Derivados de purina como inhibidores de Dapk-1.

Derivados de purina como inhibidores de DAPK-1.

La presente invención describe una nueva familia de derivados de purina que actúan como inhibidores selectivos de DAPK1. Se describe también el proceso para la obtención de los compuestos farmacéuticos y su uso como medicamento para el tratamiento o la profilaxis de enfermedades que precisan la inhibición de DAPK1

, especialmente para el tratamiento del cáncer.

Tipo: Patente de Invención. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: P201400229.

Solicitante: UNIVERSIDAD DE GRANADA.

Nacionalidad solicitante: España.

Inventor/es: MOLINA PINEDA DE LAS INFANTAS,Ignacio, TORRES RUSILLO,Sara, FERNÁNDEZ RUBIO,Pablo, PINEDA DE LAS INFANTAS Y VILLATORO,María José, DÍAZ MOCHÓN,Juan José, UNICITI BROCETA,Asier.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales que contienen ingredientes... > A61K31/52 (Purinas, p. ej. adenina)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > COMPUESTOS HETEROCICLICOS (Compuestos macromoleculares... > Compuestos heterocíclicos que contienen sistemas... > C07D473/34 (unido en posición 6, p. ej. adenina)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > COMPUESTOS HETEROCICLICOS (Compuestos macromoleculares... > Compuestos heterocíclicos que contienen sistemas... > C07D473/30 (unido en posición 6, p. ej. hipoxantina)

PDF original: ES-2548927_A1.pdf

 

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Derivados de purina como inhibidores de Dapk-1.
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Fragmento de la descripción:

DERIVADOS DE PURINA COMO INHIBIDORES DE DAPK-1

CAMPO TÉCNICO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a una nueva familia de derivados de purina. Estos compuestos son inhibidores selectivos de DAPK1. Por lo tanto la presente invención, también se relaciona con el proceso para la obtención de los compuestos farmacéuticos y su uso como medicamentos para el tratamiento o la profilaxis de enfermedades que precisan la inhibición de DAPK1, especialmente para el tratamiento del cáncer.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Cinasas en cáncer

En todo el mundo, se están aunando esfuerzos para comprender las bases moleculares del cáncer, con el fin de mejorar las estrategias terapéuticas para el tratamiento del mismo [Weinberg, R. A.- Oncogenes, antioncogenes, and the molecular bases of multistepcarcinogenesis. Cáncer Res. 1989,49, 3713-3721] [Vaccaro, V.; Gelibter, A.; Bria, E.; Iapicca, P.; Cappello, P.; Di, M. R; Pino, M. S.; Nuzzo, C.; Cognetti, F.; Novelli, F.; Nistico, P.; Milella, M.- Molecular and genetic bases of pancreadc cáncer. Curr.Drug Targets.2012, 13, 731-743.]. En este campo en particular, las proteínas cinasas, pueden ser consideradas la base o piedra angular de la mayoría de estos mecanismos moleculares. Las proteínas cinasas controlan las vías y redes de señalización y comunicación intercelular, por lo que juegan un papel fundamental en la regulación de las funciones celulares básicas y coordinación de las acciones de las células. Como consecuencia, las cinasas están directamente involucradas en enfermedades progresivas, incluyendo el cáncer. Por tanto, la inhibición de cinasas por moléculas de pequeño tamaño es una forma muy atractiva para el desarrollo de nuevos fármacos antitumorales y para dilucidar nuevas vías moleculares implicadas en el cáncer [Xi, L.; Zhang, J. Q.; Liu, Z. C.; Zhang, J. H.; Yan, J. F.; Jin, Y.; Lin, J.- Novel 5-anilinoquinazoline-8-nitro derivatives as inhibítors of VEGFR-2 tymsinekinase: synthesis, biologicalevaluation and molecular docking. Org. Biomol. Chem. 2013, 11, 4367-4378], De hecho diez moléculas pequeñas que actúan como inhibidores de cinasas han sido aprobadas por la FDA durante los últimos cinco años, para su uso como fármacos antitumorales en humanos.

Se han caracterizado hasta la fecha un total de 518 proteínas cinasas que forman parte del llamado cinoma humano [Manning, G.; Whyte, D. B.; Martínez, R; Hunter, T.; Sudarsanam, S.- The protein kinase complement of the human genome. Science 2002, 298, 1912-1934.]. Esto

significa que hay un amplio campo en el que investigar para conocer las dianas farmacológicas y las rutas biológicas relacionadas con el cáncer que por el momento son desconocidas. Para hacer frente a este reto, deben prepararse nuevas colecciones de pequeñas moléculas y ensayarlas para modular la actividad de las cinasas en sistemas celulares y bioquímicos. Como la mayoría de las pequeñas moléculas inhibidoras de cinasas que poseen un resto que se une al sitio de unión del ATP. Las colecciones de purinas poseen diferentes sustituyentes para tener mayor probabilidad de obtener compuestos bioactivos como inhibidores de cinasas [Huang, H.; Ma, J.; Shi, J.; Meng, L.; Jiang, H.; Ding, J.; Liu, H.- Discoveiy of novelpurine derivatives with potent and selective inhibitoiy activity against c-Srctyrosinekinase.Bioorg. Med. Chem. 2010, 18,4615-4624.] y, por tanto, los compuestos derivados de purinas han sido objeto de un amplio estudio en la química médica.

