Planta resistente a los insectos.

Una planta de Capsicum annuum cultivada que es resistente de manera intermedia a Bemisia,

en la que dichaplanta contiene un genoma que comprende un "QTL" que contribuye a la resistencia a Bemisia, QTL que estásituado en el cromosoma 3 y en la que dicho QTL está unido genéticamente a al menos un locus marcador, enparticular a al menos dos locus marcadores, más en particular a al menos tres locus marcadores e incluso más enparticular a al menos cuatro locus marcadores, pero especialmente a al menos cinco y hasta seis locus marcadores,locus marcadores que están en el cromosoma 3 y se co-segregan con el rasgo de resistencia a Bemisia y se puedenidentificar por un cebador oligonucleótido de PCR o un par de cebadores oligonucleótidos de PCR seleccionados delgrupo de par de cebadores 1 representado por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 1 y un cebador ensentido inverso de la SEC ID Nº 2, que identifican el locus marcador 1; par de cebadores 2 representado por uncebador en sentido directo de la SEC ID Nº 3 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 4, que identifican ellocus marcador 2; par de cebadores 3 representado por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 5 y uncebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 6, que identifican el locus marcador 3; par de cebadores 4 representadopor un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 7 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 8, queidentifican el locus marcador 4; par de cebadores 5 representado por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº9 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 10, que identifican el locus marcador 5 y par de cebadores 6representado por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 11 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº12, que identifican el locus marcador 6.

Planta resistente a los insectos La presente invención se refiere a nuevos pimenteros resistentes a los insectos y a semillas y frutos de dichas plantas. La presente invención también se refiere a métodos para preparar y usar dichas plantas y sus frutos. La invención además se refiere a marcadores y el uso de los mismos en reproducción favorecida por marcadores y para identificar el rasgo de resistencia a los insectos.

Los pimientos son un cultivo importante en el mundo con un valor comercial estimado de aproximadamente 500 millones de dólares al año. Los pimientos son Solanaceas del género Capsicum, que incluye las especies Capsicum annuum, Capsicum frutescens y Capsicum chinense. Los pimientos comerciales son diploides con n = 12 cromosomas. Los pimientos se cultivan y se usan en todo el mundo como pimientos tales como el pimiento o como guindillas picantes, jalapeños y pimientos TABASCO® o como una fuente de polvos secos de diversos colores tales como pimentón dulce. Los tipos de pimientos cultivados se pueden diferenciar por acritud, forma del fruto, color y tamaño (véase por ejemplo la Patente de EE.UU. 6.498.287) .

Los frutos de la planta del pimiento, también referidos comúnmente como "pimientos", son muy perecederos. Son propensos a perder agua y secarse, que los hace poco atractivos para los consumidores. Los pimenteros son también huéspedes para una serie de enfermedades. Estas enfermedades reducen el rendimiento de los cultivos, pero también afectan al aspecto de los frutos, que los hace no comercializables. En particular, los insectos ocasionan daños sustanciales a los cultivos, dando como resultado sustanciales pérdidas comerciales. En algunos casos, los insectos afectan directamente a las plantas o los frutos, en otros casos actúan como un vector para los virus de las plantas. Normalmente el daño de los insectos reduce el crecimiento de la planta pero comúnmente no destruye la planta. Se puede usar el control químico y la rotación de cultivos para reducir el daño ocasionado por los insectos, pero estas estrategias son caras y a veces inoportunas.

Entre las plagas de insectos que afectan a los pimientos, la mosca blanca Bemisia tabaci (Hemiptera: Aleyrodidae) y diversas especies de trips tales como el Trips Occidental de las Flores: Frankliniella occidentalis, el Trips de la Cebolla: Thrips tabaci, el Trips de Chile Scirtothrips dorsalis y el Trips del Melón Thrips palmi son en particular devastadores.

Hay aproximadamente 5.000 especies descritas de trips (insectos del Órden Thysanoptera) . Las especies que se alimentan de plantas superiores se dan principalmente en la Familia Thripidae. Esta familia incluye las especies de plagas importantes incluyendo plagas graves de cultivos ornamentales, vegetales y frutales en el campo e invernadero. La alimentación y la puesta de huevos por los trips dan como resultado deformación, decoloración, plateado y bronceado de hojas y frutos de vegetales reduciendo su valor de mercado. Algunas especies de trips son vectores de bunyavirus (familia Bunyaviridae, género Tospovirus, especie tipo marchitamiento moteado del tomate) . Anualmente tienen lugar epidemias graves sobre los alimentos, fibra y cultivos ornamentales en regiones tropicales y subtropicales en el mundo.

