Métodos de tratamiento de enfermedades inflamatorias crónicas usando un antagonista de GM-CSF.

Un anticuerpo anti-GM-CSF para su uso para reducir los síntomas de artritis reumatoide en un paciente sometidoa tratamiento con metotrexato sin inducir neutropenia clínicamente significativa,

en el que el recuento absoluto deneutrófilos es menor de 0,5 x 109/l, donde el anticuerpo anti-GM-CSF es un antagonista de GM-CSF, donde elmetotrexato se proporciona en una cantidad de 7,5 mg a 25 mg/semana y donde el anticuerpo anti-GM-CSF seproporciona en una cantidad de 0,1 a 25 mg/kg.

Métodos de tratamiento de enfermedades inflamatorias crónicas usando un antagonista de GM-CSF

Antecedentes de la invención La artritis reumatoide (AR) es una enfermedad inflamatoria crónica y típicamente progresiva que afecta hasta al 1% de la población adulta en todo el mundo (Gabriel, Rheum Dis Clin North Am 27: 269-81, 2001) . Las actuales recomendaciones para el tratamiento de AR incluyen tratamiento temprano con fármacos antirreumáticos modificadores de la enfermedad (FARME) después de que se ha establecido el diagnóstico. Fármacos antiinflamatorios no esteroideos (FAINE) , y hasta recientemente, inhibidores de COX-2 se han usado ampliamente mientras se esperaba para confirmar el diagnóstico o más tarde en el curso de la enfermedad junto con FARME. El metotrexato es el FARME usado más ampliamente, pero otros agentes, incluyendo hidroxicloroquina, sulfasalazina, oro, minociclina y leflunomida, también se prescriben. Pueden usarse corticoesteroides en combinación con FARME,

pero en general, solamente se usan dosis bajas para minimizar los acontecimientos adversos (O'Dell, New Engl. J. Med. 350: 2591-2603, 2004) .

Recientemente han sido aprobados varios nuevos fármacos biológicos para el tratamiento de AR. Etanercept (Enbrel ®) , bloquea el Factor de Necrosis Tumoral alfa (TNF-!) ; infliximab y adalimumab (Remicade® y Humira®, respectivamente) bloquean TNF-! y TNF-∀; y Anakinra (Kineret®) es un inhibidor de IL-1. Estos agentes actúan rápidamente y han mostrado ser modificadores de la enfermedad (ralentizan la erosión articular/ósea) (Olsen & Stein, New Engl. J. Med 350: 2167-2179, 2004) . Sin embargo, sigue habiendo algunos problemas con estas terapias. Algunos pacientes no alcanzan una respuesta adecuada a los inhibidores de TNF. Además, en algunos pacientes, el beneficio terapéutico del inhibidor de TNF se pierde con el tiempo. El bloqueo de la ruta de TNF

también se ha asociado con la reactivación de la tuberculosis así como un riesgo incrementado de infecciones graves, desmielinización y linfoma, aunque los pacientes de AR corren un mayor riesgo de linfoma que la población general. Anakinra tiene una corta semivida y debe administrarse como una inyección diaria y, por lo tanto, se usa con menos frecuencia que los inhibidores de TNF de acción larga como terapia biológica de primera línea.

Datos recientes sobre el uso de rituximab (Mabthera®) , un anticuerpo monoclonal anti-CD20, en combinación con metotrexato en pacientes con AR ha mostrado beneficio durante un periodo de tiempo prolongado después de dos infusiones del anticuerpo (Edwards et al., New Engl. J. Med 350: 2572-2581, 2004) .

El metotrexato se usa como FARME para tratar AR y otras enfermedades artríticas inflamatorias e indicaciones autoinmunitarias, incluyendo psoriasis y lupus eritematoso sistémico. El metotrexato es particularmente eficaz para tratar artritis psoriásica y artritis idiopática juvenil. El fármaco también se usa en quimioterapia de cáncer a dosis más elevadas que las que se recomiendan para el tratamiento de artritis inflamatoria. Cuando se usa en quimioterapia, el metotrexato puede causar supresión de la médula ósea dando como resultado una producción disminuida de todo tipo de células sanguíneas, particularmente cuando se usan en combinación con cualquiera de una serie de otros fármacos incluyendo corticoesteroides, fármacos antiinflamatorios no esteroideos, ciclosporina, trimetoprima y ciertos antibióticos. Aunque el metotrexato es generalmente bien tolerado en los regímenes de dosificación usados para el tratamiento de artritis (o psoriasis) , incluso a estas dosis más bajas el metotrexato puede causar supresión de la médula ósea y especialmente neutropenia. Por ejemplo, en casos clínicos (Sosin & Handa, Brit. Med. J. 326: 266-267, 2003) se describió neutropenia en pacientes tratados con dosis semanales de metotrexato de entre 5 mg y

17, 5 mg. Las recomendaciones para la dosificación de metotrexato en AR, tales como las directrices de la British Society for Rheumatology (julio de 2000) son 7, 5 mg de metotrexato a la semana, incrementando en 2, 5 mg cada seis semanas hasta una dosis máxima semanal de 25 mg. Por lo tanto, la neutropenia se desarrollaba en estos pacientes a dosis significativamente por debajo de la dosis máxima recomendada, especialmente con terapias concomitantes.

