ENSAYO DE COMBINACIÓN PARA LA DETECCIÓN DE ALCOHOL Y DROGAS DE ADICCIÓN.

Ensayo de combinación para la detección de alcohol y drogas de adicción Campo de la invención La presente invención versa acerca de un aparato y un procedimiento para recoger fluidos corporales y proporcionar un ensayo de uno o más analitos presentes en esos fluidos corporales. Antecedentes de la invención Las drogas de adicción y el alcohol son las causas más frecuentes de la conducción en estado de intoxicación, además de muchos otros problemas relacionados con su uso. Por ejemplo, el uso ilegal de drogas y el uso excesivo de alcohol concurren en muchos accidentes, lesiones y afecciones médicas. Examinar individuos para detectar drogas de adicción y alcohol es un importante procedimiento en la identificación de aquellos que pueden causarse lesiones a sí mismos y a otros. El examen también puede proporcionar un beneficio adicional como un elemento disuasorio contra un uso inapropiado y/o ilegal de drogas o alcohol. Con ese fin, se han desarrollado muchas pruebas para examinar individuos para detectar la presencia de drogas de adicción y alcohol, o metabolitos o otros residuos de los mismos. Por ejemplo, algunos de tales aparatos y procedimientos implican la determinación de la presencia y/o de la cantidad de drogas de adicción o alcohol en fluidos biológicos, como sangre, orina y fluido oral. Se ha demostrado que estos son procedimientos analíticos útiles. Sin embargo, los procedimientos químicos preferidos de tales pruebas han incluido a menudo complejos procedimientos de laboratorio, como la cromatografía de gases para el análisis de sangre u orina, y una gama de pruebas de laboratorio o in situ. Estas pruebas implican procedimientos que llevan mucho tiempo y, por ello, no son útiles para una determinación rápida de la intoxicación de un individuo, como la que podría precisarse durante una detención de un automóvil en el arcén. Así, hay una demanda creciente de un procedimiento simple, preciso y reproducible para determinar la presencia de drogas de adicción o alcohol en fluidos corporales. Tal prueba no solo llevaría a determinaciones más rápidas de intoxicación o sobriedad durante detenciones de automóviles, sino que también podría ser usada en otros campos, como garantizar que los operadores de maquinaria peligrosa, como equipo pesado de construcción o material militar, no estén intoxicados. Además, hay el beneficio añadido de que la rápida identificación de tales individuos contribuye a apartar a esos individuos del manejo de automóviles y de otra maquinaria, reduciendo con ello costes, tanto en términos humanos (es decir, lesiones, vidas perdidas, etc.) como en términos económicos. Para proporcionar un análisis más rápido, se han desarrollado varios dispositivos de prueba que usan tiras reactivas de prueba. En general, se aplica a la tira reactiva una muestra de fluidos corporales, como orina, sangre o fluido oral, para efectuar una reacción, tal como una reacción inmunológica o enzimática, para determinar la presencia de los analitos objeto de prueba. Por ejemplo, una tira reactiva tal para drogas de adicción presentes en sustancias como sangre, orina, suero y tejido, usa principios inmunológicos. En particular, se han usado anticuerpos y antígenos específicos a drogas en una variedad de procedimientos de inmunoensayo para detectar anticuerpos o antígenos en fluidos corporales de seres humanos y animales. Los dispositivos de prueba conocidos pueden identificar la presencia o la ausencia de drogas de adicción, como la cocaína, los opiáceos y la marihuana, usando los conjugados proteínicos de estos derivados de drogas y sus anticuerpos acompañantes. Además de las tiras reactivas de inmunoensayo descritas en lo que antecede, otras tiras reactivas usan reacciones enzimáticas para determinar la presencia de alcohol en fluidos corporales. Tales dispositivos son útiles debido al uso generalizado de las pruebas de detección de alcohol en la sociedad de hoy. Por ejemplo, aproximadamente una tercera parte de todos los pacientes actualmente admitidos a urgencias hospitalarias son sometidos a pruebas para detectar niveles de alcohol en sangre con el fin de realizar un juicio acertado en cuanto a la naturaleza de la condición clínica del paciente. Antes de la aparición de tales tiras reactivas, las mediciones se determinaban tomando muestras de sangre por medio de punciones en vena y llevando a mano la muestra a un laboratorio para una determinación de alcohol en sangre. El procedimiento previo duraba de treinta minutos a algunas horas. Sin embargo, las pruebas más nuevas han incluido tiras reactivas que emplean la enzima alcohol-oxidasa. La alcohol-oxidasa es una enzima particularmente inestable que experimenta un deterioro y una pérdida de actividad rápidos. En particular, la alcohol-oxidase reacciona con el alcohol para formar un peróxido de hidrógeno. Se puede hacer entonces que el peróxido de hidrógeno reaccione con un cromógeno u otro marcador detectable para producir la apariencia de un color particular en una tira reactiva que signifique la presencia de alcohol en el cuerpo. La mayoría de las pruebas in situ de drogas de adicción se basan en un inmunoensayo de flujo lateral, que es