Una composición farmacéutica líquida que comprende toxina botulínica,

polisorbato 20 y metionina, enla que el polisorbato 20 está presente en una cantidad de 0,01 a 50 mg por 100 unidades de toxina botulínica y en laque la metionina está presente en una canti 5 dad de 0,5 a 100 μmoles por 100 unidades de toxina botulínica.

Composición líquida farmacéutica de toxina botulínica con estabilidad mejorada

Campo técnico

La presente invención se refiere, en general, a una composición farmacéutica de toxina botulínica líquida más estable y más particularmente a una composición farmacéutica líquida que comprende una toxina botulínica en combinación con polisorbato 20 y metionina y opcionalmente isoleucina.

Técnica anterior

La toxina botulínica es una proteína de neurotoxina producida por la bacteria Clostridium botulinum. Esta toxina bloquea la liberación presináptica de la acetilcolina en la unión neuromuscular, causando parálisis flácida (floja) de músculos en mamíferos. La toxina ha demostrado ser eficaz para tratar estrabismo, blefaroespasmo idiopático y espasmo hemifacial. Además, recientemente se ha encontrado que proporciona alivio para varias alteraciones motoras de músculos involuntarios que incluyen tortícolis espasmódica, distonía oromandibular y disfonía espasmódica. Además, la toxina botulínica recibió la aprobación de la FDA para la mejora temporal en el aspecto facial de líneas de expresión de moderadas a graves y para el tratamiento no quirúrgico de hiperhidrosis (sudoración excesiva de las axilas) .

Las proteínas de la toxina botulínica serotipo A y B se han formulado ahora en formas de dosificación para su uso en aplicaciones médicas tales como el tratamiento de tortícolis, blefaroespasmo, hiperhidrosis, etc., además de en aplicaciones cosméticas tales como la reducción de arrugas. Sin embargo, los fármacos de proteínas que incluyen proteínas de la toxina botulínica tienen muchos problemas durante la preparación de los mismos. Los problemas, la mayoría de los cuales se atribuyen a la inestabilidad de las proteínas, son particularmente pronunciados para los fármacos de proteínas que se formulan con muy bajas concentraciones de proteínas activas, tales como toxinas botulínicas.

Adhiriendo las mismas sobre superficies sólidas, las proteínas de la toxina botulínica, cuando se encierran en recipientes, son aptas para adherirse a las paredes internas de los recipientes, produciendo una pérdida del principio activo. También se requiere un agente estabilizante para prevenir que las proteínas se oxiden o degraden en fragmentos.

La albúmina se selecciona en la mayoría de los casos para su uso como un estabilizador en la formulación de toxina botulínica. Además de estabilizar los componentes de proteína activa en composiciones farmacéuticas, la albúmina disfruta de la ventaja de que muestra inmunogenicidad insignificativa, incluso cuando se inyecta en el cuerpo. Sin embargo, los productos de suero tales como la albúmina no están completamente libres de la posibilidad de contaminarse con patógenos o microorganismos y, por tanto, actúan de mediadores de la enfermedad, particularmente enfermedades víricas o enfermedad de Creutzfeldt-Jakob.

Frecuentemente se emplea gelatina en lugar de albúmina. Sin embargo, se recomienda no usar la gelatina como un estabilizador para la formulación de fármacos debido a que esta proteína, similarmente a la albúmina, también se obtiene de animales y puede mediar en enfermedades.

La patente coreana Nº 10-0799400 proporciona un estabilizador derivado de fuentes no animales para la formulación farmacéutica de toxina botulínica en el que la albúmina de suero recombinante (rSA) , producida en levadura, se aplica a la formulación farmacéutica. Sin embargo, no puede evitarse por completo la posibilidad de que un neoepítope, una nueva estructura antigénica, pueda generarse en el transcurso de la producción, aislamiento y recuperación de la albúmina de suero recombinante (rSA) , provocando una respuesta inmunitaria al receptor del fármaco. La patente coreana Nº 10-0665469 desvela una composición farmacéutica que comprende una toxina botulínica, polisacáridos (incluyendo hidroxietilalmidón) y un aminoácido tal como lisina, glicina, histidina o arginina. Esta composición farmacéutica se proporciona en una forma de dosificación preparada por liofilización y desafortunadamente debe almacenarse a baja temperatura en un refrigerador o congelador. El requisito para que la toxina botulínica liofilizada se descongele o diluya justo antes de uso puede producir un error en la proteína. Además de ser inconveniente para su uso, las toxinas botulínicas liofilizadas son difíciles de desarrollar en un tipo de administración de jeringuilla precargada.

