PROCEDIMIENTO PARA LA DETERMINACION DE PIRUVATO.

PROCEDIMIENTO PARA LA DETERMINACION DE PIRUVATO.CONSISTE EN: A) UTILIZAR UN REACTIVO QUE CONSTA DE UN EMPAREDADO DE HOJAS Y LAMINAS DE SOPORTE Y QUE CONTIENE PIRUVATOXIDASA,

FOSFATO, TAMPONADOR Y UN SISTEMA PARA LA DETERMINACION DEL H2O2, QUE DESCARBOXILA AL PIRUVATO POR LA ACCION DE LA PIRUVATOXILASA, CON FORMACION DE H2O2; Y B) MEDIR EL H2O2 FORMADA O EL O2 CONSUMIDO. LA PIRUVATOXIADASA SE OBTIENE DISGREGANDO UN MICROORGANISMO COMO LACTOBACILLUS PLANTARUM DSM 2571 Y OTROS, QUE CONTIENE LA ENZIMA, A CONTINUACION LA FASE DISGREGADA SE DILUYE EN AGUA Y SE MEZCLA TODO CON POLIETILAMINA, SEPARANDO Y PURIFICANDO LAS PORCIONES SOLUBLES: SE ACTIVA SIN ADICION DE FAD, TPP E IONES METALICOS DIVALENTES; TIENE UN OPTIMO DE ACTIVIDAD A PH DE 5,7; UN OPTIMO DE ESTABILIDAD A PH DE 5,6 A 5,8; UN KM PARA PIRUVATO A 25JC DE 0,4 MMOL/L; UN KM PARA FOSFATOS A 25JC DE 2,3 MMOL/L Y UN PESO MOLECULAR DE 146.000 DALTON. EL SISTEMA DE DETERMINACION DE H2O2 CONSTA DE PIRUVATOXIDASA Y COMO INDICADOR A) 4-AMINOANTIPIRINA Y ACIDO 2-HIDROXI-3,5-DICLORO-BENCENO-SULFONICO.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: BOEHRINGER MANNHEIM GMBH.

Nacionalidad solicitante: Alemania.

Dirección: D-6800 MANNHEIM-WALDHOF, SANDHOFERSTRASSE 112-132, ALEMANIA.

Fecha de Solicitud: 24 de Febrero de 1984.

Fecha de Publicación: .

Fecha de Concesión: 12 de Julio de 1984.

Clasificación Internacional de Patentes:

  • G01N33/52 FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Utilización de compuestos o de composiciones para investigaciones colorimétricas, espectrofotométricas o fluorométricas, p. ej. utilización de cintas de papel indicador.

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