Composición antiinflamatoria que contiene macrolactina y un derivado de la misma como ingredientes activos.

Composición farmacéutica, para su utilización en un procedimiento para prevenir y tratar enfermedadesinflamatorias,

que comprende macrolactina A como ingrediente activo producida, a partir de la cepa Bacilluspolyfermenticus KJS-2 (KCCM10769P).

Composición antiinflamatoria que contiene macrolactina y un derivado de la misma como ingredientes activos Sector técnico La presente invención se refiere a la utilización como antiinflamatorio de compuestos de macrolactina, tales como macrolactina A (a continuación “MA”) , 7-O-malonil macrolactina A (a continuación, "MMA") , y 7-O-succinil macrolactina A (a continuación, "SMA") , que son producidas a partir de Bacillus polyfermenticus KJS-2 (KCCM10769P) . concretamente, la presente invención se refiere a la utilización de compuestos de macrolactina que tienen una actividad antiinflamatoria superior que es debida a la inhibición de la formación de sintetasa de óxido nítrico inducible (a continuación, "iNOS") y ciclooxigenasa-2 (a continuación, "COX-2") , y de factor alfa de necrosis tumoral (a continuación, "TNF- a") , interleuquina-1l (a continuación, "IL-1l") , interleuquina-6 (a continuación, "IL-6") y factor estimulante de colonias de macrófagos de granulocitos (a continuación, "GM-CSF") que son citoquinas pro

inflamatorias.

Antecedentes técnicos Los compuestos de macrolactina son antibióticos macrolidos que tienen un anillo de lactona de 24 miembros (J. Am. Chem. Soc., 1989, 111, 7519-7524) . Se ha dado a conocer que los compuestos son producidos a partir de bacterias oceánicas no clasificadas, cepas actinomyces y Bacillus strains, y se han identificado 21 compuestos de macrolactina. Estos compuestos de macrolactina tienen una serie de actividades farmacológicas. Los estudios anteriores de las actividades farmacológicas de los compuestos de macrolactina son los siguientes.

William Fenical dio a conocer la actividad antivírica de MA contra Herpes simplex y HIV en 1989. lck-Dong Yoo obtuvo MA a partir de cepa Actinomadura sp. en 1997 y estudió la protección de neurocitos derivados de glutamato utilizando la MA. En 2001, Hiroshi Sano aisló MA de la cepa Bacillus sp. PP19-H3 y estudió la actividad antibacteriana de MA contra las cepas Staphylococcus aureus IFO 12732 y Bacillus subtilis IFO 3134. Sung-Won Choi obtuvo MA a partir de la cepa Streptomyces sp. YB-401 en 2003 y dio a conocer el efecto de inhibición de MA sobre la biosíntesis de colesterol. En 2004, Keun-Hyung Park separó MA de la cepa Bacillus amyloliquefaciens CH0104 y estudió la actividad antibacteriana de MA contra Staphylococcus aureus KCTC 1928, Escherichia coli KCTC 2593 y Botr y tis cinerea. Joo-Won Suh obtuvo MA a partir de la cepa Bacillus sp. Sunhua en 2005 y estudió la inhibición de Streptomyces scabies que induce la costra por hongos común de la patata utilizando la MA. En 2006, Gabriella Molinari aisló MA, MMA y SMA a partir de la cepa Bacillus subtilis DSM 16696 y estudió la actividad

antibacteriana de cada uno de dichos compuestos contra las cepas resistentes a vancomicina Enterococci (VRE) , resistentes a meticilina Staphylococcus aureus (MRSA) y Burkholderia cepacia. En este estudio se informó de que tanto MMA como SMA tienen actividad antibacteriana superior contra las bacterias de prueba, mientras que MA mostró efectos antibacterianos solamente contra MRSA.

Aunque se sabe que los compuestos de macrolactina tienen varias actividades farmacológicas, no se han dado a conocer hasta el momento estudios con respecto al efecto antiinflamatorio de los compuestos de macrolactina.

La inflamación es una respuesta defensiva a una lesión que ha tenido lugar en la parte afectada de un ser vivo. Es decir, una respuesta inflamatoria es una respuesta defensiva para restablecer el estado original como respuesta a 45 un estímulo perjudicial y eliminando la lesión causada por dicho estímulo.

El óxido nítrico (a continuación, "NO") , una de las sustancias que induce inflamación, es producido en las células endoteliales o macrófagsos en estado normal. El NO, mediador que participa en la base de la vasodilatación, adhesión de plaquetas y agregación, neurotransmisión, movimiento del sistema digestivo y erección, etc. Se produce en células inflamatorias y células no inmunes y lleva a cabo también una acción defensiva contra la infección por microorganismos. La estimulación debida a lipopolisacáridos (a continuación, "LPS") , factores que inducen inflamación e irradiación, etc. Inducen la expresión de la proteína intracelular iNOS y produce NO de manera continua induciendo enfermedades inflamatorias.

Otra sustancia inductora de inflamación, prostaglandina E2 (a continuación, "PGE2") es un tipo de hormona derivado del ácido araquidónico, y participa en varios aditivos fisiológicos. La PGE2 es producida por la expresión de la proteína COX-2. Los medicamentos que suprimen la expresión de COX-2 tienen efectos analgésicos, antiedémicos, antipiréticos, antiinflamatorios y anticoagulantes, etc. Por la inhibición de la producción de PGE2 en focus inflamatorios y, por lo tanto, se pueden utilizar para la prevención y tratamiento de trombos, edemas, infartos, apoplejía y enfermedades cerebrovasculares.

