UN PROCESO PARA EL RESCATE DE ADN Y PARA DETECTAR MUTACIONES EN GENES MARCADORES.

ESTA INVENCION SE REFIERE A UN PROCESO PARA LA CLONACION DE UNA SECUENCIA DE ADN EN DONDE UN VECTOR QUE CONTIENE DICHA SECUENCIA DE ADN SE MULTIPLICA EN UN HUESPED BACTERIANO ADECUADO.

COMO HUESPED BACTERIANO SE UTILIZA LA CEPA BACTERIANA QUE ES INCAPAZ DE RESTRINGIR HUESPEDES, TAL COMO UNA CEPA C DE ESCHERICHIA COLI. PREFERENTEMENTE, COMO VECTOR SE UTILIZA UN VECTOR BACTERIOFAGO QUE SEA UN VEHICULO DE CLONACION ADECUADO PARA EL HUESPED EN CUESTION, REALIZANDOSE EL PASO DE EMPAQUETAMIENTO IN VIVO EN REVESTIMIENTOS DE FAGOS MEDIANTE UN EXTRACTO DE EMPAQUETAMIENTO DE FAGOS OBTENIDO A PARTIR DE UNA CEPA BACTERIANA QUE ES INCAPAZ DE RESTRINGIR HUESPEDES. LA INVENCION SE PUEDE UTILIZAR EN UN PROCESO PARA DETECTAR LAS MUTACIONES PRODUCIDAS EN UNO O MAS GENES MARCADORES INTRODUCIDOS EN UN GENOMA MAMIFERO MEDIANTE LA UTILIZACION DE UN VECTOR, CUYO PROCESO CONSISTE EN SEPARAR EL ADN DE LAS CELULAS DEL MAMIFERO TRANSGENICO O DE LAS CELULAS MAMIFERAS, RECUPERAR EL VECTOR DE DICHO ADN, MULTIPLICAR EL VECTOR EN UN HUESPED BACTERIANO ADECUADO QUE RESULTA DEFICIENTE RESPECTO A AL MENOS UNO DE LOS GENES MARCADORES Y ANALIZAR LA EXPRESION DEL GEN MARCADOR. PREFERENTEMENTE, EL ADN AISLADO DE LAS CELULAS DEL MAMIFERO TRANSGENICO O DE LAS CELULAS MAMIFERAS SE PREPURIFICA A BASE DE FRAGMENTAR EL ADN MEDIANTE UNA ENZIMA DE RESTRICCION QUE NO CONTENGA UN LADO CORTANTE DENTRO DEL VECTOR, SE SEPARAN LOS FRAGMENTOS RESULTANTES EN BASE A UN CRITERIO ADECUADO, TAL COMO POR TAMAÑOS Y SE RECOGEN LOS FRAGMENTOS QUE CONTIENEN EL VECTOR, TRAS LO CUAL SE RECUPERA EL VECTOR DE DICHO ADN PREPURIFICADO.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: NEDERLANDSE ORGANISATIE VOOR TOEGEPAST-NATUURWETENSCHAPPELIJK ONDERZOEK TNO.

Nacionalidad solicitante: Países Bajos.

Dirección: JULIANA VAN STOLBERGLAAN 148,NL-2595 CL THE HAGUE.

Inventor/es: VIJG, JAN, GOSSEN, JAN ALBERT.

Fecha de Publicación: 16 de Marzo de 1996.

Fecha Concesión Europea: 3 de Enero de 1996.

Clasificación Internacional de Patentes:

C12N15/00 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K).
C12N15/10 C12N […] › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Procedimientos para el aislamiento, la preparación o la purificación de ADN o ARN (preparación química de ADN o ARN C07H 21/00; preparación de polinucleótidos no estructurales a partir de microorganismos o con la ayuda de enzimas C12P 19/34).
C12N15/73 C12N 15/00 […] › Sistemas de expresión que utilizan secuencias reguladoras del fago l.
C12N15/85 C12N 15/00 […] › para células animales.
C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.

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