan cuando alteraciones al ADN dentro de células afectan el control de la división celular y otros procesos relevantes para la supervivencia de las células. A medida que crecen los tumores 10 cancerosos, invaden los tejidos del cuerpo que los rodean. Esto es peligroso para el cuerpo, ya que daña tejidos normales circundantes y tiene un efecto significativo sobre las respuestas fisiológicas. Además, los cánceres pueden diseminarse a otras partes del cuerpo y desarrollar tumores secundarios. La evaluación del cáncer puede realizarse usando una variedad de pruebas que incluyen TAC, RMN, TEP, tomografía de TEP-TAC combinado y pruebas de ultrasonidos. Generalmente, cuando más pronto se detecte y confirme un cáncer, mejor será el pronóstico global

para el paciente.

Está disponible una amplia gama de tratamientos para pacientes diagnosticados con cáncer. Estos incluyen una variedad de intervenciones quirúrgicas, radioterapia, quimioterapia y terapias con hormonas. Estos tratamientos pueden usarse en aislamiento, pero más comúnmente se usan en combinación entre sí. El uso de una 20 combinación de terapias depende del tipo de cáncer diagnosticado, requiriendo comúnmente ciertos cánceres (tales como cáncer de mama) múltiples intervenciones terapéuticas. Hay una variedad de nuevos enfoques terapéuticos en desarrollo que utilizan productos biológicos que incluyen anticuerpos, inmunoterapias y técnicas de vacunación para tratar cáncer. Están en desarrollo enfoques de tratamiento adicionales que incluyen el uso de terapéuticos novedosos diseñados para bloquear la angiogénesis. Los enfoques novedosos que incluyen el uso de terapia génica también están siendo investigados como posibles terapéuticos. Sin embargo, a pesar de los significativos esfuerzos científicos y el enorme compromiso financiero por desarrollar nuevas terapias contra el cáncer, el pronóstico para muchos pacientes sigue siendo extremadamente malo.

El cáncer de mama es el cáncer más común en el Reino Unido y cada año son diagnosticadas más de 44.000 mujeres con este tipo de cáncer. En el mundo, más de un millón de mujeres son diagnosticadas con cáncer de mama cada año. En el Reino Unido, aproximadamente el 80% de las pacientes sobrevivirán durante 5 años o más.

El cáncer de pulmón es el 2º cáncer más común en el Reino Unido y más de 37.000 personas fueron diagnosticadas con cáncer de pulmón en el Reino Unido en 2003. Para pacientes diagnosticados con cáncer de pulmón, solo aproximadamente el 20% sobrevivirán durante al menos 1 año después del diagnóstico, y solo aproximadamente el 6% vivirá durante 5 años o más después del diagnóstico.

El cáncer colorrectal es el 3º tipo de cáncer más común en general y es el 2º más común que afecta a las mujeres (después del cáncer de mama) . Precisamente más de 35.000 personas fueron diagnosticadas con cáncer colorrectal en el Reino Unido en 2003. De aquellos diagnosticados con cáncer intestinal y rectal en Inglaterra y Gales, el 46% sobrevivirá durante al menos 5 años después de su diagnóstico.

El cáncer pancreático es la cuarta causa más común de muerte por cáncer en el mundo occidental y

más de 7000 casos se diagnostican en el Reino Unido cada año. A pesar de los avances terapéuticos, solo el 3-4% de aquellos diagnosticados con cáncer pancreático sobreviven durante 5 años o más y la intervención terapéutica satisfactoria está limitada a cirugía que solo es aplicable al 15% de los pacientes.

El cáncer renal es el 9º tipo de cáncer más común en general con más de 7000 nuevos casos 50 diagnosticados y más de 3500 muertes en el Reino Unido cada año. Aproximadamente 208.500 nuevos casos de cáncer renal son diagnosticados en el mundo cada año, representando precisamente menos del 2% de todos los cánceres. Es más común en hombres que en mujeres, con una relación de hombres con respecto a mujeres de 1, 5:1. El treinta por ciento de los pacientes con cáncer renal muestra signos de carcinoma de células renales avanzado en el diagnóstico inicial, con metástasis detectadas en el 15-25% de los pacientes en la actualidad.

