FORMULACION DE FIBRINOGENO LIQUIDA, ESTABLE EN ALMACENAMIENTO.

Formulación de fibrinógeno líquida o líquida-viscosa, estable en almacenamiento,

caracterizada porque, junto al fibrinógeno, están contenidos iones de metales bivalentes en una concentración de hasta de 100 mM y un agente formador de complejos, y la formulación de fibrinógeno es estable durante por lo menos 1 mes a unas temperaturas de almacenamiento comprendidas entre 0 y 30ºC

Formulación de fibrinógeno líquida, estable en almacenamiento.

El presente invento se refiere a una nueva formulación estable en almacenamiento para el fibrinógeno en una forma líquida o líquida viscosa, que contiene iones de metales bivalentes y un agente formador de complejos. La formulación de fibrinógeno puede contener otros usuales componentes de formulaciones. Además, el invento se refiere a la utilización de las formulaciones de fibrinógeno conformes al invento.

El fibrinógeno es una proteína, que se forma predominantemente en el hígado y que constituye aproximadamente un 2-3% del contenido de proteínas plasmáticas sanguíneo. Él desempeña un cometido clave en la coagulación de la sangre. En el caso de heridas o de operaciones quirúrgicas, casi siempre son dañados algunos vasos sanguíneos, y resultan hemorragias. Mediante la coagulación de la sangre, esta sangre se solidifica en la zona de pequeñas heridas, y la hemorragia se interrumpe. El sistema de coagulación protege al cuerpo de este modo frente a elevadas pérdidas de sangre. En el caso de la coagulación de la sangre, el fibrinógeno soluble, que está contenido en el plasma sanguíneo, es transformado en la fibrina insoluble, a modo de fibras, y contribuye de esta manera a conferir su estabilidad definitiva al trombo. La transformación del fibrinógeno en fibrina se efectúa en presencia de trombina. La trombina es puesta en libertad en la sangre, al producirse lesiones, a través de un complicado sistema de reacciones en cadena, en el que participan muchos diferentes factores de la coagulación.

A causa de su importancia para el restañamiento de la sangre y la cicatrización de heridas, el fibrinógeno tiene una gran importancia en la aplicación clínica.

Si falta fibrinógeno, entonces la coagulación de la sangre no funciona correctamente. Se puede compensar este defecto administrando un fibrinógeno, p.ej. aislado a partir de un plasma sanguíneo humano. Un defecto de fibrinógeno puede ser provocado p.ej. por unas heridas de gran área (p.ej. en el caso de quemaduras graves), por una coagulación intravasal diseminada, o por hemorragias fuertes. Al fibrinógeno le corresponde una gran importancia también como componente de un pegamento de fibrina, en el que el fibrinógeno es transformado por regla general en fibrina mediante la adición de una solución de trombina, que contiene calcio. Un tal pegamento se emplea, por ejemplo, para el aseguramiento o para la hermetización de suturas, de manera preferida en el caso de intervenciones quirúrgicas. Especialmente también en el caso de órganos de partes blandas, tales como el hígado o el bazo, él se puede emplear ventajosamente para la consecución del restañamiento de la sangre o de la estanqueización.

La estabilidad de las proteínas es un problema general en la industria farmacéutica, que se debe de solucionar de nuevo en detalle para cada proteína. En dependencia de la proteína, ciertos componentes individuales de la formulación pueden tener una gran influencia sobre la estabilidad, pudiendo los componentes de formulación ser dependientes también de la forma de almacenamiento que se planea, y de la temperatura de almacenamiento.

Frecuentemente, las proteínas son liofilizadas mediando adición de determinadas sustancias auxiliares y almacenadas en una forma seca. En este caso, se debe de evitar en lo posible una pérdida de estabilidad durante la desecación y, también al realizar la reconstitución, no se debería llegar a ninguna pérdida del efecto. Unos posibles problemas al realizar la reconstitución son p.ej. la formación de copos o respectivamente de enturbiamientos, o unos largos períodos de tiempo hasta llegarse a la disolución total de la proteína, en particular en el caso de altas concentraciones de la proteína. Por lo tanto, es ventajoso que se pueda evitar esta etapa. La congelación de muestras de proteínas, que se utiliza frecuentemente de un modo alternativo, tiene las desventajas de que la descongelación y el calentamiento requieren cierto tiempo, o de que se deben de garantizar unas temperaturas de almacenamiento situadas por debajo de 0ºC, y de que una congelación y una descongelación repetidas múltiples veces están vinculadas en la mayoría de los casos con pérdidas de efecto.

