Composición para su uso en el tratamiento de angiogénesis ocular que comprende:

una cantidad efectiva deARN de interferencia que tiene una longitud de 19 a 49 nucleótidos y un vehículo farmacéuticamente aceptable,comprendiendo dicho ARN de interferencia:

una región de al menos 13 nucleótidos contiguos que tiene al menos complementariedad de secuencia al 90% para, o al menos identidad de secuencia al 90 % con, los penúltimos 13 nucleótidos del extremo 3' de unARNm correspondiente a una cualquiera de SEC ID N.º: 2 y SEC ID N.º: 8-SEC ID N.º: 40,en la que de este modo se trata angiogénesis ocular.

Inhibición de IGF-1R mediada por ARNi para tratamiento de angiogénesis ocular

Campo de la invención

La presente invención se refiere al campo de las composiciones de ARN de interferencia para inhibición de la expresión del receptor del factor de crecimiento 1 similar a la insulina (IGF-1R) , la proteína codificada por ARNm de IGF1R, en angiogénesis ocular, incluyendo aquellos cambios celulares resultantes de la interacción del factor de crecimiento 1 similar a insulina (IGF-1) y IGF-1R que conducen directa o indirectamente a neovascularización ocular, edema retinal, retinopatía diabética, secuela asociada con isquemia retinal, neovascularización del segmento posterior y glaucoma neovascular, por ejemplo.

Antecedentes de la invención

La retinopatía diabética (DR) es una enfermedad del ojo que se desarrolla en la diabetes debido a cambios en las células que forran los vasos sanguíneos, es decir el endotelio microvascular retiniano. Durante la diabetes mellitus, la hiperglucemia puede causar daño en varias formas. Por ejemplo, la glucosa, o un metabolito de la glucosa, se une a los grupos amino de proteínas, conduciendo a daño tisular. Además, la glucosa en exceso entra en la ruta del poliol dando como resultado acumulaciones de sorbitol. El sorbitol no se puede metabolizar por las células de la retina y puede contribuir a alta presión osmótica intracelular, edema intracelular, difusión dañada, hipoxia tisular, daño celular capilar y debilitamiento capilar. La retinopatía diabética implica engrosamiento de membranas basales capilares que pueden a su vez evitar que los pericitos, el tipo celular perivascular predominante en capilares retinales, entren en contacto con las células endoteliales. La muerte de los pericitos y las células endoteliales tiene lugar a través de un mecanismo apoptótico durante la retinopatía diabética, donde la pérdida de pericitos incrementa probablemente la permeabilidad de los capilares y conduce a la rotura de la barrera sangre-retina y a la desregulación de flujo sanguíneo. Los capilares debilitados conducen a formación de aneurisma y a pérdida adicional. Estos efectos de la hiperglucemia pueden también dañar funciones neuronales en la retina. DR está asociada con microaneurismas retinianos, hemorragias, exudados y retinitis proliferans, es decir, crecimiento de tejidos neurovasculares y conectivos masivo sobre la superficie interna de la retina. La retinopatía diabética puede ser del tipo de los antecedentes, progresivamente caracterizado por microaneurismas; hemorragias puntiformes intrarretinales; exudados cerosos, amarillos; manchas algodonosas; y edema macular. Esto es una fase temprana de retinopatía diabética llamada retinopatía diabética no proliferativa.

El documento WO 03/100059 revela ARNip y reactivos antisentido capaces de bloquear la expresión del receptor IGF1R. Los reactivos se sugieren para usar como inhibidor de crecimiento tumoral en condiciones malignas tales como diferentes tipos de cáncer. Bohula y cols., J.BioLChem., vol. 278 (2003) , páginas 15991-15997 revelan ARNip y su uso en la regulación de la proliferación de células tumorales. Sohail y cols., Nucleic Acid Research (2003) , n.º: 7 e38 describe ARNip como reactivos de interferencia de ARN poderosos para probarse en células de cáncer de mama humano. El documento US 2004/0086860 enseña procedimientos para elaborar dupléx de ARN y ARN de cadena simple. Smith y cols., Nature Medicine, diciembre de 1999, 1390-1394 describen experimentos relativos a la regulación de neovascularización retinal dependiente de factores de crecimiento endotelial vascular por receptor de decrecimiento 1 similar a la insulina en la que se ha probado el efecto de JB3. Kim y cols., American Journal of Pathology, diciembre de 2004, páginas 2177-2185 describe la inhibición de angiogénesis ocular por ARNip que tiene como objetivo, sin embargo, genes de la ruta del factor de crecimiento endotelial vascular. Unsold y cols., Molecular Vision 2004, páginas 468-474 describe el uso de una molécula química pequeña que tiene la designación MAE 87 como inhibidor de receptores tirosina cinasas en ratones. El documento US 2005/0282761 revela compuestos, composiciones y procedimientos para modular la expresión del receptor de hormona de crecimiento.

