CAJA DE CULTIVO CON TAPA.

Esta solicitud reivindica prioridad a la solicitud provisional de los Estados Unidos US serie nº 60/842,733 presentada el 7 de septiembre de 2006 (pendiente), la revelación de la cual se incorpora como referencia en su integridad en este documento. Campo técnico Dispositivos de cultivo de células y tejidos. Antecedentes La ingeniería de los tejidos es útil de forma creciente como una herramienta terapéutica, particularmente para el tratamiento de heridas de la piel o enfermedades vasculares y también como una herramienta para la verificación de ciertos productos farmacéuticos y cosméticos. Por ejemplo, están comercialmente disponibles numerosos productos sustitutivos de la piel. La mayor parte de estos productos comprenden una matriz porosa de algún tipo, a menudo infiltrada con fibroblastos en el momento de la utilización, para que funcione como una capa dérmica y provista de queratinocitos o una autoplastia epidérmica delgada como una capa epidérmica. Uno de tales productos es OrCel® (Ortec International, Inc.), sustitución de la piel de dos capas provisto de una esponja de colágeno que, en el momento de la utilización, contiene fibroblastos dérmicos alogénicos cultivados en y en el interior dela misma como una capa dérmica y queratinocitos alogénicos cultivados en un lado no poroso de la esponja de colágeno como una capa epidérmica. Otro producto de sustitución de la piel de dos capas, PermaDerm® (Cutanogen Corporation/Lonza, Walkersville, Inc.; Walkersville MD), utiliza células epidérmicas y dérmicas, preferiblemente de una fuente antóloga, cultivadas en y en el interior de una matriz de colágeno. Estos productos ejemplares ilustran el papel vital del cultivo de células en la preparación de productos de sustitución de la piel de este tipo para utilización terapéutica o de investigación. Los insertos de cultivo de células que comprenden membranas porosas, tales como aquellos vendidos por Nunc A/S (Roskilde, Dinamarca), son útiles para estudios de polarización epitelial, quimiotaxia, transporte de macromoléculas y otras aplicaciones. Generalmente, una membrana porosa tanto de material inorgánico, tal como Anopoie® (Anotec Separations Ltd.), como de material orgánico, tal como policarbonato, sirve como la superficie de crecimiento o de fijación para células cultivadas, mientras la membrana se fija a un bastidor rígido de material compatible con el cultivo, tal como poliestireno, que sostiene la membrana alejándola el fondo de la caja de cultivo para permitir que el medio de cultivo llegue a ambos lados de las células fijadas o que crecen en la membrana. Hasta la fecha, esponjas, tejidos, membranas y otros tipos de matrices porosas para contener y sostener las células vivas, típicamente han sido cultivados en cajas de cultivo normales, que incluyen aquellas comúnmente referidas como cajas bioensayo. Ejemplos de cajas de bioensayo incluyen las cajas de bioensayoNun®, tales como los números de producto 240835 y 240845, y las cajas de bioensayo Corning®, tales como los números de producto 431111 y 431301 (Corning Life Sciences, Acton MA). Las cajas de bioensayo inicialmente fueron diseñadas para utilizarlas con microbios, tales como bacterias y levaduras, o células eucarióticas dependientesde no anclaje y son generalmente cajas de plástico transparentes rígidas con un área superficial grande pero provistas de una altura baja de modo que múltiples cajas se pueden apilar en una incubadora. Las cajas de bioensayo normales tienen diversas desventajas. Debido a que los productos de sustitución de la piel requieren cantidades relativamente grandes de medio nutritivo para alimentar progresivamente la estructura de crecimiento, es típicamente necesaria la adición de medio. Sin embargo, es difícil añadir medio de cultivo a una caja de bioensayo normal sin alterar, desplazar o dañar de otro modo las células en la caja. Además, los grandes volúmenes de medio que deben ser contenidos en las cajas de este tipo conduce a un movimiento o chapoteo excesivo del medio cuando una caja de bioensayo debe ser movida o manejada de otro modo; esto es indeseable debido al bajo perfil o altura de las cajas de bioensayo. El documento GB2262538 (Corning Inc) describe vasijas de cultivo de células en las que por lo menos una parte