Kits, formulaciones y soluciones que tienen cantidades de agentes de visualización enzimaticamente permisivos y usos de las mismas.

Un kit de adhesivo de fibrina para preparar una formulación de adhesivo de fibrina para su aplicación a una superficie de una parte del cuerpo de un paciente,

comprendiendo dicho kit:

un primer componente separado necesario para formar la formulación de adhesivo de fibrina, 5 comprendiendo el primer componente separado una solución de fibrinógeno,

un segundo componente separado necesario para formar la formulación de adhesivo de fibrina, comprendiendo el segundo componente separado una solución de trombina que es capaz de formar fibrina cuando reacciona con el fibrinógeno, en el que dicha solución de trombina comprende adicionalmente un agente de visualización,

caracterizado porque:

(a) dicho agente de visualización es azul de metileno presente en dicha solución de trombina en un intervalo de concentración comprendido entre el 0, 01 y el 0, 05%, y dicha solución de trombina teñida con azul de metileno está protegida de la luz; o

(b) dicho agente de visualización es índigo carmín presente en dicha solución de trombina en un 15 intervalo de concentración comprendido entre el 0, 01% y el 0, 02%.

Kits, formulaciones y soluciones que tienen cantidades de agentes de visualización enzimáticamente permisivos y usos de las mismas

Campo de la invención

La invención se refiere a un kit de adhesivo de fibrina para preparar una formulación de adhesivo de fibrina que comprende una concentración enzimáticamente permisiva de un agente de visualización.

Antecedentes de la invención

El adhesivo de fibrina es, por lo general, un producto de la sangre obtenido a partir de fuentes comerciales o determinados centros regionales de transfusión de sangre. Los componentes que se utilizan comúnmente en la preparación de adhesivos de fibrina son fibrinógeno, trombina, factor VIII, Factor XIII, fibronectina, vitronectina y factor de von Willebrand (vWF) .

El adhesivo de fibrina se forma por una reacción enzimática que implica, entre otras cosas, al fibrinógeno, a la trombina y al Factor XIII. La trombina convierte el fibrinógeno en fibrina por acción enzimática a una velocidad determinada por la concentración de trombina. El Factor XIII, se encuentra presente por lo general en el componente de fibrinógeno del adhesivo y es una enzima del sistema de coagulación de la sangre que reticula y estabiliza el coágulo de fibrina. Este proceso elude la mayoría de las etapas de la coagulación normal e imita su última fase. Determinados fabricantes añaden agentes antiproteolíticos a la formulación de adhesivo de fibrina (como se describe en el documento WO-A-93/05822) o eliminan específicamente el plasminógeno con el fin de detener o retrasar la fibrinólisis (como se describe en los documentos US-B-5.792.835 y US-B-7.125.569) .

Se han notificado numerosos usos del adhesivo de fibrina en diversos campos de la medicina, incluyendo el uso como sellador, agente hemostático, antiadherente y en una variedad de cirugías laparoscópicas. Sin embargo, los adhesivos de fibrina dan como resultado una película transparente que puede distinguirse en la cirugía abierta cuando la iluminación es óptima, pero que podría pasar inadvertida en determinadas cirugías laparoscópicas. Por lo tanto, resultaría ventajoso utilizar un adhesivo de fibrina teñido que permita al usuario evaluar el espesor del material aplicado y mejorar su visibilidad durante la cirugía.

En el documento US-B-7.009.034 se desvela una composición adecuada para recubrir un tejido de un paciente, que comprende polímeros, "reticuladores" de molécula pequeña que permanecen en el polímero reticulado y un agente de visualización. Los polímeros desvelados pueden ser sintéticos o naturales. Los polímeros naturales mencionados en el documento US-B-7.009.034 son colágeno, fibrinógeno, albúmina y fibrina, polisacáridos, o glicosaminoglicanos. En la descripción del documento US-B-7.009.034 no se dice nada acerca del Factor XIII y/o la trombina. Los Ejemplos demuestran que la adición de un agente de visualización a la composición del documento US-B-7.009.034 en una alta concentración del 1, 25% no provocaba ningún cambio inaceptable en los tiempos de gelificación. De acuerdo con la descripción, puede utilizarse en la mezcla final una concentración superior al 1, 25%, hasta el límite de solubilidad del agente de visualización.

Las siguientes solicitudes de patente no desvelan o sugieren ningún efecto no deseado de la adición de colorante sobre la actividad de la trombina.

En el documento US-A-2003/0077272 se desvelan geles proteínicos que tienen agentes de visualización. Los geles desvelados comprenden fibrinógeno, trombina y "reticuladores" de molécula pequeña, que permanecen en el polímero reticulado. En algunos ejemplos se mencionan posibles preparaciones de una composición de fibrinógeno y Factor XIII, que utiliza hidrogeles y la formación de adhesivo de fibrina por la trombina. En estos ejemplos se desvela la adición de un colorante fluorescente a la solución de fibrinógeno a una concentración del 0, 0002 al 0, 02% y no se dice nada sobre la concentración final de fibrina en el adhesivo después de la mezcla del fibrinógeno con la solución de trombina.

En el documento US-A-2005/0049178 se desvela un agente para la oclusión de los vasos sanguíneos que comprende un colorante fisiológico seguro. El colorante permite teñir los vasos sanguíneos embolizados. Un agente preferente es una solución de fibrinógeno líquido que puede utilizarse en cooperación con una preparación de trombina líquida y Factor XIII. En la solicitud de patente no se desvela ninguna concentración concreta de colorante.

