CARTUCHO PARA DIAGNÓSTICOS MÉDICOS AUTOMATIZADOS.

La invención se refiere a un cartucho para la detección de la presencia, ausencia o la cantidad de secuencias específicas de ADN o ARN. La invención también se refiere al uso de un sistema, que opcionalmente incorpora un cartucho, para la detección de la presencia, ausencia o la cantidad de secuencias específicas de ADN o ARN. Desde el descubrimiento del ADN, la tecnología de la detección de la presencia, ausencia o la cantidad de secuencias específicas de ADN o ARN en una muestra se ha desarrollado enormemente. En especial, la RCP, la Reacción en Cadena de Polimerasa, ha contribuido enormemente al desarrollo de ensayos de todo tipo para la detección de la presencia o ausencia de secuencias de ADN o ARN. En la actualidad es posible recoger muestras que contienen ADN de un organismo y determinar la presencia, ausencia o la cantidad en las mismas de ciertas secuencias específicas de ADN (secuencias diana). Hay disponible tecnología para realizar tales análisis para múltiples secuencias diana al mismo tiempo, la denominada detección múltiplex de secuencias diana aumentando la producción. En la actualidad, este tipo de análisis todavía no se realiza de forma rutinaria, como puede ser para la determinación del contenido de glucosa en sangre en el caso de la diabetes. Generalmente son necesarios laboratorios bien equipados, y se han de usar protocolos cuidadosos con el fin de evitar la contaminación por cruce y asegurar que los resultados obtenidos sean fiables, esto es, minimizar lecturas falso-positivas o falso-negativas. Sin embargo, como todavía está implicada una gran cantidad de trabajo manual de personal entrenado extensivamente y supervisado, sigue habiendo necesidad de obviar las desventajas de los procedimientos actuales de análisis de ADN o ARN. Especialmente, es sabido que el análisis de ARN es muy difícil porque muy fácilmente se produce contaminación debido a la presencia de cantidades mínimas de ARN en la atmósfera y en las manos de analistas expertos. Además, los presentes procedimientos de análisis no sólo son laboriosos, sino que también exigen mucho tiempo. Típicamente, un procedimiento eficiente para un análisis de ADN o ARN requiere aproximadamente 6 horas debido, inter alia, a la manipulación entre los varios sistemas para la toma de muestras, el aislamiento de ADN o ARN de la muestra, el posterior ensayo para el análisis de la presencia, ausencia o la cantidad de la secuencia diana en la muestra, el procesamiento de cualesquier resultados obtenidos y la correspondiente presentación de los resultados. Se han dado a conocer antes sistemas basados en un cartucho para la detección de ADN. El documento WO 03/049860 describe un dispositivo para análisis químico o bioquímico. Por ejemplo, la patente U.S. 5.882.903 describe un sistema para la detección de ADN. El sistema comprende un primer conjunto que tiene una o varias cámaras de reacción y un segundo conjunto que comprende un número de cámaras de líquido. Cada una de las cámaras de líquido contiene líquido que se usa durante la detección de ADN. Estos líquidos comprenden líquidos de lavado, líquido para lisis y una solución de amplificación que contiene un tampón de amplificación y cebadores apropiados. Las cámaras de reacción se usan para realizar las diferentes etapas de la detección, tales como lavado, lisis y amplificación. El primer conjunto del cartucho conocido es un componente en forma de disco, y el segundo conjunto es un componente en forma de anillo, que se puede colocar exteriormente al componente en forma de disco. El componente en forma de disco comprende en su circunferencia una superficie de cierre cilíndrica que se coloca frente a una superficie de cierre exterior del componente en forma de anillo. En las superficies de cierre hay aberturas para líquido con el fin de que las cámaras de líquido estén en comunicación de líquido con las cámaras de reacción de manera que se puedan intercambiar entre ellas los diferentes líquidos. Un inconveniente del cartucho conocido es que los conjuntos primero y segundo se han de hacer con mucha precisión con el fin de que haya un cierre apropiado entre las superficies de cierre primera y segunda. Por ello es importante que los conjuntos primero y segundo se hagan mutuamente movibles con el fin de que sea posible que se puedan poner en comunicación diferentes aberturas de líquidos del primer conjunto y el segundo conjunto pero, al mismo tiempo, se debe obtener un cierre apropiado cuando una abertura de líquido del primer conjunto se ponga en comunicación de líquido con una abertura para líquidos del segundo conjunto. Debido a estos requerimientos de precisión de las aberturas para líquido de los conjuntos primero y segundo, el cartucho es susceptible de un cierre no apropiado y consecuentemente una contaminación entre los