Una composición inmunógena contra el carbunco que comprende partículas sólidas secadas que tienen un diámetro de volumen medio de entre 35 µm y 300 µm,

en la que al menos el 50% de dichas partículas secadas tiene un diámetro de volumen de hasta el 80% del medio, y dichas partículas secadas tienen una diámetro medio aerodinámico de entre 8 µm y 140 µm

Campo de la invención

La invención se refiere a composiciones inmunógenas contra el carbunco, tales como vacunas contra el carbunco y/o al uso de tales composiciones para preparar una vacuna contra el carbunco.

Antecedentes

En vista de los sucesos acaecidos el 11 de septiembre de 2001 y el pánico por el carbunco surgido en los meses posteriores, cada vez es más evidente que existe una necesidad urgente por nuevas vacunas de biodefensa para proteger a la población tanto militar como civil. Tal desarrollo de nuevas vacunas puede avanzar junto con el desarrollo de nuevas plataformas de administración para mejorar la eficacia de las vacunas candidatas y garantizar la seguridad y rápida utilización en el caso de una emergencia nacional. La virulencia de Bacillus anthracis, el agente causante del carbunco, está mediada por tres componentes proteicos principales: el antígeno protector (AP), el factor letal (FL) y el factor de edema (FE). Aunque estas proteínas no son tóxicas a nivel individual, en combinación, forman una toxina potencialmente letal. La exposición cutánea a las esporas de carbunco provoca una lesión cutánea que, por lo común, responde bien al tratamiento con antibióticos. Sin embargo, la inhalación de carbunco representa una amenaza mucho más temible. El diagnóstico temprano de la inhalación de carbunco es difícil y, a menudo, la enfermedad se manifiesta bruscamente en forma de insuficiencia respiratoria o colapso hemodinámico 2–4 días después de la aparición de los síntomas iniciales. La vacuna actualmente autorizada en Estados Unidos es la vacuna contra el carbunco absorbida (VCA), que está constituida por un filtrado de cultivo de una cepa no encapsulada toxígena de B. anthracis absorbido en hidróxido de aluminio como adyuvante. Aunque generalmente aporta una protección eficaz contra el carbunco en seres humanos, la vacuna actual se administra en una serie de 6 dosis durante 18 meses seguida después por recuerdos anuales. Así pues, existe la necesidad de producir vacunas contra el carbunco más seguras y potentes, p.ej.: para reducir el número de dosis necesarias para conseguir una inmunidad protectora. Una vacuna contra el carbunco candidata recientemente desarrollada se basa en un AP producido recombinantemente (Ivins, B.E., “Infection and Immunity”, 60:662–668, 1992; Ramirez, D.M., et al., J. Industrial Microbiol. and Biotechnol. 28:232–238, 2002). Esta vacuna está siendo investigada por USAMRIID como una alternativa a la VCA, debido a su potencial para mejorar la eficacia y así reducir el número de administraciones de recuerdo necesarias, así como mejorar el perfil de seguridad. Se requieren más estudios preclínicos y clínicos para determinar las vías de administración más eficaces para la protección y además para dilucidar los posibles requisitos para los adyuvantes. Los adyuvantes tales como el alumbre a menudo están asociados con reacciones cutáneas y otros efectos adversos; por tanto, una vacuna preferida conservaría la inmunogenicidad de la vacuna que contiene alumbre, pero no tendría los efectos secundarios asociados.

Resumen de la invención

La presente invención proporciona composiciones inmunógenas contra el carbunco, tales como vacunas contra el carbunco y al uso de tales composiciones para preparar una vacuna contra el carbunco. Una realización de la invención es una composición inmnogénica contra el carbunco (p.ej., una vacuna contra el carbunco) que comprende partículas sólidas secadas que tienen un diámetro de volumen medio de entre 35 μm y 300 μm, en la que al menos el 50% de dichas partículas secadas tiene un diámetro de volumen de hasta el 80% del medio, y dichas partículas secadas tienen una diámetro medio aerodinámico de entre 8 μm y 140 μm. Tal composición se puede elaborar mediante los procedimientos descritos en la presente memoria y/o presenta las propiedades descritas en la presente memoria. Otras realizaciones de la invención incluyen el uso de las composiciones anteriores para preparar una vacuna contra el carbunco. Tal vacuna es adecuada para ser administrada intranasalmente, intradérmicamente (p.ej., usando microagujas huecas) y por abrasión tópica (p.ej., usando microagujas macizas). Las composiciones y las vacunas de la invención presentan varias ventajas. Por ejemplo, mejoran la inmunogenicidad y la eficacia protectora de las vacunas; pueden reducir o eliminar la necesidad de adyuvantes en las formulaciones de vacuna; proporcionan una administración mínimamente invasiva de las vacunas; y/o permiten la auto–administración de las vacunas. En una realización preferida, la vacuna es una vacuna para biodefensa, más preferiblemente, una vacuna contra el carbunco y, lo más preferible, una vacuna de antígeno protector recombinante (APr) contra el carbunco.

