Anticuerpos anti-TNF-alfa y métodos de uso.

Un anticuerpo que puede unirse a TNF alfa, en el que el anticuerpo comprende:

(a) un polipéptido que comprende un polipéptido que tiene la secuencia mostrada en SEC ID Nº: 2; y

(b) un polipéptido que comprende un polipéptido que tiene la secuencia mostrada en SEC ID Nº: 380,

en el que dicho anticuerpo se une a TNF alfa con afinidad superior a la de infliximab como se determina usando un ensayo Biacore, y

en el que la región VH de infliximab tiene la secuencia mostrada en SEC ID Nº: 1 y la VL de infliximab tiene la secuencia mostrada en SEC ID Nº: 379.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2006/029114.

Solicitante: Janssen Biotech, Inc.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 800/850 RIDGEVIEW DRIVE HORSHAM, PA 19044 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: EVANS, GLEN, A., Raghunathan,Gopalan, MCLANE,KATYA.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales que contienen antígenos... > A61K39/395 (Anticuerpos (aglutininas A61K 38/36 ); Inmunoglobulinas; Inmunosuero, p. ej. suero antilinfocitario)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas... > Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales > C07K16/24 (contra citoquinas, linfoquinas o interferones)

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Fragmento de la descripción:

Anticuerpos anti-TNFa y métodos de uso Campo de la invención

La presente invención se refiere a anticuerpos anti-TNFa y a su uso como terapéuticos. Antecedentes de la invención

La eficacia de una proteína terapéutica puede limitarse por una reacción ¡nmunitaria no deseada a la proteína terapéutica. Para anticuerpos monoclonales, se han desarrollado varias técnicas en intentos por reducir la respuesta del anticuerpo humano anti-murino (HAMA). En general, estos enfoques tienen como objetivo reducir la información genética del ratón en la construcción de anticuerpo final a la vez que se aumenta la información genética humana. Ejemplos de tales enfoques son anticuerpos quiméricos, humanizados y monoclonales completamente humanos (mAb).

Los anticuerpos quiméricos contienen regiones derivadas de diferentes especies de animales, tales como una región variable de inmunoglobulina (Ig) murina y una región constante de Ig humana. Infliximab (comercializado bajo el nombre de marca REMICADE®) es un anticuerpo monoclonal IgGlK quimérico que se une específicamente al factor de necrosis tumoral-a humano (TNFa). Infliximab tiene regiones constantes humanas y regiones variables murinas. La región variable de la cadena pesada (Vh) de infliximab tiene 119 aminoácidos; la región variable de la cadena ligera (VL) tiene 17 aminoácidos. Véanse las patentes de EE.UU. n° 6.277.969, 6.284.471, 6.79.444 y 6.835.823.

TNFa puede producirse por una amplia variedad de células, pero los macrófagos activados constituyen la fuente más abundante de este factor (Vassalli, Ann. Rev. Immunol. 1: 411-452 (1992)). TNFa es un homotrímero soluble de subunidades de proteína de 17 kD (Smith y col., J. Blol. Chem. 262: 6951-6954 (1987)). También existe una forma de precursor de 26 kD unida a la membrana de TNFa (Krlegler y col., Cell 53: 45-53 (1988)).

TNFa produce acciones pro-inflamatorias que producen lesión de tejido, tal como la inducción de actividad procoagulante sobre células endoteliales vasculares que aumentan la adherencia de neutrófilos y linfocitos, y que estimula la liberación del factor de activación de plaquetas de macrófagos, neutrófilos y células endoteliales vasculares (Pober y col., J. Immunol. 136: 168-1687 (1986); Pober y col., J. Immunol. 138: 3319-3324 (1987); Camussi y col., J. Exp. Med. 166: 139-144 (1987)).