conjuntos primero y segundo. El objetivo de la presente invención es proporcionar un cartucho que no tenga los problemas antes mencionados. Este objetivo se alcanza con un cartucho para la detección de la presencia, la ausencia y/o la cantidad de una secuencia diana de nucleótidos en una muestra que comprende una o varias secuencias de ácido nucleico, cartucho que comprenda un primer componente y un segundo componente, siendo conectables entre sí tales componentes, comprendiendo el primer componente al menos una primera abertura para líquido y una primera superficie de cierre, y comprendiendo el segundo conjunto al menos una segunda abertura para líquido y una segunda superficie de cierre, en el que, después de conectar el primer componente y el segundo componente, las aberturas primera y segunda de líquido se pueden poner en comunicación de líquido y las superficies de cierre primera y segunda se pueden poner enfrentadas entre sí para cerrar la comunicación de líquido entre las aberturas de líquido primera y segunda, cartucho caracterizado 2 E06765857 03-01-2012   E06765857 03-01-2012 porque comprende medios de accionamiento para orientar la segunda superficie de cierre en la dirección de la primera superficie de cierre, en el que el segundo componente tiene forma de disco y comprende un cuerpo principal en forma de anillo y un número de partes flexibles similares a dedos, estando conectado un extremo de cada parte flexible al cuerpo principal y estando libre el extremo opuesto de la parte flexible, comprendiendo el extremo opuesto la segunda abertura de líquido y la segunda superficie de cierre. Orientando la segunda superficie de cierre en la dirección de la primera superficie de cierre es posible obtener un mejor ajuste de estas superficies de cierre, lo que da por resultado un mejor cierre. Los medios de accionamiento para orientar pueden comprender, por ejemplo, elementos de tipo muelle que pueden forzar, al menos parte del segundo componente, en la dirección mencionada. Los medios de accionamiento para orientar pueden estar situados en uno de los componentes primero o segundo, o en ambos, pero también se pueden proporcionar como una parte separada. En una realización, el segundo componente comprende una parte flexible que es flexible en al menos una dirección perpendicular a la segunda superficie de cierre. Proporcionando una parte flexible que es al menos flexible en la dirección perpendicular a la segunda superficie flexible, la segunda superficie flexible se puede poner más fácilmente enfrentada a la primera superficie de cierre. De esta forma, en tal realización no es necesario que el segundo componente entero esté dispuesto en la dirección de la primera superficie de cierre. En una realización, el segundo componente comprende dos o más partes flexibles, teniendo cada una de ellas una segunda abertura de líquido y una segunda superficie de cierre asociada, siendo cada una flexible en al menos una dirección perpendicular a la respectiva segunda superficie de cierre. Proporcionando una parte flexible diferente para diferentes aberturas de líquido y superficies de cierre asociadas, es más fácil obtener un cierre apropiado para los componentes primero y segundo, puesto que, para cada combinación de aberturas de líquido, las superficies de cierre primera y segunda se pueden poner enfrentadas entre sí independientemente de las otras aberturas de líquido y las superficies de cierre asociadas de los componentes primero y segundo. En una realización, cada uno de los mencionados componentes primero y segundo comprende dos o más aberuras de líquido y las correspondiente superficies de cierre primera y segunda, siendo cada una de las superficies de cierre primera y segunda sustancialmente planas, siendo los planos de cada una de las superficies de cierre primera y segunda, respectivamente, sustancialmente paralelas entre sí. En tal realización, todas las superficies de cierre son sustancialmente paralelas entre sí, de manera que moviendo u orientando el segundo componente... [Seguir leyendo]

1. Un cartucho (5, 10) para la detección de la presencia, la ausencia y/o la cantidad de una secuencia de nucleótidos diana en una muestra que comprende una o varias secuencias de ácido nucleico en una muestra, cartucho (5, 10) que comprende un primer componente y un segundo componente que son conectables entre sí, comprendiendo el primer componente al menos una abertura de líquido y una primera superficie de cierre y comprendiendo el segundo componente al menos una segunda abertura de líquido (34) y una segunda superficie de cierre (35), en el que, después de la conexión del primer componente y el segundo componente, las aberturas de líquido primera y segunda (34) se pueden poner en comunicación de líquido y las superficies de cierre primera y segunda se pueden poner enfrentadas entre sí para cerrar la comunicación de líquido entre la primera abertura de líquido y la segunda abertura de líquido, caracterizado porque el cartucho (5, 10) comprende medios para orientar la segunda superficie de cierre (35) en la dirección de la primera superficie de cierre, en el que el segundo componente (30, 40) tiene forma de disco y comprende un cuerpo principal (32) de forma de anillo y un número de partes flexibles similares a dedos (33, 43), estando conectado un extremo de cada parte flexible (33, 43) al cuerpo principal (32) y estando libre un extremo opuesto de la parte flexible (33, 43), comprendiendo el extremo opuesto la segunda abertura de líquido (34) y la segunda superficie de cierre (35). 