Breve descripción de las figuras

La Figura 1A es una vista desde arriba del extremo del mango de una realización preferida de un microabrasímetro.

La Figura 1B es una vista lateral de una realización preferida de un microabrasímetro.

La Figura 2A es una vista en perspectiva transparente del dispositivo de microabrasión de las Figuras 1A y 1B.

La Figura 2B es un corte transversal del dispositivo de microabrasión de las Figuras 1B.

La Figura 4 es una vista en perspectiva de la superficie abrasiva de la realización de la Figura 3. La Figura 4A es una vista lateral del corte transversal de la superficie abrasiva.

La Figura 5 es una vista inferior de la superficie abrasiva de la realización de la Figura 3.

Las Figuras 6A–6F muestran las concentraciones en suero del día 56 de los anticuerpos específicos de APr de los diversos isotipos de los grupos experimentales presentados en el Ejemplo 1.

Las Figuras 7A–7C muestran el porcentaje de viabilidad de los cultivos de monocitos tras la incubación con concentraciones líticas de AP y toxina letal (TL) de B. anthracis y suero diluido de ratones en diferentes grupos de vacunación.

La Figura 8 muestra el porcentaje de viabilidad de los cultivos de monocitos tras la incubación con concentraciones líticas de AP y toxina letal (TL) de B. anthracis y suero diluido de conejos en diferentes grupos de vacunación.

Descripción detallada de la invención

Según la presente invención, los términos “mejorar”, “mejorada” y “mejoras” en referencia a una vacuna pretenden significar que la vacuna produce una respuesta inmune más potente (es decir, proporciona una mayor inmunogenicidad) que la conseguida mediante las formulaciones convencionales y/o mediante las vías de administración de la vacuna convencionales. Las formulaciones convencionales incluyen, p.ej., APr en alumbre; y las vías de administración convencionales incluyen, p.ej., una administración intramuscular (IM) o subcutánea (SC). Los términos “mejorar”, “mejorada” y “mejoras” en este contexto también pueden significar que la vacuna produce una respuesta inmune protectora más potente que la conseguida mediante las formulaciones convencionales administradas por las vías de administración convencionales; y/o que la vacuna requiere un número menor de inmunizaciones para conseguir una respuesta inmune que el necesario para las formulaciones convencionales administradas mediante vías convencionales; y/o que la vacuna requiere un número menor de inmunizaciones para conseguir una respuesta inmune protectora que el necesario para las formulaciones convencionales administradas por las vías convencionales.

En un aspecto, la invención incluye una composición inmunógena contra el carbunco (p.ej., una vacuna o una composición farmacéutica contra el carbunco) en forma particulada que es adecuada para su administración intranasal a un paciente, y procedimientos para elaborar y usar tal composición. Por ejemplo, una realización es una composición inmunógena contra el carbunco en forma de partículas secadas elaborada mediante un procedimiento que comprende una o más de las siguientes etapas:

(i) atomizar una formulación líquida de una composición inmunógena contra el carbunco para producir una formulación atomizada,

(ii) congelar dicha formulación atomizada para formar partículas sólidas, y

(iii) secar dichas partículas sólidas para producir partículas secadas (p.ej., un polvo).

En realizaciones preferidas de este aspecto de la invención, la composición inmunógena contra el carbunco es una vacuna... [Seguir leyendo]

1.– Una composición inmunógena contra el carbunco que comprende partículas sólidas secadas que tienen un diámetro de volumen medio de entre 35 µm y 300 µm, en la que al menos el 50% de dichas partículas secadas tiene un diámetro de volumen de hasta el 80% del medio, y dichas partículas secadas tienen una diámetro medio aerodinámico de entre 8 µm y 140 µm.