El Trips Occidental de las Flores (Frankliniella occidentalis) es una plaga de insectos oportunista en invernaderos que afecta gravemente a multitud de cultivos. La Frankliniella occidentalis se extendió casi mundialmente durante las dos últimas décadas. Esta especie de trips es muy dañina y difícil de controlar. Se multiplica fácilmente sobre el pimiento y crea daños físicos en la planta, las flores y los frutos desde la fase temprana en el vivero hasta el final del cultivo. Las larvas y los adultos se alimentan en las células epidérmicas de hojas, capullos, flores y frutos. Afectan a la piel del fruto y deprecian el valor comercial. Los cultivos de invernadero de alto valor tales como verduras son particularmente vulnerables a pérdidas económicas asociadas al daño por trips. El trips es también un vector eficaz de un virus devastador, el virus del Marchitamiento Moteado del Tomate (TSWv, por sus siglas en inglés) que crea grandes pérdidas a los productores. Las plantas infectadas presentan fuerte mosaico y necrosis en plantas y frutos.

El trips es difícil de controlar mediante productos químicos ya que el insecto ha desarrollado resistencia a varios insecticidas usados durante los últimos 15 años. En las condiciones del invernadero, el uso de predadores biológicos, con Orius en condiciones cálidas o Amblyseius en condiciones más frescas que mantienen un nivel bajo de trips en el cultivo, está ampliamente extendido pero no siempre es una práctica suficiente.

Para la mosca blanca, Bemisia tabaci, se han descrito al menos dos biotipos: el tipo B, idéntico a Bemisia argentifolii y el tipo Q.

El control de Bemisia y trips es difícil en particular, también debido al amplio intervalo de plantas huésped. Las especies Bemisia y trips atacan a una amplia variedad de cultivos de vegetales incluyendo: tomate, judías, pepinos, melones, melón amargo, capsicum, berenjena, calabaza, calabacita y calabacín. El Capsicum pertenece al cultivo más gravemente afectado.

Debido a los daños en planta y fruto y la transmisión de un virus devastador, hay una necesidad no satisfecha de estrategias convenientes y económicamente sostenibles para proteger los cultivos de pimiento de estas plagas. La resistencia de la planta huésped es una buena estrategia de control para Bemisia y trips. Es una alternativa compatible con el medio ambiente para el uso de pesticidas y puede aumentar la eficacia de las opciones de control

biológico y contribuir a programas de tratamiento de plagas integrados con éxito.

La presente invención estudia esta necesidad proporcionando pimenteros resistentes que sean menos atractivos para los insectos y/o capaces de resistir a la infestación y/o desarrollo de los insectos tal como, por ejemplo, puesta de huevos y/o desarrollo de crisálidas y estaría así protegido hasta un grado considerable de infestaciones de insectos, en particular de infestaciones de la mosca blanca Bemisia tabaci.

La presente invención proporciona una planta de Capsicum annuum cultivada que es resistente, en particular resistente de manera intermedia, a infestaciones por insectos de la familia Thripidae y/o el género Bemisia, pero especialmente a infestaciones por Bemisia tabaci.

La resistencia a infestaciones por Bemisia " o "planta resistente a Bemisia " se refiere a la capacidad de las plantas para resistir al ataque, infestación o colonización por el insecto. El nivel de resistencia presentada por una cierta planta se puede puntuar, por ejemplo, mediante un Ensayo de Resistencia a los Insectos normalizado, como se describe en el Ejemplo 2A en la presente memoria a continuación usando una escala de 1-9 para evaluar la importancia de la infestación.

En una realización, la invención proporciona una planta de Capsicum annuum cultivada que es resistente, en particular resistente de manera intermedia, a infestaciones por Bemisia, en la que dicha resistencia se puede evaluar en un ensayo de resistencia clásico, en particular un ensayo como se describe en el Ejemplo 2A a continuación, y en el que se obtiene una puntuación de la resistencia que no se desvía por más de 3 magnitudes, en particular por más de 2 magnitudes, pero especialmente por más de 1 magnitud de una puntuación que se puede obtener con una planta de Capsicum annuum de la estirpe 061M4387, simiente representativa de la que se deposita con el Nº de Acceso NCIMB 41428, cuando se valora en el mismo ensayo en una extensión estadísticamente significativa y en condiciones ambientales idénticas, en particular bajo la misma presión de los insectos.

