Métodos para la detección multiplexada de moléculas diana y sus usos.

Un método para detectar una pluralidad de moléculas de proteína diana en una muestra que comprende:



a. poner en contacto una muestra con una composición que comprende una pluralidad de sondas diana, en donde cada sonda diana en la pluralidad comprende:

i) una molécula de unión a la diana que se une específicamente a una molécula diana distinta en la muestra;

ii) una secuencia de nucleótidos de identificación que identifica la molécula de unión a la diana; y

iii) un enlazador escindible entre la molécula de unión a la diana y la secuencia de nucleótidos de identificación;

b. separar las sondas diana no unidas de una pluralidad de complejos en la muestra, teniendo cada complejo una molécula de proteína diana y una sola sonda diana unida a la misma, en donde el complejo no tiene una segunda sonda diana que se una a una región diferente de la molécula de proteína diana;

c. liberar las secuencias de nucleótidos de identificación de la pluralidad de complejos; y

d. detectar señales de las secuencias de nucleótidos de identificación liberadas basadas en un método de electroforesis sin gel sin ningún paso de amplificación, en donde las señales son distinguibles para las secuencias de nucleótidos de identificación, identificando así las moléculas de unión a dianas correspondientes y detectando una pluralidad de moléculas diana diferentes en la muestra y

comprendiendo el método además, antes de la etapa de detección (d), acoplar las secuencias de nucleótidos de identificación liberadas de la etapa de liberación (c) a una composición de detección que comprende una pluralidad de sondas informadoras, en donde cada sonda informadora en la pluralidad comprende: una primera región diana específica de la sonda que es capaz de unir una primera porción de la secuencia de nucleótidos de identificación; y una etiqueta detectable que identifica la sonda informadora, en la que la etiqueta crea una señal distinguible única para cada sonda informadora.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2014/040731.

Solicitante: THE GENERAL HOSPITAL CORPORATION.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 55 FRUIT STREET BOSTON, MA 02114 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: WEISSLEDER, RALPH, AGASTI,SARIT S, PETERSON,VANESSA M, ULLAL,ADEETI.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12Q1/6804
  • C12Q1/6816
  • C12Q1/6823
  • G01N33/53 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto.

PDF original: ES-2754177_T3.pdf

 

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