(23/08/2017) Un procedimiento para amplificar simultáneamente al menos un primer y un segundo ácidos nucleicos diana que pueden estar presentes en una muestra de fluido, comprendiendo dicho procedimiento las etapas automatizadas de:
d. poner en contacto ácidos nucleicos de dicha muestra con uno o más reactivos de amplificación que comprenden una polimerasa con actividad de transcriptasa inversa en al menos dos recipientes de reacción para la amplificación de al menos un primer y un segundo ácidos nucleicos diana en los al menos dos recipientes de reacción;
e. incubar en dichos recipientes de reacción dichos ácidos nucleicos con dichos uno o más reactivos de…
Sección de la CIP Química y metalurgia
(07/06/2017). Solicitante/s: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG. Clasificación: C12Q1/70.
Un procedimiento para amplificar simultáneamente los genotipos 1, 2, 3 y/o 4 del virus de la hepatitis E si están presentes en una muestra biológica, que comprende las etapas de
(a) aislar ácidos nucleicos presentes en la muestra biológica;
(b) amplificar los ácidos nucleicos aislados en la etapa (a) usando un cebador directo no degenerado y una mezcla de dos cebadores inversos, en el que los cebadores directo e inverso son capaces de amplificar los genotipos 1, 2, 3 y 4 del virus de la hepatitis E, en el que la secuencia de ácido nucleico del cebador directo comprende la SEQ ID NO: 6 y la secuencia de ácido nucleico de la mezcla de dos cebadores inversos comprende la SE ID NO: 13 y la SEQ ID NO: 14.
PDF original: ES-2637489_T3.pdf
PCR asimétrica junto con caracterización post-PCR para la identificación de ácidos nucleicos.
(05/10/2016) Un método para clasificar, identificar, cuantificar y/o genotipificar una o más dianas de ácido nucleico en una muestra, comprendiendo el método:
a) realizar una PCR cinética asimétrica en una mezcla de reacción que contiene una o más sondas 5'- nucleasa marcadas y una o más sondas de hibridación marcadas en la que dichas una o más sondas 5'- nucleasa y dichas una o más sondas de hibridación pueden ser la(s) misma(s) sonda(s) o diferentes sondas en secuencia;
b) hacer un seguimiento de las señales fluorescentes generadas a partir de la una o más sondas 5'-nucleasa marcadas para crear una o más curvas de crecimiento a partir de la PCR cinética para calcular un valor Ct (umbral de ciclo)…
Supresión de la amplificación usando un oligonucleótido y una polimerasa que carece significativamente de actividad exonucleasa 5''-3''.
(08/03/2016) Un método para detectar una secuencia diana en un polinucleótido en una muestra biológica, en el que la muestra puede contener también, o alternativamente, un segundo polinucleótido que comprende una segunda secuencia, en donde la segunda secuencia difiere de la secuencia diana por uno a 4 nucleótido(s), comprendiendo el método,
i. Poner en contacto la muestra con un oligonucleótido bloqueador bajo condiciones de la reacción de extensión del cebador para permitir la hibridación del oligonucleótido bloqueador a la segunda secuencia y la secuencia diana, si está presente
ii,. Poner en contacto la muestra en presencia del oligonucleótido bloqueador hibridado con al menos un cebador y una polimerasa que carece significativamente de actividad exonucleasa 5'-3' en condiciones tales que se produce…
Oligonucleótidos para controlar la amplificación de ácidos nucleicos.
Sección de la CIP Química y metalurgia
(02/03/2016). Ver ilustración. Solicitante/s: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG. Clasificación: C12Q1/68.
Un oligonucleótido aislado que consiste en la SEQ ID NO 1.
PDF original: ES-2644949_T3.pdf
Amplificación de ácidos nucleicos específica de alelo.
(10/12/2014) Un método de amplificación específica de alelo de una variante de una secuencia diana, en el que la amplificación implica la reacción en cadena de la polimerasa (PCR), la secuencia diana puede existir en forma de varias secuencias variantes, comprendiendo el método
(a) hibridación de un primer y un segundo oligonucleótidos a la secuencia diana; en el que el primer oligonucleótido es al menos parcialmente complementario a la secuencia diana, y el segundo oligonucleótido es al menos parcialmente complementario sobre su porción 3' y 5' de la secuencia diana, y tiene al menos un nucleótido selectivo complementario a solo una variante de la secuencia diana, en el que dicho nucleótido selectivo…
Amplificación específica de alelo usando un cebador con un nucleótido modificado.
(19/11/2014) Un método de amplificación específica de alelo de una variante de una secuencia diana, que existe en forma de varias secuencias variantes, que comprende
(a) proporcionar una muestra, que contiene posiblemente al menos una variante de una secuencia diana;
(b) proporcionar un primer oligonucleótido, al menos parcialmente complementario de una o más variantes de la secuencia diana;
(c) proporcionar un segundo oligonucleótido, al menos parcialmente complementario de una o más variantes de la secuencia diana, que tiene un nucleótido 3' terminal complementario de solamente una variante de la secuencia diana; en el que dicho segundo oligonucleótido incorpora al menos un nucleótido con una base modificada…
Amplificación preferente de ARNm respecto a ADN utilizando cebadores modificados químicamente.
(09/10/2013) Método de amplificación selectiva de un ARN mensajero diana, que comprende las etapas de:
a) hibridar un primer oligonucleótido con dicha diana de ARNm y llevar a cabo una síntesis de ADN dirigida por ARN utilizando por lo menos un enzima capaz de síntesis dirigida por ARN, en el que dicho primer oligonucleótido:
i. comprende por lo menos un nucleótido con una base adenina, guanina o citosina modificada covalentemente en el grupo amino exocíclico con un grupo bencilo o un grupo bencilo sustituido,
ii. es por lo menos parcialmente complementario a dicha diana de ARNm, y
iii. comprende una unión exón-exón en la diana,
b) amplificar el producto de la etapa a) utilizando dicho primer oligonucleótido y un segundo oligonucleótido con por lo menos un enzima capaz de síntesis de ADN dirigida…