En una realización, se proporciona una planta de Capsicum annuum resistente a Bemisia capaz de resistir al desarrollo de insectos, en particular la puesta de huevos y/o el desarrollo de crisálidas en la planta de manera que el número de crisálidas en las hojas de la planta determinado en un ensayo de resistencia estándar, en particular un ensayo como se describe en el Ejemplo 2A a continuación, no se desvíe por más de un factor de 20, en particular por más de un factor de 15, más en particular por más de un factor de 10, incluso más en particular por más de un factor de 5, pero especialmente por más de un factor de 2, del número de crisálidas que se puede obtener con una planta de Capsicum annuum de la estirpe 061M4387, simiente representativa de la que se deposita con el Nº de Acceso NCIMB 41428, cuando se valora en el mismo ensayo en una extensión estadísticamente significativa y en condiciones ambientales... [Seguir leyendo]

1. Una planta de Capsicum annuum cultivada que es resistente de manera intermedia a Bemisia, en la que dicha planta contiene un genoma que comprende un "QTL" que contribuye a la resistencia a Bemisia, QTL que está situado en el cromosoma 3 y en la que dicho QTL está unido genéticamente a al menos un locus marcador, en particular a al menos dos locus marcadores, más en particular a al menos tres locus marcadores e incluso más en particular a al menos cuatro locus marcadores, pero especialmente a al menos cinco y hasta seis locus marcadores, locus marcadores que están en el cromosoma 3 y se co-segregan con el rasgo de resistencia a Bemisia y se pueden identificar por un cebador oligonucleótido de PCR o un par de cebadores oligonucleótidos de PCR seleccionados del grupo de par de cebadores 1 representado por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 1 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 2, que identifican el locus marcador 1; par de cebadores 2 representado por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 3 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 4, que identifican el locus marcador 2; par de cebadores 3 representado por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 5 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 6, que identifican el locus marcador 3; par de cebadores 4 representado por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 7 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 8, que identifican el locus marcador 4; par de cebadores 5 representado por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 9 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 10, que identifican el locus marcador 5 y par de cebadores 6 representado por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 11 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 12, que identifican el locus marcador 6.

2. Una planta de Capsicum annuum cultivada según la reivindicación 1, en la que dicha planta contiene un genoma que comprende un segundo "QTL" que contribuye a la resistencia a Bemisia, QTL que está situado en el cromosoma 5 y en la que dicho QTL está unido genéticamente a al menos un locus marcador, en particular a al menos dos locus marcadores, en particular a al menos tres locus marcadores y en particular a al menos cuatro locus marcadores, en particular a al menos cinco locus marcadores, en particular a al menos seis locus marcadores y hasta siete locus marcadores, locus marcadores que están en el cromosoma 5 y se co-segregan con el rasgo de resistencia a Bemisia y se pueden identificar por cebador oligonucleótido PCR o un par de cebadores oligonucleótidos PCR seleccionados del grupo de par de cebadores 7 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 13 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 14, que identifican el locus marcador 7; par de cebadores 8 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 15 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 16, que identifican el locus marcador 8; par de cebadores 9 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 17 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 18, que identifican el locus marcador 9; par de cebadores 10 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 19 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 20, que identifican el locus marcador 10; par de cebadores 11 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 21 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 22, que identifican el locus marcador 11; par de cebadores 12 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 23 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 24, que identifican el locus marcador 12 y par de cebadores 13 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 25 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 26, que identifican el locus marcador 13.

3. Una planta de Capsicum annuum cultivada según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, que contiene un genoma que comprende al menos un locus de rasgos cuantitativos ("QTL") que contribuye a la resistencia a Bemisia, en la que dicho QTL se puede obtener de una planta donadora que tiene los antecedentes genéticos de la estirpe 061M4387, en particular de una planta que tiene los antecedentes genéticos o la arquitectura genética en el QTL de la estirpe 061M4387, pero especialmente de una planta de la estirpe 061M4387, simiente representativa de la que se deposita en NCIMB con el Nº de Acceso NCIMB 41428 o de una progenie o un ascendiente de la misma que comprende dicho QTL.

4. Una planta de Capsicum annuum cultivada según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que dicha planta comprende un alelo en dicho locus de rasgos cuantitativos ("QTL") asociado a la resistencia a Bemisia, en la que dicho alelo es definido por al menos un alelo marcador en al menos dicho locus marcador unido al QTL, alelo marcador que se caracteriza por el producto de multiplicación por PCR del respectivo cebador oligonucleótido o par cebador.