del interior tiene una pluralidad de ranuras o valles configurados y dimensionados para que puedan ser abarcados por las células del cultivo del tejido. Los valles o ranuras pueden ser paralelos entre sí o bien concéntricos entre sí. La vasija puede comprender un frasco en el que una parte de la pared del fondo esté inclinada para formar una rampa próxima a la pared extrema provista de un cuello de extremo abierto. La superficie interior de la pared del fondo puede tener un área de ventana plana. Estas vasijas proveen producciones de células mejoradas para líneas de células como las epiteliales y un entorno de crecimiento de las células más como en vivo para las líneas de células como los fibroblastos. 2 E07841969 12-12-2011   El documento W09736992 (Corning Costar Corp) describe una caja de cultivo para el crecimiento de cultivos tales como células de tejidos, bacterias y similares. La caja de cultivo incluye un asa que se extiende desde la misma que puede ser fácilmente agarrada por un usuario cuando eleve o maneje la caja de cultivo. La caja de cultivo también puede incluir una tapa que se puede colocar sobre una base de la caja para evitar la contaminación de los cultivos y controlar la evaporación o el líquido desde las cajas. El asa se puede extender desde la base, la tapa o desde ambas. Si las asas están provistas tanto en la base como en la tapa, pueden estar configuradas de forma diferente de modo que un usuario pueda distinguir fácilmente entre ellas. Existe por lo tanto la necesidad de cajas de cultivo alternativas. Resumen Según un primer aspecto de la presente invención, se provee un dispositivo para el cultivo de un biótico en un medio de cultivo como se reivindica en la reivindicación 1. Una caja de cultivo capaz de contener uno o más bióticos (por ejemplo, matrices) para sostener la infiltración de células vivas, provista de un canal en el que medio de cultivo o bien otros componentes se pueden añadir al mismo sin alterar o dañar las células y el contenido líquido de la caja tiene una reducida susceptibilidad a un movimiento excesivo o chapoteo durante la manipulación y el manejo de la caja. Una persona experta en la técnica apreciará que el cultivo de células incluye el cultivo de tejidos porque los tejidos son una organización más elevada de células. Una caja de cultivo, también referida como una caja de bioensayo, incluye una pared del fondo y por lo menos una pared lateral que se prolonga hacia arriba desde la pared del fondo para definir una cavidad interior. En una forma de realización, la caja de cultivo adicionalmente incluye por lo menos una pared de barrera para dividir la cavidad interior en una pluralidad de compartimientos, en el que la pared de barrera está configurada para mantener un primer biótico en un primer compartimiento físicamente separado de un segundo biótico en un segundo compartimiento. La pared de barrera puede incluir por lo menos un orificio para proveer comunicación fluida entre los compartimientos primero y segundo. En una forma de realización, la pared de barrera incluye una pluralidad de bloques de barrera discretos que definen orificios entre bloques de barrera adyacentes para la comunicación fluida. En una forma de realización, una tapa puede estar acoplada de forma que se puede quitar a la caja de cultivo para cubrir por lo menos parcialmente el interior de la cavidad de la caja. La tapa puede incluir una pared superior y por lo menos una pared lateral que se prolonga hacia abajo desde la pared superior. La caja de cultivo o la tapa puede incluir por lo menos un separador para proveer por lo menos una parte de una trayectoria de flujo desde el exterior de la caja de cultivo hacia el interior de la cavidad de la caja de cultivo cuando la tapa está colocada sobre la misma. Por ejemplo, en una forma de realización, los separadores pueden incluir prolongaciones (por ejemplo, lengüetas de ventilación) que separan la pared superior de la tapa de la caja de cultivo. En otra forma de realización, los separadores pueden ser prolongaciones (por ejemplo, nervios) que separan las paredes laterales de la tapa de la caja de cultivo. En otras formas de realización, la caja de cultivo o la tapa puede incluir características adicionales. Por ejemplo, la caja de cultivo y la tapa puede incluir prolongaciones que limiten el deslizamiento lateral de un dispositivo con relación a un dispositivo adyacente cuando los dispositivos estén en una configuración apilada. El dispositivo puede incluir un indicador de orientación para orientar la tapa con relación a la caja... [Seguir leyendo]

