Preparación de ácido hialurónico entrecruzado y de su hidrogel, los productos obtenidos y sus utilizaciones.

Procedimiento de entrecruzamiento de al menos un polímero seleccionado entre el ácido hialurónico,

sus sales y sus mezclas bajo la acción de al menos un agente entrecruzante polifuncional, caracterizado por la reacción de dicho agente entrecruzante polifuncional con dicho polímero, en estado sólido, en el curso de la hidratación.

Preparación de acido hialuronico entrecruzado y de su hidrogel, los productos obtenidos y sus utilizaciones La presente invención tiene por objeto:

-un procedimiento de preparación de un hidrogel inyectable de al menos un polímero seleccionado entre ácido hialurónico, sus sales y sus mezclas; -los hidrogeles inyectables, susceptibles de ser obtenidos por estos 10 procedimientos; y -un material de relleno útil en cirugía reparadora o en cirugía estética a base de dichos hidrogeles.

Se prepararon, a partir de polisacáridos y de sus derivados, especialmente a partir de ácido hialurónico, de sus sales y de sus mezclas, nada, poco o muy entrecruzados, hidrogeles, especialmente hidrogeles inyectables. La solicitud de patente EP-A-0.161.887 describe así la utilización de tales hidrogeles inyectables para tratar la artritis. Las solicitudes de patente WO-A-96/33751 y WO-A-00/01428 describen, por su parte, composiciones bifásicas inyectables cuya fase continua es a base de tal hidrogel. Dicha fase continua interviene a modo de vehículo de inyección.

Según las enseñanzas de estos documentos (según las enseñanzas de la técnica anterior, por lo que sabe la Solicitante) , se lleva a cabo el entrecruzamiento del polímero, y especialmente el de fibras de hialuronato de sodio, en presencia de un agente entrecruzante, especialmente de un poliepóxido, interviniendo dicho agente entrecruzante en una cantidad controlada sobre dicho polímero disuelto en medio básico. La reacción en cuestión es una reacción gel/líquido. Está encaminada a generar un producto entrecruzado, lo más homogéneo posible, que da lugar a un gel viscoelástico fácilmente inyectable, tanto que puede resultar exento de “laminillas”, con sobreentrecruzamientos locales.

La presencia de estas “laminillas” es altamente perjudicial para la inyectabilidad del gel en cuestión.

Cuando se inyecta, es necesario aplicar fuerzas más importantes cuando dicha “laminilla” se bloquea en la aguja de inyección. Este problema es tanto más crítico cuanto que se pueden utilizar agujas de inyección, de diámetros muy finos.

Es en relación a este problema técnico de la optimización de la inyectabilidad de hidrogeles, a base de dichos polímeros entrecruzados, que se ha desarrollado la presente invención.

La citada presente invención propone de hecho una utilización original del entrecruzamiento, conduciendo entonces el polímero entrecruzado, tras su hidratación, a un hidrogel muy homogéneo, (casi) exento de 40 sobreentrecruzamientos locales, que es posible inyectar con gran precisión.

Se ha descrito, en CA-A-949.965, otra utilización original de entrecruzamiento para la obtención de gránulos de almidón. Según ésta, se opera en tres etapas principales:

-una primera etapa de hidratación de gránulos de almidón en el curso de la cual dichos gránulos se cargan de sosa y de agente entrecruzante (epiclorohidrina) ; -una segunda etapa de recuperación de los gránulos cargados por filtración o centrifugación, especialmente, y -una tercera etapa de entrecruzamiento por calentamiento de dichos gránulos 50 cargados recuperados.

Dicho entrecruzamiento es realizado sobre gránulos posteriormente a su hidratación. Los gránulos obtenidos son homogéneos en su masa, pero su conjunto no constituye un gran volumen perfectamente homogéneo en su masa.

Según la invención, con vistas a obtener un polímero entrecruzado de forma muy homogénea en cuanto a su masa, se lleva a cabo el entrecruzamiento al mismo tiempo que la hidratación, más concretamente a medida que tiene lugar dicha hidratación. Según la invención, se puede así obtener grandes volúmenes perfectamente homogéneos en cuanto a su masa (entrecruzados de manera isotrópica) .