5. Simiente que se cultiva en una planta según cualquiera de las reivindicaciones predecentes.

6. Fruto de una planta según cualquiera de las reivindicaciones predecentes.

7. Uso de un QTL asociado a resistencia a Bemisia para conferir resistencia a Bemisia en una planta de Capsicum annuum que carece de dicho QTL, en la que dicho QTL se puede obtener de la estirpe 061M4387, simiente representativa de la que se deposita con el Nº de Acceso NCIMB 41428 y en la que dicho QTL se puede identificar en una reacción PCR por un par de cebadores oligonucleótidos PCR, como se desvela en la SEC ID Nº 1-12 o SEC ID Nº 13-26.

8. Un método para producir fruto de planta de pimiento que comprende:

a) cultivar una planta según cualquiera de las reivindicaciones predecentes;

b) permitir que dicha planta de fruto y

c) recoger fruto de dicha planta.

9. Un método para producir simiente de planta de pimiento que comprende:

a) cultivar una planta de Capsicum annuum según cualquiera de las reivindicaciones predecentes;

b) recoger fruto de dicha planta y

c) extraer simiente de dicho fruto.

10. Un método para identificar en una planta de Capsicum annuum un locus de rasgos cuantitativos ("QTL") que contribuye a la resistencia a Bemisia que comprende usar en una reacción PCR:

a) un cebador oligonucleótido PCR o un par de cebadores oligonucleótidos PCR seleccionado del grupo de par de cebadores 1 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 1 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 2, que identifican el locus marcador 1; par de cebadores 2 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 3 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 4, que identifican el locus marcador 2; par de cebadores 3 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 5 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 6, que identifican el locus marcador 3; par de cebadores 4 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 7 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 8, que identifican el locus marcador 4; par de cebadores 5 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 9 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 10, que identifican el locus marcador 5 y par de cebadores 6 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 11 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 12, que identifican el locus marcador 6 o cualquier otro cebador o par de cebadores que identifique un locus marcador en el cromosoma 3 que está correlacionado estadísticamente con el rasgo de resistencia a Bemisia y/o b) un cebador oligonucleótido PCR o un par de cebadores oligonucleótidos PCR seleccionado del grupo de par de cebadores 7 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 13 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 14, que identifican el locus marcador 7; par de cebadores 8 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 15 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 16, que identifican el locus marcador 8; par de cebadores 9 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 17 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 18, que identifican el locus marcador 9; par de cebadores 10 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 19 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 20, que identifican el locus marcador 10; par de cebadores 11 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 21 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 22, que identifican el locus marcador 11; par de cebadores 12 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 23 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 24, que identifican el locus marcador 12 y par de cebadores 13 representados por un cebador en sentido directo de la SEC ID Nº 25 y un cebador en sentido inverso de la SEC ID Nº 26, que identifican el locus marcador 13

o cualquier otro cebador o par de cebadores que identifique un locus marcador en el cromosoma 5 que está correlacionado estadísticamente con el rasgo de resistencia a Bemisia.

11. Una planta de Capsicum annuum cultivada que comprende un genoma que comprende al menos un QTL que contribuye a la resistencia a Bemisia, QTL que está situado en el cromosoma 3, en la que dicho al menos un QTL se puede identificar por un marcador molecular que está en desequilibrio de unión y/o unido a y/o situado en la región QTL, así como un marcador que representa las mutaciones causales reales subyacentes al QTL y así presenta correlación estadística con el rasgo fenotípico, marcador que se puede desarrollar usando los cebadores oligonucleótidos como se desvela en la SEC ID Nº 1-12.

12. Una planta de Capsicum annuum cultivada que comprende un genoma que comprende dos QTL que contribuyen a la resistencia a Bemisia, QTL que se sitúan en el cromosoma 3 y 5, en la que dichos dos QTL se pueden identificar por marcadores moleculares que están en desequilibrio de unión y/o unidos a y/o situados en la región QTL, así como un marcador que representa las mutaciones causales reales subyacentes al QTL y así presenta correlación estadística con el rasgo fenotípico, marcador que se puede desarrollar usando los cebadores oligonucleótidos como se desvela en la SEC ID Nº 1-12 y las SEC ID Nos.13 a 26, respectivamente.