La publicación de patente de EE.UU. Nº 2007-0134199 sugiere una composición para la estabilización de agentes de proteínas en productos farmacéuticos. La composición comprende un detergente no iónico, preferentemente polisorbato, y una combinación de tanto glutamina o ácido glutámico como asparagina y ácido aspártico. Se observó que una dilución de toxina botulínica en la composición líquida era estable durante 8 meses cuando se almacenó a 4ºC. Sin embargo, debido a que el almacenamiento a 37ºC disminuyó la actividad de la dilución en el plazo de un mes, la composición tiene uso limitado para la estabilización de agentes de proteínas, tales como toxina botulínica, en productos farmacéuticos que van a almacenarse a temperatura ambiente. En opinión de los presentes inventores, esta deficiencia se atribuyó a la presencia de los aminoácidos polares y particularmente a los aminoácidos ácidos tales como ácido glutámico o ácido aspártico.

Descripción de la invención

Problema técnico

Por consiguiente, la presente invención se ha realizado teniendo en cuenta los problemas anteriores que se producen en la técnica anterior, y un objeto de la presente invención es proporcionar una composición farmacéutica que pueda mantener la actividad de la toxina botulínica incluso después de almacenarse durante un largo periodo de tiempo a temperatura ambiente, además de a una temperatura refrigerada, y esté en una forma líquida más conveniente para su uso que una forma liofilizada.

Es otro objeto de la presente invención proporcionar una composición farmacéutica líquida en la que la actividad de la toxina botulínica pueda mantenerse estable en condiciones de refrigeración o a altas temperaturas sin usar ni proteína derivada de animal, tal como albúmina o gelatina, como un estabilizador para toxina botulínica, ni aminoácidos polares o ácidos tales como glutamina, ácido glutámico, asparagina o ácido aspártico.

Solución técnica

Conduciendo a la presente invención, la investigación intensiva y rigurosa realizada por los presentes inventores con muchos detergentes y aminoácidos en la preservación estable de toxina botulínica bajo condiciones de altas temperaturas produjo el hallazgo de que una combinación de polisorbato 20 y metionina y opcionalmente isoleucina puede mejorar enormemente la estabilidad de la toxina botulínica a temperatura ambiente o superior.

Según la presente invención se proporciona una composición farmacéutica líquida que comprende toxina botulínica, polisorbato 20 y metionina, en la que el polisorbato 20 está presente en una cantidad de 0, 01 a 50 mg por 100 unidades de toxina botulínica y en la que la metionina está presente en una cantidad de 0, 5 a 100 µmoles por 100 unidades de toxina botulínica. La composición puede comprender adicionalmente isoleucina.

En la composición farmacéutica líquida, la metionina está presente en una cantidad de 0, 5 a 100 µmoles por 100 unidades de toxina botulínica, y preferentemente oscila en una concentración de 0, 5 a 100 mM y más preferentemente de 25 a 75 mM.

En la composición farmacéutica líquida según la presente invención, el polisorbato 20 está presente en una cantidad de 0, 01 a 50 mg por 100 unidades de toxina botulínica y preferentemente oscila en concentración de 0, 01 a 50 mg/ml y más preferentemente de 0, 1 a 2, 5 mg/ml.

En la composición farmacéutica líquida según la presente invención, la toxina botulínica se selecciona de un grupo que consiste en los serotipos A, B, C, D, E, F y G de la toxina botulínica y puede estar en una forma no compleja o en una forma compleja con una proteína. Preferentemente, la toxina botulínica oscila en concentración de 50 a 5.000 unidades/ml.

La composición farmacéutica líquida según la presente invención oscila preferentemente en pH de 5, 5 a 7, 0.

Efectos ventajosos

Empleando como estabilizadores de la toxina botulínica,... [Seguir leyendo]

1. Una composición farmacéutica líquida que comprende toxina botulínica, polisorbato 20 y metionina, en la que el polisorbato 20 está presente en una cantidad de 0, 01 a 50 mg por 100 unidades de toxina botulínica y en la que la metionina está presente en una cantidad de 0, 5 a 100 µmoles por 100 unidades de toxina botulínica.

2. La composición farmacéutica líquida según la reivindicación 1, en la que la metionina oscila en una concentración de 0, 5 a 100 mM.

3. La composición farmacéutica líquida según la reivindicación 2, en la que la metionina oscila en una concentración de 25 a 75 mM.

4. La composición farmacéutica líquida según la reivindicación 1, en la que el polisorbato 20 oscila en una concentración de 0, 01 a 50 mg/ml.

5. La composición farmacéutica líquida según la reivindicación 4, en la que el polisorbato 20 oscila en una concentración de 0, 1 a 2, 5 mg/ml.

6. La composición farmacéutica líquida según la reivindicación 1, en la que la toxina botulínica se selecciona de un grupo que consiste en los serotipos A, B, C, D, E, F y G de la toxina botulínica.

7. La composición farmacéutica líquida según la reivindicación 6, en la que la toxina botulínica está en una forma no compleja o en una forma compleja con una proteína.

8. La composición farmacéutica líquida según la reivindicación 1, en la que la composición farmacéutica líquida oscila en un pH de 5, 5 a 7, 0.

9. La composición farmacéutica líquida según la reivindicación 1 que comprende además isoleucina.

10. La composición farmacéutica líquida según la reivindicación 1, en la que la toxina botulínica oscila en una concentración de 50 a 5.000 unidades/ml.