Microorganismo que reduce la cantidad de nitrosamina y método para reducir la cantidad de nitrosamina usando el microorganismo.

Un método para reducir el contenido de TSNA en la hoja de tabaco,

caracterizado por comprender tratamientode la hoja de tabaco con un microorganismo que es capaz de reducir TSNA y que se selecciona del grupo queconsiste en Sphingomonas paucimobilis cepa LG5 y Pseudomonas fluorescens cepa LG38.

Microorganismo que reduce la cantidad de nitrosamina y método para reducir la cantidad de nitrosamina usando el microorganismo

Campo técnico La presente invención se refiere a un microorganismo que degrada nitrosaminas formadas en hojas de tabaco durante los procesos de conservación y almacenamiento de las hojas de tabaco, y un método para reducir nitrosaminas formadas en las hojas de tabaco durante el proceso de curado y/o proceso de almacenamiento de las mismas, usando el microorganismo.

Antecedentes de la técnica Las nitrosaminas contenidas en hojas de tabaco (nitrosaminas específicas de tabaco, que se denominarán “TSNA” en lo sucesivo en este documento) , no están presentes en las hojas de tabaco inmediatamente después de la cosecha (es decir, hojas verdes) , sino que se forman durante el proceso de curado y proceso de almacenamiento a continuación por una reacción entre alcaloides y nitrito contenidos en las hojas de tabaco. Este nitrito se forma por un microorganismo que está presente en la superficie de la hoja de tabaco y que tiene la capacidad para reducir nitrato.

Las TSNA principales formadas en el proceso de curado y el proceso de almacenamiento posterior son N'nitrosonornicotina (que se denominará “NNN” en lo sucesivo en este documento) , 4- (N-nitrosometilamino) -1- (3piridil) -1-butanona (que se denominará “NNK” en lo sucesivo en este documento) , N'-nitrosoanatabina (que se denominará “NAT” en lo sucesivo en este documento) , N'-nitrosoanabasina (que se denominará “NAB” en lo sucesivo en este documento) y similares.

Los ejemplos del método que se ha conocido convencionalmente como un método para reducir el contenido de TSNA en hojas de tabaco incluyen: (1) un método para suprimir la formación de TSNA; y (2) un método para retirar TSNA que se ha formado.

Los ejemplos del método para suprimir la formación de TSNA incluyen: un método para reducir el contenido de alcaloides en hojas de tabaco reduciendo la cantidad de fertilizante nitrogenado; un método para reducir TSNA formada durante el proceso de curado, adoptando un tipo de secadero con calentamiento indirecto en lugar de tipo de secadero con calentamiento directo (este método se emplea principalmente para tabaco curado al aire caliente) ; un método para cultivar una nueva variedad de tabaco que tenga menos contenido en alcaloides, basándose dicho método en el progreso de la tecnología de cultivo; y similares.

Además, se ha presentado recientemente un método en el que la formación de TSNA se suprime por irradiación con microondas (Publicación Nacional de PCT Nº 2001-503247) . Sin embargo, dicho secado y curado rápido provocado por el tratamiento anteriormente mencionado con microondas da como resultado un cambio insuficiente en el tipo de componentes de las hojas de tabaco, cambio que se efectuaría de forma satisfactoria en el proceso de curado convencional. Por lo tanto, las hojas de tabaco resultantes que se han curado más rápidamente que por el método convencional muestran escaso aroma y sabor cuando se fuman.

En el caso del método de retirada de TSNA (formada de este modo) de las hojas de tabaco, el número de ejemplos presentados del mismo es menor que con el método de suprimir la formación de TSNA. Como uno de estos ejemplos, se conoce un método en el que se retira TSNA de las hojas de tabaco por extracción supercrítica (documento WO 01/65954) . Sin embargo, este método no se ha aplicado al uso práctico por causa de los costes del mismo.

Debido a las circunstancias anteriormente descritas, hay una demanda de nuevos métodos para reducir el contenido de TSNA que se sabe que se forman durante los procesos de curado y almacenamiento de las hojas de tabaco.

Además, hay una demanda de hojas de tabaco, como la materia prima de los cigarrillos, que tengan relativamente menor contenido de TSNA y mantengan un buen aroma y sabor satisfactorios para los consumidores.

En consecuencia, el objeto de la presente invención es proporcionar un método que permita reducir el contenido de TSNA formadas durante los procesos de curado y almacenamiento convencionales.

Adicionalmente, ya se sabe que un microorganismo que pertenezca al género Aspergillus, que es un hongo filamentoso aislado de fuente de soja no refinada, degrada nitrosaminas (Publicación de Solicitud de Patente Japonesa Nº 10-276681) . Sin embargo, se ha indicado que los microorganismos que pertenecen al género Aspergillus necesitan alto contenido de humedad para su supervivencia, pudiendo provocar dicho alto contenido en humedad efectos adversos en la calidad de las hojas de tabaco, especialmente en el sabor y aroma de las mismas. Por lo tanto, el uso de dicho microorganismo como se ha descrito anteriormente en el tratamiento de hojas de tabaco

puede provocar un problema en la calidad del tabaco.

El documento US-A-4 556 073 describe un método para el tratamiento del tabaco con microorganismos para reducir el contenido de nitrato del tabaco. Estos microorganismos preferidos son, Micrococcus denitrificans y, como realización alternativa, Pseudomonas fluorescens.