Según el progreso de patología microvascular inducida por diabetes, los capilares retinales eventualmente llegan a estar ocluidos y conducen a áreas multifocales de hipoxia de isquemia dentro de la retina. Las condiciones hipóxicas en el tejido no perfundido facilitan la producción de factores del crecimiento capaces de estimular crecimiento anormal de vasos sanguíneos nuevos a partir de los vasos existentes (angiogénesis) . Estos vasos sanguíneos nuevos patológicos crecen en el vítreo y pueden causar pérdida de visión, una afección llamada retinopatía diabética proliferativa (PDR) , dado que los vasos sanguíneos nuevos son frágiles y tienden a dejar pasar sangre dentro del ojo. El tipo de proliferación de DR está caracterizado por neovascularización de la retina y disco óptico que puede proyectarse en el vítreo, la proliferación de tejido fibroso, hemorragia vítrea y desprendimiento de retina.

La neovascularización también ocurre en un tipo de glaucoma llamado glaucoma neovascular en el que la presión intraocular incrementada está causada por crecimiento de tejido conectivo y vasos sanguíneos nuevos sobre la malla trabecular. El glaucoma neovascular es una forma de glaucoma secundario causado por neovascularización en el ángulo de la cámara.

La neovascularización de segmento posterior (PSNV) es una patología que amenaza la visión responsable de las dos causas más comunes de ceguera adquirida en los países desarrollados: degeneración macular relacionada con la edad exudativa (AMD) y PDR. Hasta hace poco, los únicos tratamientos aprobados para PSNV que tienen lugar durante la AMD exudativa fueron fotocoagulación láser o terapia fotodinámica con VISUDYNE™. Ambas terapias implican la oclusión de vasos afectados, lo que da como resultado daño inducido por láser, permanente para la retina y no se dirigen a la causa subyacente de la neovascularización. La recurrencia de neovascularización a partir de la misma zona es común. Para pacientes con PDR, las intervenciones quirúrgicas con vitrectomía y retirada de las membranas preretinales son las únicas opciones disponibles actualmente, así como una terapia láser llamada fotocoagulación panretinal para evitar la producción de más vasos nuevos.

Los esfuerzos farmacéuticos actuales se han centrado en inhibir los efectos de factores angiogénicos potentes tales como VEGF. Recientemente, inyección intravítrea de LUCENTIS™, un fragmento de anticuerpo anti-VEGF, se aprobó para el tratamiento de AMD. Este fragmento de anticuerpo se diseñó para unirse a e inhibir VEGF para inhibir la formación de nuevos vasos sanguíneos. Lucentis está también en los ensayos clínicos para el tratamiento de edema macular diabético. Otros enfoques incluyen el uso de este ARN de interferencia pequeño que se dirige a VEGF o a su receptor.

El eje de hormona del crecimiento (GH) /IGF1 está implicado en DR como se evidencia por los resultados que muestran un incremento de IGF1 en fluidos oculares y tejidos de pacientes con DR avanzada. Adicionalmente, los pacientes tratados subcutáneamente con octreotida, un análogo de somatostatina que inhibe el eje GH/IGF1, muestran una mejora empírica de edema macular diabético y PDR. En el modelo de ratón OIR, el tratamiento con un antagonista de inhibidor de GH o un antagonista de IGF1R disminuye la neovascularización retinal. En un modelo de diabetes de ratón, la terapia de IGF-1 mediada por plásmidos revertió la angiogénesis incrementada diabética y el flujo arterial.

IGF1R es un miembro de la familia de receptores tirosina cinasas. Se han descrito inhibidores de receptores tirosina cinasas de moléculas pequeñas (RTKi) que inhiben la neovascularización retinal y/o la neovascularización coroidal en ratones. Cada una de estas moléculas inhibe múltiples cinasas que pueden ser efectivas en bloquear neovascularización, sin embargo, cada una tiene el riesgo concomitante de causar efectos secundarios tóxicos. Un fármaco de molécula pequeña que inhibirá todas las cinasas necesarias para bloquear la neovascularización puede también inhibir una cinasa que sea necesaria para la supervivencia celular.