La presente invención se relaciona, pues, con un procedimiento de preparación de un hidrogel inyectable según la reivindicación 1. De forma clásica, el entrecruzamiento en cuestión es llevado a cabo en presencia de al menos un agente entrecruzante polifuncional (al menos bifuncional) .

Según la invención, el procedimiento se caracteriza por hacer reaccionar a dicho agente entrecruzante polifuncional directamente sobre dicho polímero en estado sólido en el curso de la hidratación.

Dicho polímero no es, pues, en el marco del procedimiento de la invención, previamente acondicionado, en el sentido de la técnica anterior, por disolución/hinchamiento.

Sorprendentemente, en las condiciones de la invención, el entrecruzamiento es una reacción sólido/líquido que genera un polímero entrecruzado de forma homogénea, polímero precursor de un hidrogel de estructura perfectamente homogénea.

Preferiblemente, dicho agente entrecruzante polifuncional interviene sobre dicho polímero sólido en solución básica. Así, dicho agente entrecruzante polifuncional puede •o bien ser disuelto o suspendido en una solución básica; esta solución o suspensión reacciona luego directamente con dicho polímero en estado sólido; •o bien reaccionar directamente con dicho polímero en estado sólido, haciéndose la adición del agente básico simultáneamente a la adición del agente entrecruzante, pero por medio de introducción por separado, sobre dicho polímero en estado sólido.

En general, cuando dicho agente entrecruzante está en solución básica, esta solución básica tiene un pH comprendido entre 10 y 12.

Como agente entrecruzante, se puede hacer intervenir a cualquier agente conocido para entrecruzar los polisacáridos y sus derivados, por medio de sus funciones hidroxi -agente entrecruzante al menos bifuncional-y especialmente un epoxi o sus derivados.

Como tales agentes entrecruzantes, se puede hacer intervenir especialmente al éter 1, 4-butanodioldi-glicidílico (ó

1, 4-bis (2, 3-epoxipropoxi) butano o también 1, 4-bisglicidiloxibutano = BDDE) , al 1, 2-bis (2, 3-epoxi-propoxi) etileno y al 1- (2, 3-epoxipropil) -2, 3-epoxiciclo-hexano.

No se excluye del ámbito de la invención hacer intervenir a varios agentes entrecruzantes.

Se preconiza muy en particular la intervención del éter 1, 4-butanodioldiglicidílico (BDDE) .

Dicho polímero en cuestión (los polímeros en cuestión) es (son) seleccionado (s) entre ácido hialurónico, sus sales y sus mezclas.

Se preconiza muy particularmente el hialuronato de sodio.

El entrecruzamiento que se ha de utilizar sobre dicho polímero está dentro del alcance del experto en la técnica. Para cada polímero, el experto en la técnica sabrá optimizar las condiciones de este entrecruzamiento para la naturaleza de dicho polímero y realizarlo con una razón optimizada.

En efecto, la razón de entrecruzamiento debe ser suficiente para que el hidrogel, obtenido a partir de este polímero entrecruzado, permanezca implantado en el sitio de inyección sin difusión excesiva fuera de este sitio de inyección; debe, sin embargo, permanecer razonable para una utilización, en particular, por inyección.

Sin embargo, preferiblemente, según la invención, el polímero es entrecruzado a través de sus funciones hidroxi, por medio de dicho agente entrecruzante con una razón de entrecruzamiento definida por la proporción: Número total de funciones reactivas de dicho agente entrecruzante R= ---------------------------------------------------------------------------------------------------Número total de unidades de disacáridos de las moléculas de 55 ácido hialurónico comprendida entre 0, 10 y 0, 50.

La invención se relaciona con un procedimiento de preparación de un hidrogel inyectable de al menos un polímero entrecruzado seleccionado entre el ácido hialurónico, sus sales y sus mezclas.

De forma característica, este procedimiento consiste en el entrecruzamiento de dicho polímero según el procedimiento de entrecruzamiento de la invención antes descrito, en todas sus variantes, yendo seguido dicho entrecruzamiento de un hinchamiento de dicho polímero entrecruzado por hidratación.

El procedimiento de preparación de un hidrogel inyectable de la invención es optimizado en relación a la presencia de entrecruzamientos o de sobreentrecruzamientos locales en el seno de dicho hidrogel.