Los numerosos efectos biológicos de TNFa y la cltoclna estrechamente relacionada, TNFj5 (también conocida como linfotoxina), están mediados por dos receptores de transmembrana de TNF, los receptores p55 y p75 (Hohmann y col., J. Blol. Chem. 264: 14927-14934 (1989); Engelmann y col., J. Blol. Chem. 265: 1531-1536 (199)). Los dominios extracelulares de receptores de TNF derivados por escisión proteolítlca Inhiben las funciones de TNF (Kohno y col., Proc. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 87: 8331-8335 (199)). TNFa está asociado a Infecciones, trastornos inmunitarios, patologías neoplásicas, patologías autolnmunltarlas y patologías de injerto contra huésped (Cerami y col., Immunol. Today 9: 28-31 (1988); Oliff y col., Cell 5: 555-563 (1987); Piguet y col., J. Exp. Med. 166: 128-1289 (1987)). La desregulación y, en particular la producción en exceso de TNFa, participa en una variedad de enfermedades humanas que incluyen septicemia, malaria cerebral y enfermedades autolnmunitarlas tales como esclerosis múltiple, artritis reumatoide (AR), lupus erltematoso slstémlco y enfermedad de Crohn, además de cáncer (revisado en Zhang y Tracey, The Cytokine Handbook, Thomson AW (ed). pp 517-548 (1998)). TNFa puede mediar en caquexia en cáncer, patología infecciosa y otros estados catabóllcos (revisado en Tracey y col., Ann. N. Y. Acad. Sci. 587: 325-331 (199)).

Los anticuerpos anti-TNFa neutralizantes que inhiben actividades de TNFa son útiles en el tratamiento y/o diagnóstico de enfermedades mediadas por TNFa. Infliximab ha sido autorizado en los Estados Unidos para el tratamiento de espondilitis anquilosante, enfermedad de Crohn, artritis psoriásica y artritis reumatoide. También puede tratar eficazmente otros trastornos o síntomas de diversas patologías ¡nmunitarlas y autolnmunltarlas, además de enfermedades inflamatorias, tales como lupus eritematoso sistémico, tiroidosis, enfermedad de injerto contra huésped, esclerodermla, diabetes mellitus, enfermedad de Graves, sarcoidosis, enfermedad Inflamatoria del Intestino crónica, colitis ulcerosa, coagulación intravascular diseminada, aterosclerosis y patología de Kawasaki. Véanse las patentes de EE.UU. n° 5.656.272, 5.698.195 y 5.919.452, todas las cuales incorporan en el presente documento por referencia.

Se ha informado que se han observado anticuerpos para infliximab en algunos pacientes tratados (Targan y col., N. Engl. J. Med. 337: 129-135 (1997); Maini y col., Artritis Rheum. 41: 1552-1563 (1998)). Por consiguiente, con el fin de disminuir posiblemente la incidencia de anticuerpos anti-infliximab en pacientes tratados, se desea reducir la cantidad de secuencias de amino murinas presentes en la molécula.

El documento WO 3/42247 describe la modificación de anticuerpos reactivos para TNF alfa para producir anticuerpos anti-TNF alfa que son menos inmunogénicos que el anticuerpo parental no modificado cuando se usa in

vitro.

Breve descripción de los dibujos

La Fig. 1 muestra el alineamiento de regiones VH del anticuerpo para TNFa C7 (SEC ID N°: 3) e infliximab (SEC ID N°: 1). Aminoácidos idénticos se indican por un Los cambios de aminoácidos conservativos se muestran en negrita.

La Fig. 2 muestra el alineamiento de regiones VL de C7 (SEC ID N°: 38) e infliximab (SEC ID N°: 379). Aminoácidos idénticos se indican por un Los cambios de aminoácidos conservativos se muestran en negrita.

La Fig. 3 muestra las curvas de valoración de ELISA para C7 e infliximab.

