Métodos de replegado de proteínas basados en filtración de flujo tangencial.

Un método para el replegado de una proteína desnaturalizada, que comprende

combinar la proteína desnaturalizada con un tampón de solubilización que comprende un agente desnaturalizante,

para obtener una primera composición de proteína que comprende proteína desnaturalizada solubilizada, en donde la proteína desnaturalizada comprende una región Fc y un dominio de soporte a base de fibronectina;

diafiltrar la primera composición de proteína que comprende priteína desnaturalizada solubilizada con 2-4 diavolúmenes de un tampón de replegado que tiene un pH en el intervalo de 9 a 11 para obtener una segunda composición de proteína que comprende proteína parcialmente replegada; e

incubar la segunda composición de proteína que comprende proteína parcialmente replegada con un tampón de replegado/oxidación que tiene un pH en el intervalo de 9 a 11 para obtener una tercera composición de proteína que comprende la proteína en un estado replegado, en donde la proteína en el estado replegado es un dímero con enlace disulfuro.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2014/015658.

Solicitante: BRISTOL-MYERS SQUIBB COMPANY.

Inventor/es: HOLLANDER,CRISTOPHER, BLUM,BENJAMIN C.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C07K1/113 QUIMICA; METALURGIA.C07 QUIMICA ORGANICA.C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 1/00 Procedimientos generales de preparación de péptidos. › sin cambio de la estructura primaria.
  • C07K1/34 C07K 1/00 […] › por filtración, ultrafiltración u ósmosis inversa.
  • C07K14/78 C07K […] › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › Péptidos del tejido conectivo, p. ej. colágeno, elastina, laminina, fibronectina, vitronectina, globulina insoluble en frío (CIG).
  • C07K16/46 C07K […] › C07K 16/00 Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales. › Inmoglobulinas híbridas (híbridos de una inmunoglobulina con un péptido distinto de una inmunoglobulina C07K 19/00).

PDF original: ES-2813501_T3.pdf

 

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