El cáncer representa un problema mundial que se predice que crecerá significativamente. En el año 2000, los tumores malignos fueron responsables del 12 por ciento de los casi 56 millones muertes informadas en el mundo de todas las causas. En algunos países, más de un cuarto de las muertes podría atribuirse al cáncer. En 2000, 5, 3 millones de hombres y 4, 7 millones de mujeres desarrollaron un tumor maligno y en total 6, 2 millones murieron de la enfermedad. Se predice que las tasas de cáncer podrían aumentar adicionalmente el 50% a 15 millones de nuevos casos en el año 2020, (WHO World Cancer Report (IARC, Ed B.W. Stewart y P. Kleihues, 2003) .

Para un gran número de cánceres se cree que la señalización autocrina (definida como un modo de acción de hormonas en el que una hormona se une a receptores y afecta la función del tipo de célula que la produjo) y/o la señalización paracrina (definida como un modo de acción de hormonas en el que la hormona liberada de células endocrinas o similares a endocrinas se une a receptores sobre células próximas y afecta su función) desempeñan una función significativa en el desarrollo del estado de enfermedad. Para un cáncer dado, múltiples bucles de señalización autocrina pueden participar en el desarrollo y mantenimiento del estado de cáncer. Además de proporcionar un estímulo para la división celular, la señalización autocrina puede potenciar la supervivencia de células, actuando para proteger las células de mecanismos de apoptosis y necrosis y aumentar el potencial metastásico de la célula cancerosa.

Por tanto, existe la necesidad en la materia de nuevas terapias/terapéuticos que puedan tratar

específicamente cáncer. Esta necesidad es tratada por la presente invención, que resuelve uno o más de los problemas anteriormente mencionados.

El documento WO 2008/105901 describe toxinas clostridiales modificadas con capacidad de translocación potenciada y actividad de elección de diana potenciada.

El documento WO 2006/026780 describe toxinas clostridiales degradables.

El documento US 2008/161543 describe toxinas clostridiales modificadas con capacidades de elección de diana alteradas para células diana de toxina clostridial.

El documento WO 2004/076634 describe la translocación de la membrana celular de inhibidores de SNARE regulados, composiciones para los mismos y procedimientos para el tratamiento de enfermedad.

El documento US 2005/031648 describe procedimientos para tratar diversos cánceres.

El documento WO 2006/094539 describe procedimientos y composiciones para el tratamiento de cáncer.

El documento WO 02/09743 describe procedimientos para tratar una neoplasia.

El documento WO 2009/150469 describe la supresión de enfermedades neuroendocrinas.

El documento WO 2009/150470 describe la supresión de cánceres.

La presente invención proporciona polipéptidos, y usos de los mismos, como se define en las reivindicaciones.

El polipéptido de la presente invención no es una molécula de neurotoxina clostridial que se produce naturalmente (también conocida como holotoxina clostridial) . La holotoxina clostridial es una de las neurotoxinas 45 más letales conocidas para el hombre y, como tal, tiene limitaciones significativas como molécula terapéutica. Por tanto, en el contexto del cáncer, la holotoxina clostridial está asociada a elección como diana fuera del emplazamiento no deseable (es decir, elección de diana de no células cancerosas) , por ejemplo, a la unión neuromuscular.

En uso, un polipéptido de la invención se une a una célula cancerosa. Después, el componente de translocación efectúa el transporte del componente de proteasa en el citosol de la célula cancerosa. Finalmente, una vez dentro, la proteasa inhibe el proceso de fusión exocítica de la célula cancerosa escindiendo la proteína SNARE presente en el citosol de la célula cancerosa. Así, inactivando el aparato de fusión exocítica de la célula cancerosa, el polipéptido de la invención inhibe la secreción (por ejemplo, de TNF-alfa, acetilcolina, factor de crecimiento 55 fibroblástico, péptido liberador de gastrina, interleucina-6, VEGF y/o factor de movilidad autocrino) de las mismas. Por consiguiente, cuando dichos péptidos de secreción, por ejemplo, participan... [Seguir leyendo]

1. Un polipéptido para su uso en la supresión o tratamiento de cáncer mediante la inhibición de la secreción de una célula cancerosa en un paciente, en el que el polipéptido comprende:

(i) una proteasa no citotóxica, proteasa que puede escindir una proteína SNARE expresada en dicha célula cancerosa;