Las dos sustancias anteriores inductoras de inflamación iNOS y COX-2, están íntimamente relacionadas entre sí. Por ejemplo, el NO producido por exceso puede afectar la expresión de COX-2. De acuerdo con ello, un inhibidor de la actividad de iNOS y COX-2 se considera que tiene elevado potencial para su desarrollo como medicamento para 65 la prevención y tratamiento de varias enfermedades (por ejemplo, enfermedades inflamatorias) , provocadas por la producción excesiva de metabolitos de NO y PGE2.

Hasta el momento, los medicamentos esteroides y no esteroides antiinflamatorios (los NSAID) se han utilizado de manera apropiada para el tratamiento de enfermedades inflamatorias agudas y crónicas. No obstante, los agentes convencionales antiinflamatorios tienen efectos secundarios considerablemente adversos, especialmente cuando se utilizan durante largo tiempo. Por lo tanto, es muy necesario desarrollar un nuevo agente inflamatorio con pocos efectos secundarios.

Materia de la invención Problema técnico Considerando el problema anterior de los agentes antiinflamatorios convencionales, el objetivo de la presente invención es el de dar a conocer la utilización antiinflamatoria de compuestos de macrolactina, tales como MA, MMA y SMA, que son producidos a partir de Bacillus polyfermenticus KJS-2 (KCCM10769P) . Especialmente, la presente invención da a conocer la utilización de compuestos de macrolactina que tienen una superior actividad antiinflamatoria que es debida a la formación de iNOS y COX-2.

Además, es objetivo de la presente invención dar a conocer una composición farmacéutica que comprende los anteriormente mencionados compuestos de macrolactina como ingredientes activos para prevenir y tratar 20 enfermedades inflamatorias.

Solución técnica En un aspecto, la presente invención da a conocer una utilización antiinflamatoria de MA de fórmula (1) , MMA de 25 fórmula (2) y SMA de fórmula (3) que son producidas a partir de la cepa Bacillus polyfermenticus KJS-2 (KCCM10769P) .

En otro aspecto, la presente invención da a conocer la utilización antiinflamatoria de las macrolactinas anteriormente citadas, tales como MA, MMA y SMA para la inhibición de la formación de las proteínas iNOS y COX-2 y citoquinas 30 pro-inflamatorias.

En otro aspecto adicional, la presente invención da a conocer una composición farmacéutica que comprende los compuestos de macrolactina anteriormente citados para la prevención y tratamiento de enfermedades inflamatorias.

C24H34O5 Peso molecular: 402, 52 Macrolactina A

[Fórmula 2]

Peso molecular: 488, 57 7-O-malonil macrolactina A

[Fórmula 3]

C28H38O8 Peso molecular: 502.6 7-O-succinil macrolactina A

La presente invención se explicará de manera más detallada a continuación A efectos de obtener MA de fórmula (1) y MMA de fórmula (2) , se hace fermentar, en un medio de MA, Bacillus polyfermenticus KJS-2 (KCCM10769P) , que es separado por los presente inventores. El caldo fermentado es extraído mediante acetato de etilo y el extracto es concentrado. El producto objetivo es separado y purificado de acuerdo con procedimientos del ejemplo 1.

A efectos de obtener SMA de fórmula 3, la cepa anterior es fermentada en caldo de soja tríptico (TSB) que contiene la resina HP-20. El producto objetivo es separado y purificado de acuerdo con los procedimientos del ejemplo 1.

Estructuras de los productos purificados son analizadas por LC/Masas y Resonancia Magnética Nuclear (RMN) .

Hasta la actualidad no se ha dado a conocer investigaciones con respecto a los efectos antiinflamatorios de los compuestos de macrolactina antes indicados MA, MMA y SMA.

Los presentes inventores han confirmado los efectos antiinflamatorios de... [Seguir leyendo]

1. Composición farmacéutica, para su utilización en un procedimiento para prevenir y tratar enfermedades inflamatorias, que comprende macrolactina A como ingrediente activo producida, a partir de la cepa Bacillus 5 polyfermenticus KJS-2 (KCCM10769P) .

2. Composición farmacéutica, para su utilización en un procedimiento para prevenir y tratar enfermedades inflamatorias, que comprenden 7-O-malonil macrolactina A como ingrediente activo, producida a partir de la cepa Bacillus polyfermenticus KJS-2 (KCCM10769P) .

3. Composición farmacéutica, para su utilización en un procedimiento para prevenir y tratar enfermedades inflamatorias, que comprenden 7-O-succinil macrolactina A como ingrediente activo, producida a partir de la cepa Bacillus polyfermenticus KJS-2 (KCCM10769P) .

4. Composición, para su utilización en un procedimiento, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que la actividad antiinflamatoria es debida a la inhibición de la formación de óxido nítrico, prostaglandina E2, factor alfa de necrosis tumoral, interleuquina-1l, interleuquina-6 y factor estimulante de colonias de macrófagos de granulocitos que son mediadores inflamatorios.

5. Composición, para su utilización en un procedimiento, según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que la actividad antiinflamatoria es debida a la inhibición de la actividad de la sintetasa de óxido nítrico inducible y ciclooxigenasa-2.