Resumen de la invención

En un aspecto, la invención proporciona un anticuerpo que puede unirse a TNF alfa, en el que el anticuerpo comprende: (a) un polipéptido que comprende un polipéptido que tiene la secuencia mostrada en SEC ID N°: 2; y (b) un polipéptido que comprende un polipéptido que tiene la secuencia mostrada en SEC ID N°: 38, en el que dicho anticuerpo se une a TNF alfa con afinidad superior a la de infliximab como se determina usando un ensayo Biacore, y en el que la región Vh de infliximab tiene la secuencia mostrada en SEC ID N°: 1 y la región Vl de infliximab tiene la secuencia mostrada en SEC ID N°: 379.

En otro aspecto, la invención proporciona un fragmento biológicamente activo de un anticuerpo de la invención.

En otro aspecto, la invención proporciona una línea celular que expresa un anticuerpo de la invención o un fragmento biológicamente activo de la invención.

En otro aspecto, la invención proporciona una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de un anticuerpo de la invención o de al menos un fragmento biológicamente activo de la invención y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.

Un aspecto de la divulgación es un polipéptido que comprende un polipéptido que tiene la secuencia mostrada en SEC ID N°: 2.

Otro aspecto de la divulgación es un polipéptido que comprende un polipéptido que tiene la secuencia mostrada en SEC ID N°: 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 1, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 2, 21, 22, 23, 24, 25, 26, 27, 28, 29, 3, 31, 32,

33, 34, 35, 36, 37, 38, 39, 4, 41, 42, 43, 44, 45, 46, 47, 48, 49, 5, 51, 52, 53, 54, 55, 56, 57, 58, 59, 6, 61, 62, 63,

64, 65, 66, 67, 68, 69, 7, 71, 72, 73, 74, 75, 76, 77, 78, 79, 8, 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 9, 91, 92, 93, 94,

95, 96, 97, 98, 99, 1, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19, 11, 111, 112, 113, 114, 115, 116, 117, 118,

119, 12, 121, 122, 123, 124, 125,... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Un anticuerpo que puede unirse a TNF alfa, en el que el anticuerpo comprende:

(a) un pollpéptido que comprende un polipéptido que tiene la secuencia mostrada en SEC ID N°: 2; y

(b) un polipéptido que comprende un polipéptido que tiene la secuencia mostrada en SEC ID N°: 38,

en el que dicho anticuerpo se une a TNF alfa con afinidad superior a la de infliximab como se determina usando un ensayo Biacore, y

en el que la reglón Vh de infliximab tiene la secuencia mostrada en SEC ID N°: 1 y la VL de infliximab tiene la secuencia mostrada en SEC ID N°: 379.

2. Un anticuerpo de la reivindicación 1, en el que el polipéptido de la reivindicación 1(a) que tiene la secuencia mostrada en SEC ID N°: 2 tiene la secuencia mostrada en SEC ID N°: 3.

3. Un fragmento biológicamente activo del anticuerpo de la reivindicación 1 o la reivindicación 2.

4. Una línea celular que expresa el anticuerpo de la reivindicación 1 o la reivindicación 2 o el fragmento biológicamente activo de la reivindicación 3.

5. Una línea celular que comprende un vector que comprende un polinucleótldo que codifica el polipéptido citado en la reivindicación 1(a) o la reivindicación 2 y un vector que comprende un polinucleótido que codifica el pollpéptido citado en la reivindicación 1(b).

6. Una línea celular según la reivindicación 5, en la que el polinucleótldo que codifica el pollpéptido citado en la reivindicación 1 o la reivindicación 2 tiene la secuencia mostrada en SEC ID N°: 191 o una secuencia complementaria.

7. Una línea celular según la reivindicación 5 o la reivindicación 6, en la que el polinucleótldo que codifica el polipéptido citado en la reivindicación 1 (b) tiene la secuencia mostrada en SEC ID N°: 381 o una secuencia complementaria.

8. La línea celular de una cualquiera de las reivindicaciones 4 a 7, en la que la línea celular es la línea celular HEK293, NSO, SP2/ o CHO.

9. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad eficaz de al menos un anticuerpo de la reivindicación 1 o la reivindicación 2 o de al menos un fragmento biológicamente activo de la reivindicación 3 y un vehículo o diluyente farmacéuticamente aceptable.