Una gran ventaja consiste, en el caso de una conservación en forma líquida, por consiguiente de un modo general y en particular también para la formulación de fibrinógeno, en la posibilidad de empleo inmediato de la sustancia activa en un paciente, puesto que es superflua la dedicación de tiempo para la reconstitución de las formulaciones liofilizadas o respectivamente para la descongelación y el calentamiento de las formulaciones congeladas. Sin embargo, también en el caso de un almacenamiento intermedio como un material liofilizado o en el estado congelado es ventajoso que la formulación de fibrinógeno reconstituida o respectivamente descongelada, que se presenta entonces en una forma líquida, sea estable todavía durante un período de tiempo más prolongado. Este hecho se pone de manifiesto, por ejemplo, en unas situaciones en donde p.ej. para intervenciones quirúrgicas que se había reconstituido de un modo preventivo un material, pero entonces su empleo no era necesario por causa de consideraciones médicas. Este material, en el caso de tener una estabilidad solamente a corto plazo, se debería desechar y ya no podría pasar a emplearse en un momento posterior. Una pérdida de material condicionada por la estabilidad se ha de evitar sin embargo en particular cuando se trata de unas sustancias terapéuticas, que proceden de donaciones humanas, puesto que éstas sólo están disponibles en unas cantidades limitadas. El fibrinógeno se cuenta entre estas sustancias, puesto que se obtiene predominantemente a partir de un plasma sanguíneo humano.

En el caso de la utilización de pegamentos de fibrina es en particular ventajoso que el fibrinógeno se presente en una forma líquida. En el caso de los pegamentos obtenibles comercialmente se trata en la mayoría de los casos de dos componentes. Uno de los componentes comprende un fibrinógeno, frecuentemente en común con el factor XIII y la aprotinina, y el otro componente comprende trombina, frecuentemente en común con iones de calcio. La reconstitución, con el fin de que el pegamento esté presto para el empleo, requiere un período de tiempo relativamente largo, toda vez que el fibrinógeno se presenta en altas concentraciones. Una puesta a disposición preventiva del pegamento implica, no obstante, la desventaja de que la eficiencia del pegamento disminuye o incluso de que éste se vuelve en su totalidad inútil, incluso en el caso de que la solución que contiene trombina permaneciese en estado estable.

Otra gran ventaja adicional de la formulación de fibrinógeno conforme al invento en una forma líquida o líquida-viscosa es la estabilidad frente al envejecimiento, con lo cual se pueden mejorar la posibilidad de un almacenamiento durante un determinado período de tiempo también a la temperatura ambiente, y por consiguiente, las propiedades de uso en situaciones de emergencia. También en los casos de unas largas rutas de envío, en las que unas bajas temperaturas no se pueden garantizar constantemente, es ventajoso que la estabilidad esté garantizada también a la temperatura ambiente durante un prolongado período de tiempo. En casos infrecuentes, en los que se presenta un defecto crónico de fibrinógeno (p.ej. en el caso de perturbaciones congénitas de la síntesis de fibrinógeno), puede llegar a ser también ventajoso que el fibrinógeno se pueda aportar continuamente al paciente, lo que presupone que la solución de fibrinógeno se lleve cerca del cuerpo, correspondientemente a una temperatura de almacenamiento de aproximadamente 30ºC.

Las formulaciones líquidas estables de fibrinógeno facilitan, por lo tanto, en muchos aspectos la preparación, el uso, el transporte y la administración al paciente.

Existen unas publicaciones acerca de proteínas plasmáticas y factores de la coagulación, en las que se muestra que, junto a otros componentes, también se puede utilizar calcio en unas formulaciones líquidas. En este contexto se ha de remitir, por ejemplo, al documento de solicitud de patente internacional WO 96/30041 y al documento de patente de los EE.UU. US 5.925.738, en donde se llevaron a cabo unas investigaciones acerca de la estabilidad en formulaciones líquidas del factor VIII y/o del factor FIX. Unas actividades disminuidas del factor VIII o respectivamente del factor FIX causan la hemofilia A o respectivamente B. Para el factor VIII, p.ej. la asociación de las cadenas...