Tobacco International, vol. 188, Nº 18, 1986, páginas 48-51 describe que los desnitrificantes tales como Pseudomonas fluorescens son eficaces en la retirada de NO-3 y NO-2 en condiciones experimentales y sugiere que tales desnitrificantes podrían ser eficaces en la retirada tanto de NO-3 como de NO-2 en el tabaco.

Divulgación de la invención De acuerdo con un primer aspecto de la presente invención, se proporciona un método para reducir el contenido de TSNA en hojas de tabaco, caracterizado por comprender tratamiento de hojas de tabaco con un microorganismo seleccionado del grupo que consiste en Sphingomonas paucimobilis cepa LG5 y Pseudomonas fluorescens cepa LG38.

De acuerdo con un segundo aspecto de la presente invención, se proporciona un Sphingomonas paucimobilis cepa LG5 (FERM BP-7830) que es capaz de reducir el contenido de TSNA en hojas de tabaco.

De acuerdo con un tercer aspecto de la presente invención, se proporciona un Pseudomonas fluorescens cepa LG38 (FERM BP-7831) que es capaz de reducir el contenido de TSNA en hojas de tabaco.

Mejor modo para llevar a cabo la invención Como resultado del estudio y análisis del proceso de formación de TSNA durante el curado y almacenamiento de hojas de tabaco, los inventores de la presente invención han descubierto que existe un microorganismo que puede degradar TSNA, entre los microorganismos presentes en la hoja de tabaco, completando de este modo la presente invención.

Mientras los inventores de la presente invención analizaban el proceso de formación de TSNA en hojas de tabaco que se estaban curando, aislaron un microorganismo que puede degradar las TSNA formadas, de los microorganismos presentes en las hojas de tabaco. Además, los inventores de la presente invención descubrieron que el contenido de TSNA en las hojas de tabaco puede reducirse tratando, con el microorganismo, las hojas de tabaco que se están curando y/o las hojas de tabaco que van a almacenarse después del proceso de curado.

Los dos tipos de microorganismos que muestran actividad de degradación especialmente alta entre los microorganismos aislados (recogidos) se han identificado basándose en las características bacteriológicas de los mismos, como Sphingomonas paucimobilis y Pseudomonas fluorescens, respectivamente. Los inventores de la presente invención nombraron la cepa de Sphingomonas paucimobilis “LG5” (que se denominará “LG5” o “cepa LG5” en lo sucesivo en este documento) y la cepa de Pseudomonas fluorescens “LG38” (que se denominará “LG38”

o “cepa LG38” en lo sucesivo en el este documento) . LG5 se ha depositado con el número de acceso FERM BP7830 y LG38 se ha depositado con el número de acceso FERM BP-7831, respectivamente, el 18 de diciembre de 2001, en el Depositario de Organismos de Patente Internacional (IPOD) , Instituto Nacional de Ciencia y Tecnología Industrial Avanzada (AIST Tsukuba Central 6, 1-1 Higashi 1-chome, Tsukuba-shi, Ibaraki-ken, Japón) .

Estos microorganismos LG5 y LG38 reducen eficazmente TSNA en hojas de tabaco sin provocar ningún efecto adverso en la calidad de las hojas de tabaco que se están curando y/o las hojas de tabaco en almacenamiento.

Además, de acuerdo con el método de la presente invención, puede conseguirse reducción del contenido de TSNA simplemente tratando la hoja de tabaco con el microorganismo, sin cambiar el método convencional de curado. Por lo tanto, la calidad, aroma y sabor de la presente hoja de tabaco puede mantenerse de forma fiable.

La actividad... [Seguir leyendo]

1. Un método para reducir el contenido de TSNA en la hoja de tabaco, caracterizado por comprender tratamiento de la hoja de tabaco con un microorganismo que es capaz de reducir TSNA y que se selecciona del grupo que consiste en Sphingomonas paucimobilis cepa LG5 y Pseudomonas fluorescens cepa LG38.

2. El método de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque el tratamiento de la hoja de tabaco con un microorganismo que es capaz de reducir TSNA se lleva a cabo inmediatamente antes de la cosecha de hoja de tabaco y/o en un periodo desde el momento en el que se inicia un proceso de curado al momento en el que se completa un proceso de almacenamiento.

3. El método de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque el tratamiento de la hoja de tabaco con un microorganismo que es capaz de reducir TSNA se lleva a cabo pulverizando o aplicando por revestimiento células bacterianas del microorganismo en la hoja de tabaco en un estado de suspensión o en un estado seco.

4. El método de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque dicha TSNA es al menos un tipo de TSNA seleccionada del grupo que consiste en N'-nitrosonornicotina, 4- (N-nitrosometilamino) -1- (3-piridil) -1-butanona, N'nitrosoanatabina y N'-nitrosoanabasina.

5. El método para reducir el contenido de TSNA en la hoja de tabaco de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizado porque la hoja de tabaco se obtiene de una variedad de tabaco seleccionada del grupo que consiste en variedad doméstica japonesa y variedad Burley.

6. Cepa LG5 de Sphingomonas paucimobilis (FERM BP-7830) que es capaz de reducir el contenido de TSNA en la hoja de tabaco.

7. Cepa LG38 de Pseudomonas fluorescens (FERM BP-7831) que es capaz de reducir el contenido de TSNA en la hoja de tabaco.