Hasta la fecha, la forma clásica para analizar estas colecciones es testar los compuestos frente a dianas identificadas previamente y después ensayar la selectividad frente a otras cinasas. Sin embargo, y gracias a los avances tecnológicos, se ha hecho más fácil ensayar compuestos frente a distintas fracciones del cinoma humano. Este concepto fue estudiado por el grupo de Petterson en el año 2011, con sus ensayos de actividad catalítica cinasa para mostrar la selectividad del inhibidor [Anastassiadis, T.; Deacon, S. W.; Devarajan, K.; Ma, H.; Peterson, J. R.- Comprehensive assay of kinase catalytic activity reveáis features of kinase inhibitor selectivity. Nat. Biotechnol. 2011, 29, 1039-1045]. En este estudio, se ensayaron 178 moléculas pequeñas inhibidoras de cinasas frente a 300 proteínas cinasas recombinantes. Los resultados mostraron algunas interacciones inesperadas lo cual demostraba posibles interacciones con otras cinasas no seleccionadas. Este estudio pone de manifiesto que hay que considerar que puede haber una potencial desviación de los resultados de los ensayos de estas pequeñas moléculas sobre las cinasas seleccionadas.

Función de DAPK1 orientado hacia células tumorales.

DAPK1 (Proteína cinasa asociada a muerte celular 1) es un mediador positivo de gamma interferón que induce muerte celular programada o apoptosis mediada por esta citocina [Deiss, L. P.; Feinstein, E.; Berissi, H.; Cohén, O.; Kimchi, A.- Identification of a novel serlne/threonine kinase and a novel 15-kD protein as potential mediators of the gamma interferon-induced celldeath. Genes Dev. 1995, 9, 15-30. Cohén, O.; Feinstein, E.; Kimchi, - A. DAP-kinase is a Ca2+/calmodulin-dependent, cytoskeletal-associatedprotein kinase, with cell death-inducing functions that depend on its catalytic activity. EMBO J. 1997, 16, 998-

1008. Cohén, O.; Inbal, B.; Kissil, J. L.; Raveh, T.; Berissi, H.; Spivak-Kroizaman, T.; Feinstein, E.; Kimchi, A.- DAP-kinase partlcipates in TNF-a-and Fas-lnduced apoptosis and its function requives the death domain.1. CellBiol. 1999, 146, 141-148.].

La eliminación por recombinación homologa del gen DAPK-1 en un modelo de ratón confirió protección neuronal frente al daño cerebral producido por la isquemia, debido a la interrupción de la interacción con el receptor NMDA [Tu, W.; Xu, X.; Peng, L.; Zhong, X.; Zhang, W.; Soundarapandian, M. M.; Balel, C.; Wang, M.; Jia, N.; Zhang, W.; Lew, F.; Chan, S. L.; Chen, Y.; Lu, Y.- DAPK1 interaction with NMDA receptor NR2B subunits mediates brain damage in stroke. Cell 2010, 140, 222-234.] lo que sugiere posibles aplicaciones clínicas de la diana DAPK-1. Este estudio demuestra por primera vez que la inhibición selectiva de DAPK-1 puede tener incidencia en la biología de las células tumorales.

El papel relevante de DAPK-1 en las vías proapoptóticas es destacado por el hecho de que muchas células de leucemia linfocítica crónica regulan negativamente la expresión de la proteína y favorecen la progresión tumoral [Kissil, J. L.; Feinstein, E.; Cohén, O.; Jones, P. A.; Tsai, Y. C.; Knowles, M. A.; Eydmann, M. E.; Kimchi, A.DAP-kinase loss ofexpression in varíous carcinoma and B-cell lymphoma cell lines: possible implications for role as tumor suppressor gene. Oncogene 1997, 15, 403-407. Raval, A.; Tanner, S. M.; Byrd, J. C.; Angerman, E. B.; Perko, J. D.; Chen, S. S.; Hackanson, B.; Grever, M. R.; Lucas, D. M.; Matkovic, J. J.; Lin, T. S.; Kipps, T. J.; Murray, F.; Weisenburger, D.; Sanger, W.; Lynch, J.; Watson, R; Jansen, M.; Yoshinaga, Y.; Rosenquist, R.; de Jong, P. J.; Coggill, P.; Beck, S.; Lynch, H.; de la, C. A.; Plass, C.- Downregulation of death-associated protein kinase 1 (DAPK1) in chronic lymphocytic leukemia. Cell 2007, 129, 879-890].