La presente invención trata esta carencia de especificidad de inhibición de receptores tirosina cinasas, específicamente el receptor de factor de... [Seguir leyendo]

1. Composición para su uso en el tratamiento de angiogénesis ocular que comprende: una cantidad efectiva de ARN de interferencia que tiene una longitud de 19 a 49 nucleótidos y un vehículo farmacéuticamente aceptable, comprendiendo dicho ARN de interferencia:

una región de al menos 13 nucleótidos contiguos que tiene al menos complementariedad de secuencia al 90 % para, o al menos identidad de secuencia al 90 % con, los penúltimos 13 nucleótidos del extremo 3' de un ARNm correspondiente a una cualquiera de SEC ID N.º: 2 y SEC ID N.º: 8-SEC ID N.º: 40,

en la que de este modo se trata angiogénesis ocular.

2. Composición de acuerdo con la reivindicación 1 para su uso en el tratamiento de angiogénesis ocular que comprende:

una molécula de ARNip de cadena doble que regula a la baja la expresión de un gen de IGF1R por medio de ARN de interferencia, en la que:

cada hebra de dicha molécula de ARNip es independientemente de aproximadamente 19 a aproximadamente 27 nucleótidos de longitud; y una hebra de dicha molécula de ARNip comprende una secuencia de nucleótidos que tiene complementariedad sustancial a una secuencia de nucleótidos correspondiente a la secuencia de ADN de una cualquiera de SEC ID N.º: 2 y SEC ID N.º: 8-SEC ID N.º: 40, de tal forma que dicha molécula de ARNip dirige la escisión de dicho ARNm por medio de interferencia de ARN.

3. Una composición de acuerdo con la reivindicación 1 para su uso en el tratamiento de angiogénesis ocular que comprende un ARN de interferencia que tiene una longitud de 19 a 49 nucleótidos y que comprende una secuencia de nucleótidos correspondiente a la secuencia de ADN de una cualquiera de SEC ID N.º: 2 y SEC ID N.º: 8-SEC ID N.º: 40, o un complemento de la misma y un vehículo farmacéuticamente aceptable.

4. La composición para su uso en el tratamiento de angiogénesis ocular de la reivindicación 3, que comprende adicionalmente un segundo ARN de interferencia que tiene una longitud de 19 a 49 nucleótidos y que comprende una región de al menos 13, 14, 15, 16, 17 o 18 nucleótidos contiguos que tienen al menos complementariedad del 80 % a, o al menos identidad de secuencia del 80 % con los 13 penúltimos nucleótidos del extremo 3' de un segundo ARNm correspondiente a la secuencia de ADN de una cualquiera de SEC ID N.º: 2 y SEC ID N.º: 8-SEC ID N.º: 40.

5. Composición de acuerdo con la reivindicación 1 para su uso en el tratamiento de angiogénesis ocular de ARN de interferencia que tiene una longitud de 19 a 49 nucleótidos, que comprende:

una hebra de nucleótidos en sentido correcto, una hebra de nucleótidos antisentido y una región de al menos complementariedad contigua casi perfecta de al menos 19 nucleótidos;

en la que dicho nucleótido antisentido de la cadena tiene al menos complementariedad del 80 % con una parte de ARNm correspondiente a una secuencia objetivo de IGF1R que comprende nucleótido 401, 635, 1062, 1548, 1604, 1643, 1766, 1922, 2012, 2069, 2210, 2416, 2423, 2654, 2909, 3339, 3416, 3464, 3476, 3505, 3512, 3781, 3782, 3881, 4064, 4158, 44111, 4487, 4904, 4905, 4909, 3329, 2323 o 2887 de la SEC ID N.º: 1 y tiene una región de al menos complementariedad contigua casi perfecta con dicha parte hibridante de ARNm correspondiente a SEC ID N.º: 1,

para atenuar la expresión de ARNm de IGF1R en el ojo de un sujeto que sufre de una afección asociada con angiogénesis ocular.

6. Composición de acuerdo con la reivindicación 5 para su uso en el tratamiento de angiogénesis ocular, que comprende adicionalmente el uso de un segundo ARN de interferencia que tiene una longitud de 19 a 49 nucleótidos y que comprende una región de al menos 13, 14, 15, 16, 17 o 18 nucleótidos contiguos que tienen al menos complementariedad del 80 %, o al menos identidad de secuencia del 80 % con los 13 penúltimos nucleótidos del extremo 3' de un segundo ARNm correspondiente a la secuencia de ADN de una cualquiera de SEC ID N.º: 2 y SEC ID N.º: 8-SEC ID N.º: 40.