En quimioterapia que incluye metotrexato, puede prescribirse GM-CSF para corregir los bajos niveles de neutrófilos en la sangre y, por lo tanto, reducir la duración y gravedad de la neutropenia (Am. Soc. Clin. Onc. 2006, J. Clin. Oncol. 24: 1 de julio de 2006) . En este entorno clínico, se usa GM-CSF como factor de crecimiento hematopoyético para potenciar la producción de granulocitos (incluyendo neutrófilos) y macrófagos. Por ejemplo, la administración a 55 corto plazo de GM-CSF a pacientes de cáncer puede conducir a un rápido incremento de los recuentos de neutrófilos y reduce la neutropenia en pacientes tratados con un régimen de quimioterapia que incluye metotrexato (Aglietta et al., Cancer 72: 2970-2973, 1993) . La eficacia establecida de GM-CSF en el tratamiento de neutropenia debida a metotrexato plantea la preocupación de que el antagonismo de GM-CSF pueda tener el efecto opuesto, es decir, que el antagonismo a GM-CSF pueda contribuir a la neutropenia, particularmente en paciente tratados concomitante o previamente con metotrexato.

Krinner et al. (Mol Immunol 2006, 44 (5) : 916-25) describe una IgG1 monoclonal humana que neutraliza GM-CSF. Puljic et al. (Eur J Pharmacol 2006, 557: 230-5) describe un anticuerpo que neutraliza GM-CSF en un modelo en ratón para inflamación pulmonar. Riksen et al. (Ann Rheum Dis 2005, 65 (4) : 465-70) describe el tratamiento de 65 pacientes con artritis con metotrexato. Gong et al. (Am Heart J 2006, 151 (1) : 62-8) describe la adición de metotrexato a terapia convencional para pacientes con insuficiencia cardiaca crónica. Tarkowski et al. (Acta Neurol

Scand 2001, 103: 166-174) describe el aumento local y sistémico de GM-CSF en enfermedad de Alzheimer y demencia vascular.

La neutropenia es un efecto secundario significativo y grave de varias terapias actuales para artritis inflamatoria que incluyen antagonistas de citoquina. El antagonista de IL-1 anakinra conduce a un riesgo incrementado de neutropenia, tanto en solitario como particularmente cuando se usa en combinación con un antagonista de TNF (Fleischmann et al., Expert Opinion Biol Ther. 4: 1333, 2004) . El infliximab también ha sido asociado con un riesgo incrementado de neutropenia.

Actualmente existe una necesidad de tratamientos adicionales de AR, particularmente en pacientes que reciben metotrexato. La presente invención aborda esta necesidad.

Breve sumario de la invención La presente invención proporciona un anticuerpo anti-GM-CSF para su uso en la reducción de los síntomas de artritis reumatoide en un paciente sometido a tratamiento con metotrexato sin inducir neutropenia clínicamente significativa, en el que el recuento absoluto de neutrófilos es menor de 0, 5 x 109/l, donde el anticuerpo anti-GM-CSF es un antagonista de GM-CSF, donde el metotrexato se proporciona en una cantidad de 7, 5 mg a 25 mg/semana, y donde el anticuerpo anti-GM-CSF se proporciona en una cantidad de 0, 1 a 25 mg/kg. En algunas realizaciones, el

anticuerpo anti-GM-CSF se produce de forma recombinante, por ejemplo, es un anticuerpo monoclonal recombinante. En otras realizaciones, el anticuerpo anti-GM-CSF, por ejemplo, anti-GM-CSF purificado a partir de plasma humano, se purifica a partir de una fuente natural.

En diversas realizaciones, el anticuerpo puede ser un anticuerpo policlonal, un anticuerpo monoclonal o un anticuerpo tal como un nanocuerpo o un anticuerpo de camélido. En algunas realizaciones, el anticuerpo es un fragmento de anticuerpo, tal como un Fab, un Fab', un F (ab') 2, un scFv o un anticuerpo de dominio (dAB) . El anticuerpo también puede modificarse, por ejemplo, para mejorar la estabilidad. Por lo tanto, en algunas realizaciones, el anticuerpo está conjugado a polietilenglicol.

