Procedimiento y dispositivo para la detección rápida de secuencias nucleotídicas amplificadas.

Un método de amplificación por PCR y de detección de al menos una secuencia nucleotídica diana eventualmente presente en una muestra biológica,

preferentemente una muestra extraída de un individuo, comprendiendo dicho método las etapas consecutivas siguientes:

a) proporcionar un dispositivo que comprende:

- un canal (3) que tiene una sección comprendida entre alrededor de 0,01 mm y alrededor de 10 mm,

- una tira reactiva (4) en comunicación fluídica con dicho canal (3), comprendiendo dicha tira reactiva (4) o bien unas primeras sondas complementarias y específicas de al menos una primera parte de secuencia de dicha o de dichas secuencias nucleotídicas diana amplificadas, o bien al menos una primera molécula de un par de moléculas diferentes y complementarias, apta para fijar una segunda molécula diferente de dicho par, estando dicha segunda molécula fijada a la primera parte de secuencia de la o las secuencias nucleotídicas diana amplificadas;

- medios para generar al menos tres zonas de temperaturas diferentes y constantes, estando dos (al menos tres) zonas situadas en sitios diferentes del canal (3) y estando la tercera (o cuarta) zona situada a nivel de la tira reactiva (4),

b) introducir en el canal (3) una solución que comprende la muestra, así como los reactivos de amplificación de la o de las secuencias nucleotídicas diana,

c) generar unas secuencias amplificadas y eventualmente marcadas de la o de las secuencias nucleotídicas diana haciendo circular la solución según un flujo dinámico constante en el canal (3),

d) poner en contacto dichas secuencias amplificadas con la tira reactiva (4), y

e) generar, por hibridación entre las primeras sondas y dichas secuencias amplificadas, un complejo que forma una señal de detección medible.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2013/063777.

Solicitante: CORIS BIOCONCEPT SPRL.

Nacionalidad solicitante: Bélgica.

Dirección: SCIENCE PARK CREALYS, RUE JEAN SONET 4A 5032 GEMBLOUX BELGICA.

Inventor/es: MERTENS,Pascal, LECLIPTEUX,Thierry, AVRAIN,LAETITIA, OTE,ISABELLE, SMEKENS,VALÉRIE.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • B01L3/00 SECCION B — TECNICAS INDUSTRIALES DIVERSAS; TRANSPORTES.B01 PROCEDIMIENTOS O APARATOS FISICOS O QUIMICOS EN GENERAL.B01L APARATOS DE LABORATORIO PARA LA QUIMICA O LA FISICA, DE USO GENERAL (aparatos de uso médico o farmacéutico A61; aparatos para aplicaciones industriales o aparatos de laboratorio cuya estructura y funciones son comparables a las de aparatos industriales similares, ver las clases relativas a los aparatos industriales, en particular las subclases B01 y C12; aparatos de separación o de destilación B01D; dispositivos de mezcla o de agitación B01F; atomizadores B05B; tamices, cribas B07B; tapones, capuchones B65D; manipulación de líquidos en general B67; bombas de vacío F04; sifones F04F 10/00; grifos, válvulas F16K; tubos, empalmes para tubos F16L; aparatos especialmente adaptados al estudio y análisis de materiales G01, particularmente G01N; aparatos eléctricos u ópticos, ver las subclases apropiadas en las secciones G y H). › Recipientes o utensilios para laboratorios, p. ej. cristalería de laboratorio (botellas B65D; equipos para enzimología o microbiología C12M 1/00 ); Cuentagotas (recipientes para volumetría G01F).
  • B01L7/00 B01L […] › Aparatos de calentamiento o de enfriamiento (evaporadores B01D 1/00; secado de gases o vapores, p. ej. desecadores, B01D 53/26; autoclaves B01J 3/04; hornos de secado F26B; altos hornos, hornos F27 ); Dispositivos de aislamiento térmico.
  • C12Q1/68 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
  • G01N21/64 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 21/00 Investigación o análisis de los materiales por la utilización de medios ópticos, es decir, utilizando rayos infrarrojos, visibles o ultravioletas (G01N 3/00 - G01N 19/00 tienen prioridad). › Fluorescencia; Fosforescencia.

PDF original: ES-2650367_T3.pdf

 

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