1. Formulación de fibrinógeno líquida o líquida-viscosa, estable en almacenamiento, caracterizada porque, junto al fibrinógeno, están contenidos iones de metales bivalentes en una concentración de hasta de 100 mM y un agente formador de complejos, y la formulación de fibrinógeno es estable durante por lo menos 1 mes a unas temperaturas de almacenamiento comprendidas entre 0 y 30ºC.

2. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque en el caso de los iones de metales bivalentes se trata de iones de calcio, iones de zinc o de mezclas de ambos.

3. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2, caracterizada porque los iones de metales bivalentes se presentan en una concentración hasta de 40 mM y de manera especialmente preferida entre 0,02 y 10 mM.

4. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque en el caso del agente formador de complejos se trata de un citrato.

5. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con la reivindicación 1 ó 4, caracterizada porque el agente formador de complejos se presenta en una concentración más alta que los iones de metales bivalentes.

6. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 ó 4 ó 5, caracterizada porque el agente formador de complejos se presenta en unas concentraciones hasta de 150 mM, pero de manera preferida hasta de 50 mM y de manera preferida en particular hasta de 20 mM.

7. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizada porque ella contiene uno o varios componentes de formulación adicionales, escogidos entre el conjunto que se compone de sales de metales univalentes, aminoácidos, sustancias auxiliares de liofilización, detergentes, agentes inhibidores de la fibrinólisis, agentes inhibidores de la fibrinogenólisis, agentes inhibidores de proteasas, proteínas plasmáticas, hidratos de carbono, agentes antioxidantes, sustancias tamponadoras y/o agentes caótropos o sus mezclas.

8. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con la reivindicación 7, caracterizada porque en el caso de las proteínas plasmáticas se trata del factor XIII, de la fibronectina, de una albúmina de suero, del factor de von Willebrand y/o de factores del crecimiento.

9. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con las reivindicaciones 7 u 8, caracterizada porque ella contiene cloruro de calcio, citrato de sodio, cloruro de sodio y arginina.

10. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con las reivindicaciones 7 u 8, caracterizada porque ella contiene cloruro de calcio, citrato de sodio, cloruro de sodio, arginina y aprotinina o el agente inhibidor de C1.

11. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con las reivindicaciones 7 u 8, caracterizada porque ella contiene cloruro de calcio, citrato de sodio, cloruro de sodio, arginina y una albúmina.

12. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 11, caracterizada porque ella tiene un valor del pH de 5,0 - 8,0.

13. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con la reivindicación 12, caracterizada porque ella tiene un valor del pH de 6,5 a 7,5.

14. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 13, estando caracterizada la formulación de fibrinógeno porque es estable a 0-30ºC, de manera preferida a 2 hasta 8ºC, durante un período de tiempo de por lo menos 3 meses.

15. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con la reivindicación 14, estando caracterizada la formulación de fibrinógeno porque es estable a 0 hasta 30ºC, de manera preferida a 2 hasta 8ºC, durante un período de tiempo de por lo menos 6 meses.

16. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con la reivindicación 14, estando caracterizada la formulación de fibrinógeno porque es estable a 0 hasta 30ºC, de manera preferida a 2 hasta 8ºC, durante un período de tiempo de por lo menos 24 meses.

17. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 16, caracterizada porque el fibrinógeno utilizado se había sometido a uno o varios procedimientos de desactivación de virus o respectivamente de empobrecimiento en cuanto a virus.

18. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 16, caracterizada porque se utiliza un fibrinógeno recombinante.

19. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 16, caracterizada porque el fibrinógeno se había aislado a partir de un plasma sanguíneo.

20. Formulación de fibrinógeno de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 19, caracterizada porque ella tiene un valor del pH de 6,0 - 8,0.

21. Utilización de una formulación de fibrinógeno de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 19 como una formulación destinada al tratamiento de estados de defecto de fibrinógeno.

22. Utilización de una formulación de fibrinógeno de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 19 como un componente de un pegamento de fibrina.

23. Utilización de una formulación de fibrinógeno de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 19 como un componente para la producción de una matriz de fibrina.

24. Utilización de una formulación de fibrinógeno de acuerdo con una de las reivindicaciones 1 a 19 como un agente de diagnóstico.