(ii) un resto que elige diana (TM) que puede unirse a un sitio de unión sobre una célula cancerosa, sitio de unión que puede someterse a endocitosis para incorporarse en un endosoma dentro de la célula cancerosa; y

(iii) un dominio de translocación que puede translocar la proteasa de dentro de un endosoma, a través de la membrana endosómica y en el citosol de la célula cancerosa;

en el que el polipéptido carece de la función de unión natural de un dominio HCC de neurotoxina clostridial que permite que la neurotoxina clostridial se una a terminaciones nerviosas en la unión neuromuscular;

con la condición de que la célula cancerosa no sea una célula tumoral neuroendocrina;

y con la condición de que el polipéptido no sea una molécula de neurotoxina clostridial que se produce naturalmente.

2. Un polipéptido para su uso según la reivindicación 1, en el que la célula cancerosa está seleccionada del grupo constituido por: una célula de cáncer de pulmón, una célula de cáncer renal, una célula de cáncer cerebral, una célula de cáncer de mama, una célula de cáncer pancreático, una célula de cáncer colorrectal, una célula de cáncer de las glándulas suprarrenales, una célula de cáncer esofágico, una célula de cáncer de linfoma (por ejemplo, linfocito B; célula del manto) , una célula de cáncer de leucemia (por ejemplo, mieloma múltiple) , una célula de cáncer de leucemia aguda, una célula de cáncer de vejiga, una célula de cáncer de huesos, una célula de cáncer intestinal, una célula de cáncer de cuello uterino, una célula de leucemia linfocítica crónica, una célula de linfoma de Hodgkin, una célula de cáncer de hígado, una célula de cáncer de piel de melanoma, una célula de cáncer orofaríngeo, una célula de mieloma, una célula de cáncer de próstata, una célula de sarcoma de tejidos blandos, una célula de cáncer gástrico, una célula de cáncer testicular, una célula de cáncer uterino o una célula de cáncer de sarcoma de Kaposi.

3. Un polipéptido para su uso según cualquier reivindicación precedente, en el que el TM se une a un receptor seleccionado del grupo que comprende: un receptor de ErbB tal como un receptor de EGF; un receptor de hormona liberadora de hormona de crecimiento (GHRH) ; un receptor de factor de crecimiento similar a la insulina (IGFR) ; un receptor de péptido liberador de gastrina (GRP) ; un receptor de péptido de bombesina (BB) ; un receptor de hormona de crecimiento (GH) ; un receptor de factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) ; un receptor de acetilcolina (ACH) ; un receptor de somatostatina (SST) ; un receptor de cortistatina (CST) ; un receptor de quimiocinas (motivo C-X-C) tal como CXCR4; un receptor de neurofilina; un receptor de hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) ; un receptor de la superfamilia de VIP-glucagón-GRF-secretina tal como un receptor de PAC

o un receptor de VPAC; un receptor de FLT; un receptor de CHRN; un receptor de EPH tal como un receptor de EPHA; un receptor de EFN; un receptor de DLK1, un receptor de DLL3, un receptor de FGF; un receptor de JAG; un receptor de LIF; un receptor de NMB; un receptor de NOTCH; un receptor de PDGF; un receptor de c-kit; un receptor de TGF; un receptor de endotelina; un receptor de quimiocinas; o un receptor de angiopoyetina.

4. Un polipéptido para su uso según cualquier reivindicación precedente, en el que el TM está seleccionado del grupo que comprende: un péptido ErbB tal como un péptido EGF, un péptido adrenomedulina (ADM) , un péptido AM, un péptido AMF, un péptido anfiregulina, un péptido APRIL, un péptido artemina, un péptido betacelulina, un péptido bombesina, un péptido CTR, un péptido endotelina, un péptido eritropoyetina, un péptido FGF, un péptido FSH, un péptido gastrina, un péptido liberador de gastrina (GRP) , un péptido GDNF, un péptido grelina, un péptido GHRH, un péptido G-CSF, un péptido hormona de crecimiento, un péptido HB-EGF, un péptido factor de crecimiento de hepatocitos (HGF) , un péptido IL, un péptido factor de crecimiento de queratinocitos, un péptido leptina, un péptido LIF, un péptido alfa-melanotropina, un péptido MGSA/GRO, un péptido NRG, un péptido oxitocina, un péptido osteopontina (OPN) , un péptido neuregulina-1, un péptido VIP o péptido PACAP, un péptido PDGF, un péptido prolactina, un péptido SCF, un péptido somatostatina (SST) , un péptido cortistatina (CST) , un péptido TNF, un péptido TGF, un péptido VEGF, un péptido vasopresina, un péptido angiopoyetina, un péptido B-CLL, un péptido BCGF-12KD, un péptido BAFF, un péptido galanina, un péptido GDNF, un péptido GnRH, un péptido IGF-II, un péptido LH, un péptido neurotrofina, un péptido sustancia P, un péptido TGF-alfa; un péptido IGF,