un ensayo dinámico con un tamaño indefinido de muestra. El ensayo enzimático del alcohol es un ensayo de punto final con un volumen definido de muestra. Por naturaleza, estos dos tipos de pruebas requieren diferentes aplicaciones de muestras y diferentes interpretaciones de los resultados. Ejemplos comercialmente disponibles de pruebas de drogas de adicción y alcohol son: Prueba Oratect de Fluido Oral para el Control de Drogas Múltiples COC/MET/THC/AMP/OPL/PCP (Branan Medical Corporation, Irvine, California) y Alco-Screen (Chematics, North 2 E05777646 02-01-2012   Webster, Indiana), respectivamente. Además, la patente estadounidense nº 6.248.598 da a conocer un inmunoensayo que permite tanto la recogida de fluido oral como un ensayo de fluido oral para la detección de uno o más analitos con una lectura visual. La patente 6.248.598 da a conocer un dispositivo que recoge fluido oral e inicia un ensayo o ensayos en el fluido oral, pero no da a conocer un dispositivo que pueda evaluar mediante ensayo la presencia tanto de drogas de adicción como de alcohol. Así, con el actual aparato de prueba subsisten algunas deficiencias. Por ejemplo, aunque se han desarrollado diversas pruebas para detección tanto de drogas de adicción como de alcohol, las pruebas de detección de drogas de adicción operan sobre principios inmunológicos, mientras que las pruebas de detección de alcohol operan por medio de reacciones enzimáticas. En general, es difícil combinar estos dos tipos de pruebas en un solo dispositivo. Por ejemplo, los dispositivos que usan diversas tiras reactivas (u otras membranas) para alojar componentes de pruebas tanto de drogas de adicción como de alcohol, experimentan la desventaja de que los reactivos para las diferentes pruebas tengan reacciones cruzadas entre sí. Por ejemplo, los reactivos de la prueba de detección de alcohol usados para efectuar un cambio de color pueden migrar a la tira de inmunoensayo para interferir en la prueba de detección de drogas de adicción. Como consecuencia de dificultades como las descritas en lo que antecede, en la actualidad deben usarse dispositivos separados cuando se comprueba la presencia de drogas de adicción y alcohol. Esta necesidad de tiras reactivas separadas incrementa la cantidad de aparatos que debe mantenerse a mano para llevar a cabo tales pruebas, así como aumentar el tiempo que lleva administrar múltiples pruebas diferentes. Los costos de tener a mano varios dispositivos de prueba diferentes también aumentan. Además, cualquier procedimiento de prueba que use muestras de sangre y/u orina también puede ser invasivo para el individuo sometido a prueba. En vista de lo anterior, son deseables ensayos y procedimientos adicionales. Resumen de la invención La presente invención supera las deficiencias descritas en lo que antecede de aparatos y procedimientos de prueba proporcionando un aparato de prueba que permite comprobar la presencia tanto de drogas de adicción como de alcohol dentro de un solo dispositivo. En general, el aparato de la presente invención incluye un inmunoensayo para detectar cualitativamente la presencia de diversas drogas de adicción y una almohadilla reactiva que incluye una enzima como prueba para la detección de alcohol. Los dos tipos de pruebas están contenidos dentro del mismo alojamiento y estas pruebas se llevan a cabo usando la misma fuente de muestras de un sujeto que está siendo sometido a pruebas. En particular, la presente invención proporciona un aparato para la prueba de múltiples analitos que incluye un alojamiento que contiene una almohadilla de recogida de muestras que se extiende parcialmente desde el alojamiento. La almohadilla de recogida... [Seguir leyendo]

1. Un aparato (10) para la prueba de múltiples analitos que comprende: un alojamiento (18) que contiene: una almohadilla (20) de recogida de muestras que se extiende parcialmente desde dicho alojamiento (18), estando dicha almohadilla de recogida de muestras en comunicación de acción capilar con: un único material (15) de refuerzo que soporta, en una primera tira reactiva (12), componentes que comprenden una almohadilla (40) de muestras y una almohadilla (42) de absorción en comunicación de acción capilar para un inmunoensayo y, en una segunda tira reactiva (14), reactivos para una reacción enzimática; por lo que una muestra en la almohadilla (20) de recogida se comunica con las tiras reactivas primera (12) y segunda (14) para la detección tanto inmunológica como enzimática de uno o varios analitos contenidos en la muestra, en el que las tiras reactivas primera (12) y segunda (14) están asociadas cada una con la almohadilla (20) de recogida, pero no están asociadas entre sí, en el que dicha almohadilla (40) de muestras y dicha almohadilla (42) de absorción están cada una en comunicación de acción capilar con dicha primera tira reactiva. 2. El aparato de la reivindicación 1 en el que dicha primera tira reactiva (12) y dicha segunda tira reactiva (14) están dispuestas al menos parcialmente dentro de dicho alojamiento (18). 