VIRUS DE LA INFLUENCIA CANINA Y COMPOSICIONES RELACIONADAS Y MÉTODOS DE USO.

Un virus de la influenza canina aislado del subtipo H3N8 depositado con la American Type Culture Collection como Depósito de Patente No. PTA-7694

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2006/060025.

Solicitante: IOWA STATE UNIVERSITY RESEARCH FOUNDATION, INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 310 LAB OF MECHANICS AMES, IA 50011-2131 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: YOON,Kyoung-jin , COOPER,Vickie.

Fecha de Publicación: .

Fecha Solicitud PCT: 17 de Octubre de 2006.

Clasificación PCT:

  • A61K39/145 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE.A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › A61K 39/00 Preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos (materiales para ensayos inmunológicos G01N 33/53). › Orthomyxoviridae, p. ej. virus de la influenza.
  • C07K14/11 QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › Orthomyxoviridae, p. ej. virus de la influenza.
  • C12N7/00 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › Virus, p. ej. bacteriófagos; Composiciones que los contienen; Su preparación o purificación (preparaciones de uso médico que contienen virus A61K 35/76; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos virales, p. ej. vacunas virales, A61K 39/00).
  • C12N7/04 C12N […] › C12N 7/00 Virus, p. ej. bacteriófagos; Composiciones que los contienen; Su preparación o purificación (preparaciones de uso médico que contienen virus A61K 35/76; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos virales, p. ej. vacunas virales, A61K 39/00). › Inactivación o atenuación; Producción de partes elementales de virus.

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Lituania, Letonia.


Fragmento de la descripción:

CAMPO TÉCNICO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se relaciona con los campos de virología, biología molecular, e inmunología. En particular, la presente invención se relaciona con virus de la influenza canina, así como también con composiciones 5 relacionadas y métodos de uso en la inducción de una respuesta inmune en animales.

ANTECEDENTE DE LA INVENCIÓN

El virus de la influenza es un virus de ARN que pertenece a la familia Orthomyxoviridae. El ARN vírico consiste de ocho segmentos independientes, que se recombina fácilmente entre los virus de la para producir nuevos subtipos.

La nucleoproteína (NP), que es el componente primario del nucleocápside, se codifica en el quinto segmento. 10 La NP y la proteína de matriz se utilizan para clasificar el virus de la influenza en el grupo A, B o C. Debido a que la NP es una proteína interna, ésta no se somete a la presión de la selección mediante un sistema inmune del anfitrión. Ésta une el ARN, es parte del complejo de transcriptasa, y se involucra en el transporte citoplasmático nuclear del ARN vírico (vARN).

La neuraminidasa (NM), que divide el enlace α-ceto que une un ácido siálico terminal y el siguiente residuo de 15 azúcar, permite por lo tanto la liberación de la progenie vírica de las células infectadas, se codifica mediante el sexto segmento. Se han identificado los nueve subtipos (N1- N9) de esa enzima. Todos los subtipos tienen dos regiones estructurales – un tallo y una cabeza. Todas las proteínas N8 tienen 470 aminoácidos, los primeros ocho de los cuales se conservan altamente. La siguiente región es rica en aminoácidos hidrófobos y se considera que es el dominio de transmembrana. Los siguientes 51 aminoácidos conforman la región del tallo, y la región de cabeza inicia en Cys91. La 20 última región contiene el sitio catalítico de la enzima. Los residuos de cisteína en la región de cabeza y tallo tienden a ser altamente conservados. Existen 6 a 8 sitios de N-glucosilación putativos.