En algunas realizaciones, el anticuerpo tiene una KD de aproximadamente 100 pM a aproximadamente 10 nM, por ejemplo, de aproximadamente 100 pM, aproximadamente 200 pM, aproximadamente 300 pM, aproximadamente 400 pM, aproximadamente 500 pM, aproximadamente 600 pM, aproximadamente 700 pM, aproximadamente 800 pM, aproximadamente 900 pM, o aproximadamente 1 nM a aproximadamente 10 nM. En realizaciones adicionales, el anticuerpo tiene una KD de aproximadamente 1 pM a aproximadamente 100 pM, por ejemplo, una KD de aproximadamente 1 pM, aproximadamente 5 pM, aproximadamente 10 pM, aproximadamente 15 pM, aproximadamente 20 pM, aproximadamente... [Seguir leyendo]

1. Un anticuerpo anti-GM-CSF para su uso para reducir los síntomas de artritis reumatoide en un paciente sometido a tratamiento con metotrexato sin inducir neutropenia clínicamente significativa, en el que el recuento absoluto de neutrófilos es menor de 0, 5 x 109/l, donde el anticuerpo anti-GM-CSF es un antagonista de GM-CSF, donde el metotrexato se proporciona en una cantidad de 7, 5 mg a 25 mg/semana y donde el anticuerpo anti-GM-CSF se proporciona en una cantidad de 0, 1 a 25 mg/kg.

2. El anticuerpo anti-GM-CSF para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, donde el anticuerpo

(a) es un anticuerpo policlonal;

(b) es un anticuerpo monoclonal;

(c) es un fragmento de anticuerpo que es un Fab, un Fab', un F (ab') 2, un scFv o un dAB;

(d) es un anticuerpo de alta afinidad que tiene una KD para unión a GM-CSF humano de menos de 100 pM; 15 (e) es un anticuerpo neutralizante;

(f) es un anticuerpo recombinante;

(g) es un anticuerpo quimérico;

(h) es un anticuerpo humano;

(i) comprende una región variable humana;

(j) comprende una región constante de cadena ligera humana;

(k) comprende una región constante de cadena pesada humana;

(l) se une al mismo epítopo que el 19/2 quimérico;

(m) comprende las regiones VH yVL de 19/2 quimérico;

(n) comprende las CDR1, CDR2 y CDR3 de la región VH y la región VL de 19/2 quimérico; o 25 (o) comprende la CDR3 de la región VH y la CDR3 de la región VL de 19/2 quimérico.

3. El anticuerpo anti-GM-CSF para su uso de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, donde el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal y, opcionalmente, donde el anticuerpo monoclonal es un anticuerpo recombinante.

4. El anticuerpo anti-GM-CSF para su uso de acuerdo con la reivindicación 3, donde el anticuerpo es humanipulado.

5. El anticuerpo anti-GM-CSF para su uso de acuerdo con la reivindicación 3 o 4, donde el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal neutralizante que se une al mismo epítopo que 19/2 quimérico.

6. El anticuerpo anti-GM-CSF para su uso de acuerdo con la reivindicación 5, donde el anticuerpo tiene una KD que varía entre aproximadamente 5 pM y aproximadamente 50 pM.

7. El anticuerpo anti-GM-CSF para su uso de acuerdo con la reivindicación 6, donde el anticuerpo tiene una KD de aproximadamente 10 pM a aproximadamente 30 pM.

8. El anticuerpo anti-GM-CSF para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, donde el anticuerpo es un anticuerpo monoclonal recombinante neutralizante que se une al miso epítopo que 19/2 quimérico y tiene una KD de aproximadamente 10 pM a aproximadamente 30 pM.

9. El anticuerpo anti-GM-CSF para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, donde el anticuerpo es un fragmento de anticuerpo que es un Fab, Fab', F (ab') 2, scFv o dAB y está conjugado a polietilenglicol.

10. El anticuerpo anti-GM-CSF para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, donde el anticuerpo comprende una región constante de cadena pesada humana gamma, opcionalmente una región gamma 1.

11. El anticuerpo anti-GM-CSF para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, donde el anticuerpo comprende las regiones VH yVL de 19/2 quimérico y una región constante de cadena pesada humana.

12. El anticuerpo anti-GM-CSF para su uso de acuerdo con la reivindicación 11, donde la región constante de 55 cadena pesada humana es una región gamma, opcionalmente una región gamma 1.

13. El anticuerpo anti-GM-CSF para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, donde el anticuerpo anti-GM-CSF comprende un Fab' humanipulado con la especificidad de unión de 19/2 quimérico y tiene una KD que varía entre aproximadamente 5 y aproximadamente 50 pM.

14. El anticuerpo anti-GM-CSF para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el anticuerpo se administra por vía subcutánea o por vía intravenosa.

15. El anticuerpo anti-GM-CSF para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde 65 el anticuerpo se proporciona en una cantidad de 0, 2 a 10 mg/kg.

16. Uso de un anticuerpo anti-GM-CSF para la preparación de un medicamento para reducir los síntomas de artritis reumatoide en un paciente sometido a tratamiento con metotrexato sin inducir neutropenia clínicamente significativa, en el que el recuento absoluto de neutrófilos es menor de 0, 5 x 109/l, donde el anticuerpo anti-GM-CSF es un antagonista, donde el anticuerpo anti-GM-CSF se proporciona en una cantidad de 0, 1 a 25 mg/kg y donde el metotrexato se proporciona en una cantidad de 7, 5 mg a 25 mg/semana.