Un anticuerpo monoclonal anti-CD40 humano que es capaz de unirse específicamente al antígeno CD40,

estando dicho anticuerpo monoclonal exento de actividad agonista significativa cuando se une al antígeno CD40, seleccionándose dicho anticuerpo del grupo constituido por: a) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo capaz de unirse al anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o al anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543; b) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-87 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12; c) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-89 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12; y d) un anticuerpo monoclonal que compite con el anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o el anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543 en un ensayo de unión competitiva. para uso en el tratamiento de un sujeto humano con un tumor sólido que comprende células del carcinoma que expresa el antígeno CD40

Procedimientos de terapia para tumores sólidos que expresan el antígeno de superficie celular CD40.

Campo de la invención

La invención se refiere a medicamentos para el tratamiento, y a procedimientos in vitro para la inhibición del crecimiento de, tumores sólidos usando anticuerpos humanos anti-CD40 antagonistas, comprendiendo los tumores sólidos células del carcinoma que expresan el antígeno de superficie celular CD40.

Antecedentes de la invención

CD40 es un antígeno de superficie celular de 55 kDa presente en la superficie de las células B normales y células B neoplásicas humanas, células dendríticas, células presentadoras de antígenos (APC), células endoteliales, células monocíticas y epiteliales, algunos carcinomas epiteliales y muchos tumores sólidos, incluyendo cánceres de pulmón, mama, ovario y colon. Las células transformadas de pacientes con linfomas de células B de bajo y alto grado, leucemia linfoblástica aguda de células B, mieloma múltiple, leucemia linfocítica crónica y enfermedad de Hodgkin expresan el antígeno CD40. La expresión de CD40 también se detecta en dos tercios de los casos de leucemia mieloblástica aguda y en 50% de los linfomas relacionados con el SIDA. Las células B malignas de diversos tumores de linaje de células B expresan un alto grado de CD40 y parecen depender de la señal de CD40 para la supervivencia y proliferación. Carcinomas que expresan CD40 incluyen carcinoma de vejiga urinaria (Paulie y col. (1989) J. Immunol. 142: 590-595; Braesch-Andersen y col. (1989) J. Immunol. 142: 562-567), carcinoma de mama (Hirano y col. (1999) Blood 93: 2999-3007; Wingett y col. (1998) Breast Cancer Res. Treat. 50: 27-36); cáncer de próstata (Rokhlin y col. (1997) Cancer Res. 57: 1758-1768), carcinoma de células renales (Klutz y col. (1997) Cancer Res. 57: 891-899), carcinoma nasofaringeal no diferenciado (UNPC) (Agathanggelou y col. (1995) Am. J. Pathol. 147: 1152-1160), carcinoma de células escamosas (SCC) (Amo y col. (2000) Eur. J. Dermatol. 10: 438-442; Posner y col. (1999) Clin. Cancer Res. 5: 2261-2270), carcinoma papilar del tiroides (Smith y col. (1999) Thyroid 9: 749-755), melanoma maligno cutáneo (van den Oord y col. (1996) Am. J. Parasol. 149: 1953-1961), mieloma múltiple (Maloney y col. (1999) Semin. Hematol. 36 (1 Suppl 3): 30-33), células de Hodgkin y Reed-Sternberg (células cebadas) (Gruss y col. (1994) Blood 84: 2305-2314), carcinoma gástrico (Yamaguchi y col. (2003) Int. J. Oncol. 23 (6): 1697-702), sarcomas (véase, por ejemplo, Lollini y col. (1998) Clin. Cancer Res. 4 (8): 1843-849, discussing human osteosarcoma and Ewing's sarcoma), y carcinoma de hígado (véase, por ejemplo, Sugimoto y col. (1999) Hepatology 30 (4): 920-26, discussing human hepatocellular carcinoma).