La hemaglutinina (HA), que es una glucoproteína de membrana responsable de la adsorción del virus en la célula anfitriona, es el principal antígeno al que se dirigen los anticuerpos neutralizantes. Su variación antigénica es la principal causa de las epidemias de la influenza. Esta se codifica por el cuarto segmento. Se han identificado dieciséis 25 subtipos diferentes (H1-H16). La HA tiene un péptido de señal de 16 aminoácidos y dos polipéptidos (HA1 y HA2) unidos mediante puentes de disulfuro. La HA1 tiene el extremo terminal amino, mientras que la HA2 tiene el extremo terminal carboxilo. Una región hidrófoba en HA2 sujeta HA a la membrana vírica. Los residuos de cisteína tienden a ser altamente conservados. Hay seis sitios de glucosilación putativos, que permiten que el virus enmascare sus sitios antigénicos (Skehel et al., PNAS USA 81: 1779 (1984)). 30

Otras proteínas incluyen proteínas de matriz (M o M1 y M2), proteínas no estructurales (NS o NS1 y NS2), PA. PB1, y PB2. La proteína M1 es un componente principal del virión que une a la membrana de plasma de las células infectadas por medio de dos regiones hidrófobas en el terminal N de la proteína, mientras que la M2 es un canal de ión y, por lo tanto, una proteína de membrana integral. La proteína NS1 se encuentra en el núcleo y afecta el transporte de ARN celular, la división, y la traducción. La proteína NS2 se encuentra en el núcleo y el citoplasma y tiene una función 35 no conocida. La proteína PA es una transcriptasa y puede tener actividad de proteasa, mientras que la proteína PB1 funciona en la elongación transcripción y la proteína PB2 funciona en la unión de tapa de transcripción.

Globalmente, la influenza es la enfermedad respiratoria económicamente más significativa en humanos, cerdos, caballos y aves de corral (Wright et al., Orthomyxoviruses. In: Fields Virology. Knipe et al., eds. Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, 2001. pp. 1533-1579.). El virus de la influenza es conocido por sus continuos cambios 40 genéticos y antigénicos, que impiden el control efectivo del virus (Wright et al. (2001), supra; Webster et al., Microbiol. Rev. 56:152-179 (1992)). De particular preocupación para la prevención de epidemias y pandemias es la emergencia de un nuevo subtipo del virus mediante re-clasificación genética o transmisión inter-especies (Wright et al. (2001), supra) .

Recientemente, han ocurrido brotes epidémicos de influenza en especies, por ejemplo, felina y canina, que históricamente no tienen el virus de la influenza (Keawcharoen et al., Emerg. Infect. Dis. 10: 2189-2191 (2004); Crawford 45 et al.. Science 310:398-485 (Octubre 21, 2005; publicado en línea en septiembre 29, 2005); Dubovi et al., Isolation of equine influenza virus from racing greyhounds with fatal hemorrhagic pneumonia. In: Proceedings of the 47th Annual Meeting of American Association of Veterinary Laboratory Diagnosticians, Greensboro, NC, Octubre 2005. p. 158; and Yoon et al., Emerg. Infect. Dis. 11 (12): 1974-1976 (diciembre 2005)). Por lo tanto, el se expande el rango de anfitrión del virus de la influenza. CRAWFORD P. C. ET AL describe la transmisión del virus de la influenza Equino a perros 50 (SCIENCE, AMERICAN ASSOCIATION FOR THE ADVANCEMENT OF SCIENCE, US, vol. 310, no. 5747, 21 Octubre 2005 (2005-10-21), páginas 482-485). En la base de datos del EMBL se puede encontrar la secuencia de un virus de Influenza A (A/canina/Texas/1/2004(H3N8)) presentado por CRAWFORD, P.C. ET AL. Que tiene un número de acceso de Base de datos DQ124159.

Han ocurrido brotes epidémicos de la enfermedad respiratoria en galgos de carrera originados por la infección 55 con el virus de la influenza en Florida en el 2004, en el este y el oeste de Iowa en Abril 2005, y en Texas en el 2005. La enfermedad se caracteriza por la aparición rápida de fiebre y tos, respiración rápida, y secreción nasal hemorrágica. La

morbilidad fue casi del 100% en ambos compuestos en el canódromo en Iowa, aunque la mortalidad fue menor del 5%. Aunque se recuperó un gran porcentaje de perros afectados, muchos sucumbieron a neumonía hemorrágica. La administración terapéutica de antibióticos de amplio espectro reduce la severidad de la enfermedad pero no pueden controlarla.