En el documento JP-A-2002104996 se desvela una composición hemostática que contiene un principio activo, tal como trombina, y una materia colorante que puede evitar un mal uso durante el tratamiento médico, es decir, la confusión entre las aplicaciones tópicas y las inyecciones. El colorante se encuentra presente en la composición en un amplio intervalo del 0, 0001 al 1%.

En el documento WO-A-91/04073 se desvela una terapia fotodinámica que utiliza un material que absorbe energía tal como un colorante y un agente de soldadura tal como fibrinógeno o adhesivo de fibrina para conseguir la soldadura de un tejido. De acuerdo con la invención, el colorante se considera un principio químicamente activo y la soldadura sólo se produce cuando se transmite una cantidad suficiente de energía al material que absorbe energía utilizando una fuente de energía tal como un láser.

El documento US-A-5.292.362 se refiere a una composición que incluye por lo menos un péptido natural o sintético y por lo menos un material de soporte que puede activarse mediante energía para formar una unión o recubrimiento. El fibrinógeno y la trombina se mencionan entre muchos péptidos que pueden emplearse como primer componente de la composición. El segundo componente contribuye con el primer componente produciendo un mayor grado de interrelación entre las moléculas del primer componente. De acuerdo con la descripción, la composición puede incluir también cromóforos endógenos o exógenos. Los colorantes se encuentran presentes en la composición en un amplio intervalo comprendido entre aproximadamente el 0, 01% en peso y el 50% en peso en base al peso total de la composición. En el documento WO 97/15188 se desvela un sellador biológico reforzado que comprende una composición de fibrinógeno y una composición de trombina, que puede comprender opcionalmente una sustancia indicadora coloreada.

En el documento WO 03/047530 se desvelan selladores de fibrina que pueden comprender colorantes en una cantidad del 0, 01% en peso al 50% en peso.

Sumario de la invención

Los adhesivos de fibrina se utilizan cada vez más en la cirugía para reducir el sangrado y las adherencias, para sellar o rellenar superficies y/o para mejorar la cicatrización de heridas. Las formulaciones de adhesivo de fibrina modernas son incoloras; por lo tanto la aplicación de la preparación en el punto de exudación sigue siendo difícil de controlar. La adición de un agente de visualización mejora las cualidades de aplicación diana del adhesivo de fibrina, por ejemplo, simplifica la localización de la zona de aplicación, permite al usuario evaluar el espesor del material aplicado y mejora la visibilidad del material aplicado. Sin embargo, se descubrió de acuerdo con la presente invención, que la adición de mayores concentraciones de los agentes de visualización a la formulación de adhesivo de fibrina influye en la actividad de la trombina.

Además, se descubrió de acuerdo con la invención, que diferentes agentes de visualización influían manera diferente en la actividad de coagulación de la trombina o en la formación de coágulos.

La presente invención resuelve este problema ya que el agente de visualización se añade a una concentración que es permisiva para la actividad de la trombina o de cualquier otra enzima capaz de formar fibrina cuando reacciona con el fibrinógeno.

Ventajosamente, de acuerdo con la invención, el agente de visualización se añade al adhesivo de fibrina o a un componente del mismo a una concentración que es lo suficientemente baja como para ser enzimáticamente permisiva pero que es suficiente para teñir claramente el sitio de aplicación de manera que pueda localizarse el área, pueda evaluarse el espesor del material aplicado y/o pueda distinguirse el material aplicado.

La invención proporciona un kit de adhesivo de fibrina para preparar una formulación de adhesivo de fibrina para su aplicación a una superficie de una parte del cuerpo de un paciente, como se define en la reivindicación 1.

La enzima proteolítica de la invención es la trombina.

El kit puede comprender adicionalmente un catalizador capaz de inducir la reticulación... [Seguir leyendo]

1. Un kit de adhesivo de fibrina para preparar una formulación de adhesivo de fibrina para su aplicación a una superficie de una parte del cuerpo de un paciente, comprendiendo dicho kit:

un primer componente separado necesario para formar la formulación de adhesivo de fibrina, 5 comprendiendo el primer componente separado una solución de fibrinógeno,

un segundo componente separado necesario para formar la formulación de adhesivo de fibrina, comprendiendo el segundo componente separado una solución de trombina que es capaz de formar fibrina cuando reacciona con el fibrinógeno, en el que dicha solución de trombina comprende adicionalmente un agente de visualización,

caracterizado porque:

(a) dicho agente de visualización es azul de metileno presente en dicha solución de trombina en un intervalo de concentración comprendido entre el 0, 01 y el 0, 05%, y dicha solución de trombina teñida con azul de metileno está protegida de la luz; o

(b) dicho agente de visualización es índigo carmín presente en dicha solución de trombina en un 15 intervalo de concentración comprendido entre el 0, 01% y el 0, 02%.

2. El kit según la reivindicación 1, que comprende adicionalmente un catalizador capaz de inducir la reticulación de la fibrina.

3. El kit según la reivindicación 1 ó 2, en el que el catalizador es una transglutaminasa.

4. El kit según la reivindicación 3, en el que la transglutaminasa es el Factor XIII.

5. El kit según la reivindicación 4, en el que el Factor XIII está incorporado en la solución de fibrinógeno.