El antígeno CD40 está relacionado con el receptor del factor de crecimiento de los nervios (NGF) humano, el receptor del factor de necrosis tumoral α (TNF-α), y Fas, sugiriendo que CD40 es un receptor para un ligando con funciones importantes en la activación de las células B. Se ha demostrado que juega un papel crítico en el desarrollo y función de las células B normales. La expresión de CD40 en las APC desempeña una función coestimuladora importante en la activación de linfocitos T ayudantes y linfocitos T citotóxicos. El receptor de CD40 se expresa en células T activadas, plaquetas activadas y en células de músculo liso vascular inflamadas. Los receptores de CD40 pueden encontrarse también en eosinófilos, membranas sinoviales en la artritis reumatoide, en fibroblastos dérmicos y en otras células no linfoides. La unión de CDL40 al receptor de CD40 estimula la proliferación y diferenciación de las células B, la producción de anticuerpos, el cambio de isotipo y la generación de memoria de células B. Mediante algunas células del carcinoma muestra altos niveles de expresión de CD40, no se entiende bien el papel de la señalización de CD40 en relación a la expresión de CD40 en estas células de cáncer.

El documento WO-A-96/18413 desvela el tratamiento de carcinomas en células epiteliales, y la prevención de proliferación de células epiteliales, usando un conector del receptor CD40. El conector del receptor de CD40 se puede usar junto con al menos un agente anti-neoplástico y/o inductor de CD40. Se describen anticuerpos inmunoregulatorios en el documento WO-A-02/060485, que describe una terapia de anticuerpo de combinación para el tratamiento de cánceres de células B usando un anticuerpo inmunoregulatorio, especialmente un anticuerpo anti-B7, anti-CD23 o anti-CD40L y un anticuerpo de eliminación de células B, especialmente anti-CD19, anti-CD20, anti-CD22 o anti-CD37.

Se representan una mayoría de casos de cáncer con los denominados tumores sólidos. Dada su alta incidencia, se necesitan procedimientos para el tratamiento de estos cánceres.

Breve resumen de la invención

La invención proporciona un anticuerpo monoclonal anti-CD40 humano que es capaz de unirse específicamente al antígeno CD40, estando dicho anticuerpo monoclonal exento de actividad agonista significativa cuando se une al antígeno CD40, seleccionándose dicho anticuerpo del grupo constituido por:

a) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo capaz de unirse al anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o al anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543;

b) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-87 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12;

c) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-89 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12; y

d) un anticuerpo monoclonal que compite con el anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o el anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543 en un ensayo de unión competitiva,

para uso en el tratamiento de un sujeto humano con un tumor sólido que comprende células del carcinoma que expresa el antígeno CD40.

La invención también proporciona el uso de una cantidad eficaz de un anticuerpo monoclonal anti CD40 humano que es capaz de unirse específicamente al antígeno CD40 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un sujeto humano con un tumor sólido que comprende células de carcinoma que expresan el antígeno CD40, estando dicho anticuerpo monoclonal exento de actividad agonista significativa cuando se une al antígeno CD40, seleccionándose dicho anticuerpo del grupo constituido por:

a) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo capaz de unirse al anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o al anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543;

b) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-87 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12;

c) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-89 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12; y

d) un anticuerpo monoclonal que compite con el anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o el anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543 en un ensayo de unión competitiva.

La invención también proporciona un procedimiento in vitro para inhibir el crecimiento de un tumor sólido que comprende células de carcinoma que expresan el antígeno CD40, comprendiendo dicho procedimiento poner en contacto dichas células con una cantidad eficaz de un anticuerpo monoclonal anti CD40 humano que es capaz de unirse específicamente a dicho antígeno CD40, estando dicho anticuerpo monoclonal exento de actividad agonista significativa cuando se une al antígeno...

1. Un anticuerpo monoclonal anti-CD40 humano que es capaz de unirse específicamente al antígeno CD40, estando dicho anticuerpo monoclonal exento de actividad agonista significativa cuando se une al antígeno CD40, seleccionándose dicho anticuerpo del grupo constituido por:

a) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo capaz de unirse al anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o al anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543;

b) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-87 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12;

c) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-89 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12; y

d) un anticuerpo monoclonal que compite con el anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o el anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543 en un ensayo de unión competitiva.

para uso en el tratamiento de un sujeto humano con un tumor sólido que comprende células del carcinoma que expresa el antígeno CD40.