En vista de lo anterior, es un objeto de la presente invención proporcionar el virus de la influenza que infecta los 5 caninos. Es otro objeto de la presente invención proporcionar materiales y métodos para inducir una respuesta inmune al virus de la influenza en caninos. Estos y otros objetos y ventajas, así como también características inventivas adicionales, serán evidentes a partir de la descripción detallada proporcionada aquí.

BREVE RESUMEN DE LA INVENCIÓN

La invención se relaciona con un virus, composición, y use de la misma como se define en las reivindicaciones 10 adjuntas. Se describe un virus de la influenza canina aislado del subtipo H3N8 que comprende una HA que tiene la SEQ ID NO: 4 o una secuencia de aminoácido que es mayor de 99% idéntica a la SEQ ID NO: 4, con la condición que los aminoácidos en las posiciones 94 y 233 son idénticos a la SEQ ID NO: 4. En particular, la presente invención proporciona un virus de la influenza canina aislado del subtipo H3N8 depositado con the American Type Culture Collection (Manassas, VA) en junio del 29, 2006, como Depósito de Patente No. PTA-7694 De acuerdo con lo anterior, 15 la presente invención también proporciona una composición que comprende virus atenuados así como también una composición que comprende virus inactivos.

Se describen proteínas aisladas o purificadas. Se describe una HA aislada o purificada, que (i) tiene la secuencia de aminoácido de la SEQ ID NO: 4 o (ii) se deriva de un virus de la influenza y que tiene una secuencia de aminoácido que es mayor de 99% idéntica a la SEQ ID NO: 4, con la condición que la secuencia de aminoácido es 20 idéntica a aquella de la SEQ ID NO: 4 en las posiciones de aminoácido 94 y 233, o un fragmento de (i) o (ii), en donde el fragmento comprende por lo menos nueve aminoácidos contiguos, por lo menos uno de los cuales es idéntico al aminoácido en la posición 94 o 233 de la SEQ ID NO: 4.

Se describe una NM aislada o purificada, que (i) comprende la secuencia de aminoácido de la SEQ ID NO: 2 o (ii) se deriva de un virus de la influenza y que comprende una secuencia de aminoácido que es mayor de 99% idéntica a 25 la SEQ ID NO: 2, con la condición que la secuencia de aminoácido es idéntica a aquella de la SEQ ID NO: 2 en las posiciones...

 


Reivindicaciones:

1. Un virus de la influenza canina aislado del subtipo H3N8 depositado con la American Type Culture Collection como Depósito de Patente No. PTA-7694.

2. El virus de la influenza canina aislado de la reivindicación 1, que es inactivo.

3. El virus de la influenza canina aislado de la reivindicación 1, que es atenuado. 5

4. Una composición que comprende el virus de la influenza canina de las reivindicaciones 1, 2 o 3.

5. La composición de la reivindicación 4, en donde el virus de la influenza canina está presente en una cantidad suficiente para inducir una respuesta inmune.

6. La composición de la reivindicación 4, en donde el virus de la influenza canina está presente en una cantidad de 103 a 106 pfu por dosis. 10

7. La composición de la reivindicación 4, donde la cepa atenuada es por lo menos 103 TCID50 por dosis.

8. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, que comprende adicionalmente un portador biológicamente aceptable.

9. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 8, en donde la composición se formula como una composición de liberación controlada. 15

10. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 9, que comprende adicionalmente otros ingredientes activos o composiciones.

11. Uso de la composición de una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 10 para preparar un medicamento para inducir una respuesta inmune al virus de la influenza canina o el tratamiento de una infección vírica de influenza canina. 20


 

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