un péptido angiopoyetina, un péptido CXC, un péptido CCL, o un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une a un receptor como se define en la reivindicación 3.

5. Un polipéptido para su uso según cualquier reivindicación precedente, en el que la proteasa no citotóxica comprende una cadena L de neurotoxina clostridial o una proteasa de IgA.

6. Un polipéptido para su uso según cualquier reivindicación precedente, en el que el dominio de translocación comprende un dominio de translocación de neurotoxina clostridial.

7. Un polipéptido que comprende:

(i) una proteasa no citotóxica, proteasa que puede escindir una proteína SNARE expresada en una célula cancerosa, en el que dicha proteína SNARE es responsable de la secreción de la célula cancerosa;

(ii) un resto que elige diana (TM) que puede unirse a un sitio de unión sobre una célula cancerosa, sitio de unión que puede someterse a endocitosis para incorporarse en un endosoma dentro de la célula cancerosa; y

(iii) un dominio de translocación que puede translocar la proteasa de dentro de un endosoma, a través de la membrana endosómica y en el citosol de la célula cancerosa;

en el que el polipéptido carece de la función de unión natural de un dominio HCC de neurotoxina clostridial que permite que la neurotoxina clostridial se una a terminaciones nerviosas en la unión neuromuscular;

con la condición de que la célula cancerosa no sea una célula tumoral neuroendocrina;

y con la condición de que el polipéptido no sea una molécula de neurotoxina clostridial que se produce naturalmente;

en el que el TM se une a un receptor seleccionado del grupo que comprende: un receptor de hormona de crecimiento (GH) ; un receptor de acetilcolina (ACH) ; un receptor de quimiocinas (motivo C-X-C) tal como CXCR4; un receptor de neurofilina; un receptor de FLT; un receptor de CHRN; un receptor de EPH tal como un receptor de EPHA; un receptor de EFN; un receptor de DLK1, un receptor de DLL3, un receptor de FGF; un receptor de JAG; un receptor de LIF; un receptor de NMB; un receptor de PDGF; un receptor de c-kit; un receptor de endotelina; un receptor de quimiocinas; o un receptor de angiopoyetina.

8. Un polipéptido según la reivindicación 7, en el que el TM está seleccionado del grupo que comprende: un péptido adrenomedulina (ADM) , un péptido AM, un péptido factor de motilidad autocrina (AMF) , un péptido APRIL, un péptido artemina, un péptido CTR, un péptido endotelina, un péptido eritropoyetina, un péptido FGF, un péptido FSH, un péptido gastrina, un péptido GDNF, un péptido G-CSF, un péptido hormona de crecimiento, un péptido factor de crecimiento de hepatocitos (HGF) , un péptido IL, un péptido factor de crecimiento de queratinocitos, un péptido LIF, un péptido alfa-melanotropina, un péptido MGSA/GRO, un péptido oxitocina, un péptido osteopontina (OPN) , un péptido PDGF, un péptido prolactina, un péptido SCF, un péptido TNF, un péptido vasopresina, un péptido angiopoyetina, un péptido B-CLL, un péptido BCGF-12KD, un péptido BAFF, un péptido galanina, un péptido GDNF, un péptido LH, un péptido NT, un péptido sustancia-P, un péptido angiopoyetina, un péptido CXC, un péptido CCL, o un anticuerpo o fragmento de anticuerpo que se une a un receptor como se define en la reivindicación 7.

9. Un polipéptido según cualquiera de las reivindicaciones 7-8, en el que la proteasa no citotóxica comprende una proteasa de neurotoxina clostridial o una proteasa de IgA.