2.– La composición inmunógena contra el carbunco de la reivindicación 1, composición que está elaborada mediante un procedimiento que comprende las etapas de:

(i) atomizar una formulación líquida de una composición inmunógena contra el carbunco para producir una formulación atomizada,

(ii) congelar dicha formulación atomizada para formar partículas sólidas y

(iii) secar dichas partículas sólidas para obtener partículas secadas. 3.– La composición de la reivindicación 1 ó 2 que es una vacuna contra el carbunco. 4.– La composición de la reivindicación 3, en la que la vacuna contra el carbunco:

(i) es una vacuna contra el carbunco absorbida (VCA); o

(ii) es una vacuna de antígeno protector recombinante (APr); o

(iii) comprende un adyuvante; o

(iv) no contiene un adyuvante; o

(v) comprende partículas secadas que tienen un diámetro de volumen medio de entre 35 µm y 300 µm; o

(vi) es reconstituida para formar una formulación líquida que está esencialmente constituida por dicha composición contra el carbunco y agua.

5.– La composición de la reivindicación 3, en la que la vacuna contra el carbunco comprende un agente inmunógeno y al menos un vehículo farmacéuticamente aceptable.

6.– La composición de la reivindicación 5, en la que la vacuna contra el carbunco:

(i) es una vacuna VCA; o

(ii) es una vacuna de APr.

7.– La composición de la reivindicación 3, en la que la vacuna contra el carbunco está elaborada mediante un procedimiento que comprende:

(i) atomizar una formulación líquida de una composición de vacuna contra el carbunco para producir una formulación atomizada que comprende gotas que tienen un diámetro medio de entre 35 µm y 300 µm,

(ii) congelar dicha formulación atomizada para formar partículas sólidas y

(iii) secar dichas partículas sólidas para obtener partículas secadas. 8.– Un procedimiento para preparar una vacuna contra el carbunco que comprende:

(i) atomizar una formulación líquida de una composición de vacuna contra el carbunco para producir una formulación atomizada,

(ii) congelar dicha formulación atomizada para formar partículas sólidas y

(iii) secar dichas partículas sólidas para obtener partículas sólidas que tienen un diámetro de volumen medio de entre 35 µm y 300 µm, en las que al menos el 50% de dichas partículas secadas tiene un diámetro de volumen de hasta el 80% del medio, y dichas partículas secadas tienen una diámetro medio aerodinámico de entre 8 µm y 140 µm, preferiblemente, dichas partículas secadas tienen un diámetro de volumen medio de entre 50 µm y 300 µm.

9.– El procedimiento de la reivindicación 8, en el que dicha formulación líquida de dicha composición de vacuna contra el carbunco está esencialmente constituida por dicha vacuna contra el carbunco y agua.

11.– El uso de la reivindicación 10, en el que:

(i) la vacuna contra el carbunco es una vacuna contra el carbunco absorbida (VCA); o

(ii) la vacuna contra el carbunco es una vacuna de antígeno protector recombinante (APr); o

(iii) la vacuna contra el carbunco comprende un adyuvante; o

(iv) la vacuna contra el carbunco no contiene un adyuvante; o

(v) la vacuna contra el carbunco es adecuada para una administración intranasal; o

(vi) la vacuna contra el carbunco es adecuada para una administración en una membrana mucosa; o

(vii) la vacuna contra el carbunco es adecuada para reducir la cantidad de vacuna contra el carbunco necesaria para producir un resultado eficaz mediante la administración intranasal.

12. El uso de la reivindicación 10, en el que dicha vacuna es adecuada para una administración intranasal.

13. El uso de la reivindicación 10 ó 11, en el que la vacuna es adecuada para vacunar a un paciente contra el carbunco.

14. El uso de la reivindicación 13, en el que dicha vacuna es adecuada

(i) para la administración intranasal; o

(ii) para ser administrada como parte de una pauta de estimulación más recuerdo; o

(iii) para una administración intradérmica a una profundidad de entre 0,025 y 2,5 mm en la piel del paciente; preferiblemente, el medicamento es adecuado para su administración mediante al menos una aguja hueca que tenga una salida con una altura expuesta de entre 0 y 1 mm, siendo dicha salida insertable en la piel hasta una profundidad de entre 0,5 mm y 2 mm.

15. El uso de la reivindicación 10, en el que la vacuna produce una respuesta inmune en un mamífero que es igual o superior que la respuesta tras la administración de la misma cantidad de medicamento mediante una inyección subcutánea o intramuscular.