2. Uso de una cantidad eficaz de un anticuerpo monoclonal anti CD40 humano que es capaz de unirse específicamente al antígeno CD40 en la fabricación de un medicamento para el tratamiento de un sujeto humano con un tumor sólido que comprende células de carcinoma que expresan el antígeno CD40, estando dicho anticuerpo monoclonal exento de actividad agonista significativa cuando se une al antígeno CD40, seleccionándose dicho anticuerpo del grupo constituido por:

a) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo capaz de unirse al anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o al anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543;

b) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-87 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12;

c) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-89 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12; y

d) un anticuerpo monoclonal que compite con el anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o el anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543 en un ensayo de unión competitiva.

3. Un procedimiento in vitro para inhibir el crecimiento de un tumor sólido que comprende células de carcinoma que expresan el antígeno CD40, comprendiendo dicho procedimiento poner en contacto dichas células con una cantidad eficaz de un anticuerpo monoclonal anti CD40 humano que es capaz de unirse específicamente a dicho antígeno CD40, estando dicho anticuerpo monoclonal exento de actividad agonista significativa cuando se une al antígeno CD40, seleccionándose dicho anticuerpo del grupo constituido por:

a) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo capaz de unirse al anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o al anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543;

b) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-87 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12;

c) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-89 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12; y

d) un anticuerpo monoclonal que compite con el anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o el anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543 en un ensayo de unión competitiva.

4. Un anticuerpo monoclonal anti-CD40 humano que es capaz de unirse específicamente al antígeno CD40, estando dicho anticuerpo monoclonal exento de actividad agonista significativa cuando se une al antígeno CD40, seleccionándose dicho anticuerpo del grupo constituido por:

a) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo capaz de unirse al anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o al anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543;

b) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-87 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12;

c) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-89 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12; y

d) un anticuerpo monoclonal que compite con el anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o el anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543 en un ensayo de unión competitiva.

para uso en la inhibición del crecimiento de un tumor sólido que comprende células de carcinoma que expresan antígeno CD40.

5. Uso de una cantidad efectiva de un anticuerpo monoclonal anti-CD40 humano que es capaz de unirse específicamente al antígeno CD40 en la fabricación de un medicamento para la inhibición del crecimiento de un tumor sólido que comprende células de carcinoma que expresa el antígeno CD40, estando dicho anticuerpo monoclonal exento de actividad agonista significativa cuando se une al antígeno CD40, seleccionándose dicho anticuerpo del grupo constituido por:

a) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo capaz de unirse al anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o al anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543;

b) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-87 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12;

c) un anticuerpo monoclonal que se une a un epítopo que comprende los residuos 82-89 de la secuencia de CD40 humano que se muestra en SEC ID Nº 10 ó SEC ID Nº 12; y

d) un anticuerpo monoclonal que compite con el anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o el anticuerpo monoclonal CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543 en un ensayo de unión competitiva.

6. El anticuerpo, uso o procedimiento de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicho anticuerpo o su fragmento de unión al antígeno se selecciona del grupo constituido por:

(i) un anticuerpo o su fragmento de unión al antígeno que comprende un dominio variable de cadena ligera que contiene los residuos 44-54, 70-76 y 109-117 de SEC ID Nº 2 o SEC ID Nº 6;

(ii) un anticuerpo o su fragmento de unión al antígeno que comprende un dominio variable de cadena pesada que contiene los residuos 50-54, 69-84 y 114-121 de SEC ID Nº 4 o SEC ID Nº 7;

(iii) un anticuerpo o su fragmento de unión al antígeno que comprende un dominio variable de cadena ligera que contiene los residuos 46-52, 70-72 y 111-116 de SEC ID Nº 2 o SEC ID Nº 6; y

(iv) un anticuerpo o su fragmento de unión al antígeno que comprende un dominio variable de cadena pesada que contiene los residuos 45-51, 72-74 y 115-120 de SEC ID Nº 4 o SEC ID Nº 7.