3. El aparato de la reivindicación 1 en el que dicha almohadilla (20) de recogida de muestras está adaptada para recibir una muestra fluida, preferentemente en la que dicha muestra fluida es un fluido oral. 4. El aparato de la reivindicación 1 en el que dicha primera tira reactiva (12) comprende, además, una almohadilla (22) de conjugados y una membrana (24) de ensayo en comunicación de acción capilar mutua. 5. El aparato de la reivindicación 4 que, además, comprende un primer trazador depositado en dicha almohadilla (22) de conjugados de tal forma que sea libremente amovible con respecto a la misma en presencia de un fluido. 6. El aparato de la reivindicación 5 en el que dicho primer trazador comprende un anticuerpo de analito conjugado con un marcador detectable. 7. El aparato de la reivindicación 6 en el que dicho primer trazador incluye una pluralidad de anticuerpos a una pluralidad de analitos, estando conjugado cada uno de dicha pluralidad de anticuerpos con un marcador detectable. 8. El aparato de la reivindicación 7 en el que dicho marcador detectable está seleccionado del grupo que consiste en oro coloidal y partículas coloreadas de látex. 9. El aparato de la reivindicación 4 que, además, comprende un trazador de control depositado en dicha almohadilla (22) de conjugados, siendo dicho trazador de control libremente amovible con respecto a la misma en presencia de un fluido. 10. El aparato de la reivindicación 4 que, además, comprende una pluralidad de analitos inmovilizados en dicha membrana (24) de ensayo, preferentemente en el que dicha pluralidad de analitos está seleccionada del grupo que consiste en analitos de cocaína, d-metanfetamina, 11-nor-[Delta]9-tetrahidrocannabinol, d-anfetamina, opiáceos y fenciclidina. 11. El aparato de la reivindicación 10 en el que dicha membrana (24) de ensayo incluye una pluralidad de zonas de reacción, en el que cada una de dicha pluralidad de zonas de reacción incluye uno de dicha pluralidad de analitos inmovilizado en la misma, incluyendo cada uno de dicha pluralidad de subconjuntos múltiples analitos de un solo tipo. 12. El aparato de la reivindicación 11 que, además, comprende una pluralidad de trazadores que incluye un anticuerpo de analito conjugado con un marcador detectable, siendo específico cada uno de dichos anticuerpos a uno de dicha pluralidad de analitos, depositándose dicha pluralidad de trazadores en dicha almohadilla de conjugados y siendo libremente amovible con respecto a la misma en presencia de un fluido, de tal modo que, cuando dichos anticuerpos se enlazan a dicha pluralidad de analitos en dichas zonas de reacción con una concentración predeterminada, dicho marcador detectable sea visible al ojo humano. 13. El aparato de la reivindicación 1 en el que dicha segunda tira reactiva (14) comprende, además, una tira (44) de acción capilar y una almohadilla (46) de reacción. E05777646 02-01-2012   14. El aparato de la reivindicación 13 en el que dichos reactivos están dispuestos sobre dicha almohadilla (46) de reacción, preferentemente en el que dichos reactivos están seleccionados del grupo que consiste en tetrametilbencidina, alcohol-oxidasa, peroxidasa, tampones y proteínas estabilizantes. 15. El aparato de la reivindicación 14 en el que dichos reactivos producen una reacción enzimática en presencia de alcohol. 16. El aparato de la reivindicación 15 en el que dicha almohadilla (46) de reacción presenta un primer color en ausencia de alcohol y presenta un segundo color en presencia de alcohol. 17. El aparato de la reivindicación 1 en el que dicho alojamiento (18), además, comprende al menos una ventana (52) a través de la cual puede observarse un área de reacción de una membrana de nitrocelulosa. 18. Un procedimiento para el ensayo tanto de drogas de adicción como de alcohol, comprendiendo el procedimiento: proporcionar un aparato (10) según al menos una de las reivindicaciones 1 a 17, proporcionar una muestra de fluido oral a la almohadilla (20) de recogida, iniciando con ello dicho inmunoensayo y dicha reacción enzimática; y detectar resultados de dicho inmunoensayo y dicha reacción enzimática. 19. Un procedimiento de preparación de un aparato (10) para comprobar la presencia de drogas de adicción o de alcohol en una muestra, comprendiendo el procedimiento: proporcionar un alojamiento (18) que contiene una almohadilla (20) de recogida de muestras que se extiende parcialmente desde dicho alojamiento (18); y proporcionar un único material (15) de refuerzo que soporta unas tiras reactivas primera (12) y segunda (14), teniendo dicha primera tira reactiva (12) componentes que comprenden una almohadilla (40) de muestras y una almohadilla de absorción en comunicación de acción capilar para un inmunoensayo, estando dicha primera tira reactiva (12) en comunicación de acción capilar con dicha almohadilla (20) de recogida; y una segunda tira reactiva (14) que tiene componentes para una reacción enzimática, estando dicha segunda tira reactiva (14) en comunicación de acción capilar con dicha almohadilla (20) de recogida, en el que las tiras reactivas primera (12) y segunda (14) están cada una asociada con la almohadilla (20) de recogida, pero no están asociadas entre sí, en el que dicha almohadilla (40) de muestras y dicha almohadilla (42) de absorción están cada una en comunicación de acción capilar con dicha primera tira reactiva. 11 E05777646 02-01-2012   12 E05777646 02-01-2012   13 E05777646 02-01-2012