Producción recombinante de virus adeno-asociados usando células BHK en suspensión.

Un procedimiento de producción de partículas virales de VAA recombinantes en una célula BHK que crece en suspensión,

que comprende:

coinfectar una célula BHK que crece en suspensión con (i) un primer virus del herpes simplex recombinante, deficiente en la replicación que comprende un ácido nucleico que codifica para un gen rep de VAA y un gen tapa de VAA cada uno operativamente vinculado a un promotor; y (ii) un segundo virus del herpes simplex recombinante deficiente en la replicación que comprende un ácido nucleico que codifica para un gen de interés operativamente vinculado a un promotor, estando dicho ácido nucleico flanqueado por las secuencias repetidas terminales invertidas del VAA,

en el que las células se infectan con el primer VHSr y el segundo VHSr en una proporción de 1:2 a 6:1, para una MDI combinada de entre 3 y 14, produciendo así partículas virales recombinantes de VAA en una célula BHK, en el que el número de partículas virales producidas es igual o mayor que el número de partículas virales cultivadas en un número igual de células BHK bajo condiciones adherentes.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2009/000577.

Solicitante: Applied Genetic Technologies Corporation.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 11801 Research Drive, Suite D Alachua, FL 32615 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: VERES,GABOR, KNOP,DAVE, THOMAS,DARBY.

Fecha de Publicación: 24 de Julio de 2019.

Clasificación Internacional de Patentes:

C12N15/86 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Vectores virales.
C12N7/00 C12N […] › Virus, p. ej. bacteriófagos; Composiciones que los contienen; Su preparación o purificación (preparaciones de uso médico que contienen virus A61K 35/76; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos virales, p. ej. vacunas virales, A61K 39/00).
C12N7/02 C12N […] › C12N 7/00 Virus, p. ej. bacteriófagos; Composiciones que los contienen; Su preparación o purificación (preparaciones de uso médico que contienen virus A61K 35/76; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos virales, p. ej. vacunas virales, A61K 39/00). › Aislamiento o purificación.

PDF original: ES-2751999_T3.pdf

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