Procedimiento de detección de polimorfismos de nucleótido único.

Procedimiento para detectar al menos una mutación (X) de un codón que codifica valina en la posición de aminoácido 600 (V600X) en el exón 15 del gen BRAF en una muestra de ácido nucleico de un ser humano,

cuyo procedimiento comprende:

(a) realizar una reacción de amplificación con la muestra de ácido nucleico, en el que la reacción de amplificación comprende un cebador, en el que los últimos tres nucleótidos en el extremo 3' terminal del cebador codifica X y en el que el cuarto nucleótido desde el extremo 3' terminal contiene una base desapareada, en el que, si X está presente, el cebador se hibrida a X, y en el que la reacción de amplificación comprende además (i) al menos un bloqueador de ácido peptidonucleico (PNA), en el que al menos un bloqueador de PNA bloquea la amplificación desde la diana de tipo salvaje, y (ii) uno o más de otros bloqueadores de PNA, en el que uno o más de otros bloqueadores de PNA impiden la amplificación de un cebador a partir de una diana no deseada mediante la unión de la diana no deseada, en el que, si la muestra de ácido nucleico es ARNm, la etapa (a) comprende además obtener ADNc transcrito de forma inversa a partir del ARNm o transcribir de forma inversa ADNc a partir del ARNm antes de realizar la reacción de amplificación,

después de lo cual, si X está presente, la reacción de amplificación produce un producto de amplificación que comprende X, y

(b) detectar el producto de amplificación que comprende X,

en el que, si X es codificado por más de un codón, la reacción de amplificación comprende un cebador para cada codón,

después de lo cual, se detecta la mutación en el codón del gen en la muestra de ácido nucleico de un ser humano.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2013/042817.

Solicitante: Abbott Molecular Inc.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 1300 East Touhy Avenue Des Plaines, IL 60018 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: ERICKSON, BRIAN, J., HUANG,SHIHAI X, SU,HONG.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/6858
  • C12Q1/6886

PDF original: ES-2751371_T3.pdf

 

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