La función de esta enzima está sujeta a un mecanismo complejo. La actividad proapoptótica de la enzima necesita la integridad del "Dominio de Muerte" [Cohén O, Inbal B, Kissil JL, Raveh T, Berissi H, Spivak-Kroizaman T, Feinstein E, Kimchi A. DAP-kinase participates in TNF-alpha- and Fas-induced apoptosis and its function requires the death domainJ. Cell Biol. 1999, 146, 141-148], pero los datos indican que las modificaciones post- transcripsionales pueden dar lugar a funciones opuestas en la proteína. Por ejemplo, la autofosforilación frena la actividad... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Compuesto de fórmula general (I):

**(Ver fórmula)**

Y

**(Ver fórmula)**

Ri

N

r3

(I)

donde

Ri se selecciona del grupo formado por H, cadenas alquílicas de 1 a 6 átomos de carbono, lineales o ramificadas y radicales aromáticos sustituidos o no;

R2 se selecciona del grupo formado por H, cadenas alquílicas de 1 a 6 átomos de carbono, lineales o ramificadas, radicales aromáticos sustituidos o no y radicales arilalquilo sustituidos o no.

R3 puede ser H, cadenas alquílicas de 1 a 6 átomos de carbono, lineales o ramificadas o radicales aromáticos sustituidos o no y radicales arilalquilo sustituidos o no.

X se selecciona del grupo formado por -0-,-NH-,-S- y -CH2-e

Y se selecciona del grupo formado por -H,-OH,-NH2,-SH, halógeno, nitro, alquiltio, alquiloxi, alquilamino, ariltio, ariloxi y arilamino;

y cualquiera de los tautómeros, estereoisómeros, sales, solvatos, hidratos o profármacos de los mismos,pudiendo ser Ri y R2 iguales o no.

2. Un compuesto, según la reivindicación anterior, donde Ri se selecciona del grupo formado por H, cadenas alquílicas de 1 a 3 carbonos, lineales o ramificadas, fenilos sustituidos o no y bencilos sustituidos o no

3. Un compuesto según la reivindicación 2, donde Ri se selecciona del grupo formado por H, metilo, etilo, fenilo, metoxifenilo e isopropilo

4. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, donde R2 se selecciona del

grupo formado por cadenas alquílicas de 1 a 4 átomos de carbono lineales o ramificadas y sustituidas o no.

5. Un compuesto según la reivindicación 4, donde R2 puede ser etilo, propilo lineal o

5 ramificado, butilo lineal o ramificado, bencilo y metoxibencilo.

6. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, donde R3 puede ser cadenas alquílicas de 1 a 4 átomos de carbono lineales o ramificadas y sustituidas o no.

10 7. Un compuesto según la reivindicación 6, donde R3 puede ser propilo, lineal o ramificado,

butilo, lineal o ramificado y bencilo.

8. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, donde X puede ser: -O-, -NH-, -S-, -CHj-y preferentemente, X = -O-.

9. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, donde Y=H.

10. Un compuesto según la reivindicación 1 seleccionado del grupo de Fórmula general I donde X, Y, Ri, R2y R3 pueden ser los siguientes grupos:

X

Y

Ri

R*

R3

0

H

H

Et

'Pr

0

H

Et

Et

;Pr

0

H

Me

Et

'Pr

0

H

H

Bn

'Pr

0

H

Me

Bn

;Pr

0

H

H

Et

Bn

0

H

Me

Et

Bn

0

H

Et

Et

Bn

0

H

H

Bn

Bn

0

H

H

'Pr

'Pr

0

H

Me

'Pr

'Pr

0

H

H

(Bu

'Pr

0

H

H

Me

'Pr

0

H

H

Et

fBu

0

H

Ph

Bn

'Pr

0

H

Ph

Bn

fBu

0

H

3-MeOPh

3-MeOPhCH2

/pr

0

H

3-MeOPh

3-MeOPhCH2

fBu

0

H

H

Me

'Pr

0

H

Me

Et

'Pr

0

H

Me

Et

'Pr

0

H

Et

Pr

'Pr

0

H

'Pr

'Bu

'Pr

11. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones l,del tipo

**(Ver fórmula)**

12. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 para su uso como medicamento.

13. Un compuesto según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 para su uso como medicamento para el tratamiento de enfermedades o afecciones mediadas por DAPK1.

10 14. Un compuesto, según la reivindicación anterior, donde la enfermedad o afección sea

cáncer y preferentemente leucemia.

15. Una composición farmacéutica que comprende una cantidad terapéuticamente aceptable de al menos uno de los compuestos de Fórmula general (I) o cualquiera de sus tautómeros, estereoisómeros, sales, solvatos, hidratos o profármacos según reivindicaciones 1 a 11 y al menos un transportador, coadyuvante o vehículo aceptable

5 farmacológicamente.

16. Un procedimiento para sintetizar un compuesto de Fórmula (I), como se definió en cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, que comprenda las siguientes etapas:

a) Proporcione una dimetilamida de fórmula:

M'

/

b) Añadir un alcohol de fórmula

R2 HO

c) adicionar hidruro sódico

d) adicionar 6-cloro-4,5-diaminopirimidina de fórmula:

Cl

**(Ver fórmula)**

I

e) obtención de un crudo de Fórmula (I);

En el que en las etapas anteriores a) hasta d) se pueda calentar y usar disolventes orgánicos tales como dioxano y tetrahidrofúrano y Ri, R2, R3 e Y tienen los significados indicados 20 sobre los compuestos de Fórmula I.