16. El uso de la reivindicación 15, en el que la aguja es una microaguja de entre 0,23 y 0,025 mm (calibre 31 y 50), preferiblemente, la microaguja está en una disposición de microagujas.

17. El uso de la reivindicación 11 para la expresión de inmunidad protectora mediante la administración de dicha vacuna contra el carbunco inmunógena en un espacio intradérmico en la piel de un sujeto humano a través de una aguja de poco calibre insertada en el espacio intradérmico, aguja que tiene una salida con una altura expuesta de entre 0 y 1 mm, y es insertada a una profundidad de entre 0,025 mm y 2,5 mm en la piel, mediante lo que se mejora la inmunogenicidad de la vacuna contra el carbunco.

18. El uso de la reivindicación 11 para la expresión de inmunidad protectora mediante la administración de dicha vacuna contra el carbunco inmunógena en la piel de un sujeto humano mediante la abrasión de la piel y la administración de la vacuna contra el carbunco en la piel excoriada, en el que la piel es

(i) sometida a abrasión antes de administrar la vacuna contra el carbunco; o

(ii) sometida a abrasión simultáneamente a la administración de la vacuna contra el carbunco, mediante lo que se mejora la inmunogenicidad de la vacuna contra el carbunco.

19. El uso de la reivindicación 17 ó 18, en el que:

(i) la vacuna contra el carbunco es una vacuna contra el carbunco absorbida (VCA); o

(ii) la vacuna contra el carbunco es una vacuna de antígeno protector recombinante (APr); o

(iii) la vacuna contra el carbunco comprende un adyuvante; o

(iv) la vacuna contra el carbunco no contiene un adyuvante.

20. El uso de la reivindicación 18, en el que la piel es sometida a abrasión al menos dos veces.

21. El uso de la reivindicación 18, en el que la piel es sometida a abrasión en direcciones alternas.

22. El uso de la reivindicación 18, en el que la vacuna contra el carbunco inmunógena es aplicada en la piel en forma líquida.

23. El uso de la reivindicación 18, en el que la vacuna contra el carbunco inmunógena es aplicada en la piel desde un dispositivo de abrasión.

24. El uso de la reivindicación 23, en el que la vacuna contra el carbunco inmunógena es un polvo, un gel o una película sobre una superficie abrasiva de un dispositivo de abrasión.

25. El uso de la reivindicación 24, en el que se aplica un líquido reconstituyente en la piel antes de la abrasión.

26. El uso de la reivindicación 24, en el que se aplica un líquido reconstituyente en la piel simultáneamente a la abrasión.

27. Un kit que comprende una cantidad eficaz de una vacuna contra el carbunco de la reivindicación 3.

28. El kit de la reivindicación 27 que comprende además un medio para administrar la vacuna intranasalmente.

29. El kit de la reivindicación 27 que comprende un microabrasímetro que comprende una superficie abrasiva y una cantidad eficaz de una vacuna contra el carbunco.

30. El kit de la reivindicación 29, en el que:

(i) la vacuna contra el carbunco reviste la superficie del microabrasímetro; o

(ii) la vacuna contra el carbunco está contenida en un depósito integrado en el microabrasímetro.

31. El kit de la reivindicación 27, en el que la vacuna contra el carbunco está envasada por separado dentro del kit.

32. El kit de la reivindicación 27 que comprende un dispositivo de administración adecuado para la administración intradérmica de una sustancia hasta una profundidad de entre 0,025 y 2,5 mm de la piel de un paciente y una dosis eficaz de una vacuna contra el carbunco.

33. El kit de la reivindicación 32, en el que dicho dispositivo de administración comprende al menos una microaguja hueca diseñada para la administración intradérmica de una sustancia hasta una profundidad de entre 0,025 y 2,5 mm de la piel de un paciente, y el dispositivo de administración comprende o está adaptado para recibir un depósito que contiene una vacuna contra el carbunco de modo que la microaguja esté comunicada con el mismo.

34. El kit de la reivindicación 33, en el que:

(i) la dosis está contenida en un depósito que forma parte integral del, o es capaz de estar unido funcionalmente al, dispositivo de administración; o

(ii) la microaguja hueca es de entre 0,23 y 0,025 mm (calibre 31 y 50); o

(iii) el dispositivo comprende una disposición de microagujas.