10. Un polipéptido según cualquiera de las reivindicaciones 7-9, en el que el dominio de translocación comprende un dominio de translocación de neurotoxina clostridial.

11. Un polipéptido según la reivindicación 7, en el que dicho polipéptido comprende una secuencia de aminoácidos que tiene al menos e.

9. 92%, o al menos e.

9. 97%, o al menos e.

9. 99% de identidad de secuencias con una cualquiera de SEQ ID Nº: 27, 28, 29, 30, 31, 32, 37, 38, 39, 42 o 43.

12. Un ácido nucleico que codifica un polipéptido según cualquiera de las reivindicaciones 7-11.

13. Uso de un polipéptido para la fabricación de un medicamento para suprimir o tratar un cáncer

inhibiendo la secreción de una célula cancerosa en un paciente, en el que el polipéptido comprende:

(i) una proteasa no citotóxica, proteasa que puede escindir una proteína SNARE expresada en dicha célula cancerosa;

(ii) un resto que elige diana (TM) que puede unirse a un sitio de unión sobre una célula cancerosa, sitio de unión que puede someterse a endocitosis para incorporarse en un endosoma dentro de la célula cancerosa; y

(iii) un dominio de translocación que puede translocar la proteasa de dentro de un endosoma, a través de la membrana endosómica y en el citosol de la célula cancerosa;

en el que el polipéptido carece de la función de unión natural de un dominio HCC de neurotoxina clostridial que permite que la neurotoxina clostridial se una a terminaciones nerviosas en la unión neuromuscular;

con la condición de que la célula cancerosa no sea una célula tumoral neuroendocrina;

y con la condición de que el polipéptido no sea una molécula de neurotoxina clostridial que se produce naturalmente.

14. El uso según la reivindicación 13, en el que la célula cancerosa está seleccionada del grupo constituido por: una célula de cáncer de pulmón, una célula de cáncer renal, una célula de cáncer cerebral, una célula de cáncer de mama, una célula de cáncer pancreático, una célula de cáncer colorrectal, una célula de cáncer de las glándulas suprarrenales, una célula de cáncer esofágico, una célula de cáncer de linfoma (por ejemplo, linfocito B; célula del manto) , una célula de cáncer de leucemia (por ejemplo, mieloma múltiple) , una célula de cáncer de leucemia aguda, una célula de cáncer de vejiga, una célula de cáncer de huesos, una célula de cáncer intestinal, una célula de cáncer de cuello uterino, una célula de leucemia linfocítica crónica, una célula de linfoma de Hodgkin, una célula de cáncer de hígado, una célula de cáncer de piel de melanoma, una célula de cáncer orofaríngeo, una célula de mieloma, una célula de cáncer de próstata, una célula de sarcoma de tejidos blandos, una célula de cáncer gástrico, una célula de cáncer testicular, una célula de cáncer uterino o una célula de cáncer de sarcoma de Kaposi.

15. El uso según la reivindicación 13 o reivindicación 14, en el que el TM se une a un receptor seleccionado del grupo que comprende: un receptor de ErbB tal como un receptor de EGF; un receptor de hormona liberadora de hormona de crecimiento (GHRH) ; un receptor de factor de crecimiento similar a la insulina (IGFR) ; un receptor de péptido liberador de gastrina (GRP) ; un receptor de péptido de bombesina (BB) ; un receptor de hormona de crecimiento (GH) ; un receptor de factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF) ; un receptor de acetilcolina (ACH) ; un receptor de somatostatina (SST) ; un receptor de cortistatina (CST) ; un receptor de quimiocinas (motivo C-X-C) tal como CXCR4; un receptor de neurofilina; un receptor de hormona liberadora de gonadotropina (GnRH) ; un receptor de la superfamilia de VIP-glucagón-GRF-secretina tal como un receptor de PAC o un receptor de VPAC; un receptor de FLT; un receptor de CHRN; un receptor de EPH tal como un receptor de EPHA; un receptor de EFN; un receptor de DLK1, un receptor de DLL3, un receptor de FGF; un receptor de JAG; un receptor de LIF; un receptor de NMB; un receptor de NOTCH; un receptor de PDGF; un receptor de c-kit; un receptor de TGF; un receptor de endotelina; un receptor de quimiocinas; o un receptor de angiopoyetina.