7. El anticuerpo, uso o procedimiento de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicho anticuerpo comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo constituido por:

(i) los residuos 21-132 de SEC ID Nº 2;

(ii) los residuos 21-239 de SEC ID Nº 2;

(iii) SEC ID Nº 2;

(iv) los residuos 20-139 de SEC ID Nº 4;

(v) los residuos 20-469 de SEC ID Nº 4;

(vi) SEC ID Nº 4;

(vii) los residuos 20-469 de SEC ID Nº 5;

(viii) SEC ID Nº 5;

(ix) los residuos 21-132 de SEC ID Nº 2 y los residuos 20-139 de SEC ID Nº 4;

(x) los residuos 21-239 de SEC ID Nº 2 y los residuos 20-469 de SEC ID Nº 4;

(xi) los residuos 21-239 de SEC ID Nº 2 y los residuos 20-469 de SEC ID Nº 5;

(xii) SEC ID Nº 2 y SEC ID Nº 4; y

(xiii) SEC ID Nº 2 y SEC ID Nº 5.

8. El anticuerpo, uso o procedimiento de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicho anticuerpo o su fragmento de unión al antígeno comprende una secuencia de aminoácidos seleccionada del grupo constituido por:

(i) los residuos 21-132 de SEC ID Nº 6;

(ii) los residuos 21-239 de SEC ID Nº 6;

(iii) SEC ID Nº 6;

(iv) los residuos 20-144 de SEC ID Nº 7;

(v) los residuos 20-474 de SEC ID Nº 7;

(vi) SEC ID Nº 7;

(vii) los residuos 20-474 de SEC ID Nº 8;

(viii) SEC ID Nº 8;

(ix) los residuos 21-132 de SEC ID Nº 6 y los residuos 20-144 de SEC ID Nº 7;

(x) los residuos 21-239 de SEC ID Nº 6 y los residuos 20-474 de SEC ID Nº 7;

(xi) los residuos 21-239 de SEC ID Nº 6 y los residuos 20-474 de SEC ID Nº 8

(xii) SEC ID Nº 6 y SEC ID Nº 7; y

(xiii) SEC ID Nº 6 y SEC ID Nº 8.

9. El anticuerpo, uso o procedimiento de cualquier reivindicación precedente, en el que dicho anticuerpo es el anticuerpo monoclonal CHIR-5.9 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5542 o CHIR-12.12 que puede obtenerse de la línea celular de hibridoma depositada en la ATCC como Depósito de Patente Nº PTA-5543.

10. El anticuerpo, uso o procedimiento de cualquier reivindicación precedente, en el que dicho tumor sólido se selecciona del grupo constituido por carcinoma de pulmón, carcinoma de mama, carcinoma de ovarios, carcinoma de piel, carcinoma de colon, carcinoma de la vejiga urinaria, carcinoma de hígado, carcinoma gástrico, cáncer de próstata, carcinoma de células renales, carcinoma nasofaringeal, carcinoma de células escamosas, carcinoma papilar de tiroides carcinoma de cuello uterino y sarcomas.

11. El anticuerpo, uso o procedimiento de la reivindicación 10, en el que dicho medicamento se administra en un procedimiento que comprende además la administración a dicho sujeto de al menos otro protocolo de terapia contra cáncer seleccionado del grupo constituido por cirugía, terapia con radiación; quimioterapia, terapia con citocina, u otro anticuerpo monoclonal concebido para su uso en el tratamiento de dicho tumor sólido.

12. El anticuerpo, uso o procedimiento de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en el que dicho anticuerpo monoclonal es un fragmento de unión al antígeno de un anticuerpo monoclonal, en el que dicho fragmento retiene la capacidad de unirse específicamente a dicho antígeno CD40 humano.

13. El anticuerpo, uso o procedimiento de la reivindicación 12, en el que dicho fragmento de anticuerpo de unión al antígeno se selecciona del grupo constituido por un fragmento Fab, un fragmento F(ab')₂, un fragmento Fv y un fragmento Fv de cadena única.

14. El anticuerpo, uso o procedimiento de cualquier reivindicación precedente, en el que dicho anticuerpo monoclonal o su fragmento de unión al antígeno se une al antígeno CD40 humano con una afinidad (K_D) de al menos 10^-6 M.

15. El anticuerpo, uso o procedimiento de la reivindicación 14, en el que dicho anticuerpo monoclonal o su fragmento de unión al antígeno se une al antígeno CD40 humano con una afinidad (K_D) de al menos 10^-8 M.

16. El anticuerpo, uso o procedimiento de cualquier reivindicación precedente, en el que dicho anticuerpo monoclonal o su fragmento de unión al antígeno se produce en una línea celular CHO.