Dicho procedimiento de preparación de dicho hidrogel es además per se optimizado en relación a su duración de realización.

Según la invención, es así posible obtener en 2 a 3 horas un hidrogel entrecruzado por una reacción en fase 10 sólida/líquida, mientras que, según la técnica anterior, se obtiene un hidrogel entrecruzado en aproximadamente 5 h mediante una reacción en fase de gel/líquida.

Esta ganancia de tiempo es...

1. Procedimiento de preparación de un hidrogel inyectable de al menos un polímero entrecruzado seleccionado entre el ácido hialurónico, sus sales y sus mezclas, caracterizado porque comprende el entrecruzamiento de dicho polímero bajo la acción de al menos un agente entrecruzante polifuncional en el cual dicho agente entrecruzante polifuncional se hace reaccionar con dicho polímero, en estado sólido, en el curso de la hidratación; seguida de un hinchamiento de dicho polímero entrecruzado por hidratación.

2. Procedimiento de preparación de un hidrogel inyectable según reivindicación 1, caracterizado por que 10 comprende

-el entrecruzamiento de dicho polímero bajo la acción de al menos un la reacción de dicho agente entrecruzante polifuncional en el cual dicho agente entrecruzante polifuncional se hace reaccionar con dicho polímero, en estado sólido, en el curso de la hidratación;

-el hinchamiento de dicho polímero entrecruzado; -la purificación de dicho polímero entrecruzado hinchado; -la esterilización, si es necesaria, de dicho polímero entrecruzado hinchado purificado.

3. Procedimiento de preparación de un hidrogel inyectable según la reivindicación 1 o 2 , caracterizado por intervenir dicho agente entrecruzante polifuncional sobre dicho polímero sólido, en solución básica.

4. Procedimiento de preparación de un hidrogel según una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, caracterizado por ser dicho agente entrecruzante polifuncional un epóxido. 25

5. Procedimiento de preparación de un hidrogel inyectable según la reivindicación 4, caracterizado por seleccionar dicho agente entrecruzante polifuncional entre éter 1, 4-butanodioldiglicidílico, 1, 2-bis (2, 3-epoxipropoxi) etileno y 1 (2, 3-epoxipropil) -2, 3-epociciclohexano.

6. Procedimiento de preparación de un hidrogel inyectable según la reivindicación 5, caracterizado por consistir dicho agente entrecruzante polifuncional en éter 1, 4-butanodioldiglicidílico.

7. Procedimiento de preparación de un hidrogel inyectable según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6,

caracterizado por consistir dicho polímero en hialuronato de sodio. 35

8. Procedimiento de preparación de un hidrogel inyectable según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizado por el hecho de que dicho polímero es entrecruzado, a través de sus funciones hidroxi, por medio de dicho agente entrecruzante con una razón de entrecruzamiento definida por la proporción:

40Número total de funciones reactivas de dicho agente entrecruzante R = -------------------------------------------------------------------------------------------Número total de unidades de disacáridos de las moléculas de ácido hialurónico comprendida entre 0, 10 y 0, 50. 45

9. Hidrogel inyectable susceptible de ser obtenido llevando a cabo un procedimiento de preparación según una de las reivindicaciones 1 a 8.

10. Gel de relleno, útil en cirugía reparadora o estética, caracterizado por ser la base de un hidrogel, cargado o no, 50 según la reivindicación 9.

11. Gel de relleno según la reivindicación 10, caracterizado por consistir en un hidrogel monofásico según la reivindicación 9.

5 Máxima Media Mínima Superficie : : : : 0, 2900 N -21, 8918 N -27, 3500 N 299, 1696 N.mm

10 Posición alta del marcador (x) Valor alto del marcador (y) Posición baja del marcador (x) ) Valor bajo del marcador (y) : : : : 13, 9042 mm 0, 2900 N 0, 0000 mm 0, 0000 N

15

20 FIG. 1

5 Máxima Media Mínima Superficie : : : : 0, 0300 N -19, 9964N -41, 5000 N 449, 9681 N.mm

10 15 Posición alta del marcador (x) Valor alto del marcador (y) Posición baja del marcador (x) ) Valor bajo del marcador (y) : : : : 22, 7938 mm -23, 9300 N 0, 0000 mm 0, 0300 N

20 FIG. 2