1. Un dispositivo (10, 10) para el cultivo de un biótico en un medio de cultivo, el dispositivo comprendiendo: una caja de cultivo (12) que incluye una pared del fondo (16) y por lo menos una para el lateral (18a 18d) que se prolonga desde la misma para definir una cavidad interior (20) la pared del fondo siendo globalmente plana y estando configurada para sostener el biótico en su interior; por lo menos una pared de barrera (24) para la división de la cavidad interior en una pluralidad de compartimientos (22a 22d), la por lo menos una pared de barrera estando provista de una altura configurada para mantener un primer biótico en un primer compartimiento separado de un segundo biótico en un segundo compartimiento; y un par de aristas separadas (34) formadas una al lado de la otra en la pared del fondo y que se extienden en una dirección común para definir un canal alargado (32) entre los compartimientos primero y segundo, las aristas estando provistas de una altura suficiente para amortiguar el movimiento de un medio de cultivo de modo que se reduzcan las perturbaciones del fluido de los bióticos durante la utilización, la altura de las aristas siendo menor que la altura de la por lo menos una pared de barrera. 2. El dispositivo de la reivindicación 1 en el que la por lo menos una pared de barrera incluye un orificio (30) para proveer comunicación fluida entre el primer compartimiento y el segundo compartimiento. 3. El dispositivo de la reivindicación 1 en el que la por lo menos una pared de barrera incluye una pluralidad de bloques de barrera discretos (28) que incluyen un espacio (30) entre bloques adyacentes para proveer comunicación fluida. 4. El dispositivo de la reivindicación 1 en el que el por lo menos un canal está en comunicación fluida con cada uno de la pluralidad de compartimientos. 5. El dispositivo de la reivindicación 1 adicionalmente comprendiendo una pluralidad de señales (84) para la identificación de un compartimiento respectivo en la caja de cultivo. 6. El dispositivo de la reivindicación 1 adicionalmente comprendiendo una tapa (14) adaptada para ser acoplada de forma que se pueda quitar a la caja de cultivo para cubrir por lo menos parcialmente la cavidad interior, la tapa incluyendo una pared superior (36) y por lo menos una pared el lateral (38a 38d) que se prolonga desde la misma. 7. El dispositivo de la reivindicación 6 adicionalmente comprendiendo una primera prolongación (66) en la caja de cultivo y una segunda prolongación (70) en la tapa de tal modo que cuando múltiples dispositivos están en una configuración apilada, la primera prolongación en un dispositivo coopera con la segunda prolongación en un dispositivo adyacente para limitar el movimiento de un dispositivo con relación al dispositivo adyacente. 8. El dispositivo de la reivindicación 6 adicionalmente comprendiendo un primer indicador de orientación (76, 78, 80, 82) para indicar una orientación específica de la tapa con relación a la caja de cultivo. 9. El dispositivo de la reivindicación 8 en el que el primer indicador de orientación adicionalmente comprende: una primera señal de orientación (76, 80) en una de ambas, la caja de cultivo o la tapa; y una segunda señal de orientación (78,82) en la otra de ambas, la caja de cultivo o la tapa, en el que en la alineación de la primera señal de orientación con la segunda señal de orientación provee la orientación específica de la tapa con relación a la caja de cultivo. 10. El dispositivo de la reivindicación 1 en el que el por lo menos un canal se extiende a través sustancialmente de la dimensión entera de la pared del fondo. 11. El dispositivo de la reivindicación 1 comprendiendo múltiples canales en la pared del fondo. 12. El dispositivo de la reivindicación 1 en el que el por lo menos un canal incluye un par de aristas separadas globalmente paralelas. 9 E07841969 12-12-2011   E07841969 12-12-2011   11 E07841969 12-12-2011   12 E07841969 12-12-2011   13 E07841969 12-12-2011   14 E07841969 12-12-2011