2. El cartucho de acuerdo con la reivindicación 1, en el que la mencionada parte flexible (33, 43) es flexible en al menos una dirección perpendicular a la segunda superficie de cierre (35). 3. El cartucho de acuerdo con la reivindicación 2, en el que el segundo componente (30, 40) comprende dos o más partes flexibles (33), teniendo cada una una segunda abertura de líquido (34) y una segunda superficie de cierre (35) asociada, siendo cada una flexible al menos en una dirección perpendicular a la respectiva segunda resistencia de cierre (35). 4. El cartucho de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-3, en el que cada uno de los mencionados componentes primero y segundo (30, 40) comprende dos o más aberturas de líquido (34) y las correspondientes superficies de cierre, siendo cada una de las superficies de cierre primera y segunda sustancialmente planas, siendo los planos de cada una de las superficies de cierre primera y segunda, respectivamente, paralelas entre sí. 5. El cartucho de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-4, en el que el primer componente es una parte principal de un cartucho (41), y el segundo componente es un cuerpo de RCP (30, 40) que comprende una o varias cámaras de termociclación (31). 6. El cartucho de acuerdo con la reivindicación 5, en el que cada segunda abertura de líquido (34) es una entrada y salida para la una o las varias cámaras de termociclación (31). 7. El cartucho de acuerdo con la reivindicación 5 o 6, en el que la cámara de termociclación o cada una de las varias cámaras de termociclación (31) está formada por un espacio entre la parte principal (32) del cuerpo de RCP y una hoja flexible (37) que está unida a la parte principal (32) en los bordes del espacio, estando la segunda abertura de líquido (34) en comunicación de líquido con el espacio. 8. El cartucho de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en el que el medio de orientación (44) está comprendido en un dispositivo de fijación (42) para fijar el segundo componente (30, 40) en el primer componente (41). 9. El cartucho de acuerdo con la reivindicación 8, en el que el dispositivo de fijación (42) comprende al menos un elemento de muelle (44) para orientar la segunda superficie de cierre (35) en la dirección de la primera superficie de cierre. 10. El cartucho de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1-9, en el que, después de la conexión, el segundo componente (30, 40) es movible respecto al primer componente entre al menos una primera posición en la que las aberturas de líquido primera y segunda están en comunicación de líquido y una segunda posición en la que la comunicación de líquido está obstruida. 11. El cartucho de acuerdo con la reivindicación 9, en el que, después de la conexión del primer componente y el segundo componente (30, 40), el segundo componente (30, 40) es giratorio respecto al primer componente en torno a un eje de rotación, y en el que cada uno de los componentes primero y segundo (30, 40) comprende dos o más aberturas de líquido (34) que está situadas sustancialmente en un círculo en torno al eje de rotación. 12. El cartucho de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 10-11, en el que al menos uno de los componentes primero y segundo (30, 40) está provisto de un elemento de cierre (38) que comprende la primera abertura de líquido y la primera superficie de cierre o la segunda abertura de líquido (34) y la segunda superficie de cierre (35), respectivamente, estando configurado el elemento de cierre (38) para que proporcione en la primera posición una comunicación de líquido entre las aberturas de líquido primera y segunda, y en la segunda posición la obstrucción de la comunicación de líquido, estando además configurado el elemento de cierre (38) para cerrar las aberturas de líquido primera y segunda del ambiente en ambas posiciones primera y segunda. 13. El cartucho de acuerdo con la reivindicación 7-8 y la 10, en el que el dispositivo de fijación (42) está configurado para ser usado para mover el segundo componente (30, 40) entre la primera posición y la segunda posición. 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