METODO PARA PRODUCIR LA PROTEINA FACTOR RECOMBINANTE DE NECROSIS DE TUMORES HERMANOS (TNF) A PARTIR DE CELULAS HOSPEDANTES COMPETENTES TRANSFORMADAS CON UN VECTOR DE EXPRESION.

PROCEDIMIENTO PARA OBTENER UNA PROTEINA QUE EX TOXICA PARA LOS TUMORES Y SUS MUTEINAS.

COMPRENDE: A) TRATAR A LAS CELULAS HOSPEDANTES COMPETENTES CON UN VECTOR DE EXPRESION, PARA TRANSFORMARLAS; B) CULTIVAR A LAS CELULAS HOSPEDANTES TRANSFORMADAS PARA EXPRESAR EL TNF EN PRESENCIA DE UN AGENTE DE INDUCCION, ESTER DE FORBOL, 12-O-TETRADECANOILFORBOL-13-ACETADO (TPA), A 37JC Y DURANTE 30 MINUTOS; C) SEDIMENTAR LAS CELULAS DE B) POR CENTRIFUGACION; D) TRATAR LAS CELULAS CENTRIFUGADAS CON ENDOLOXINA, EN UN ELEMENTO EXENTO DE SUERO SUPLEMENTADO CON INSULINA; E) PURIFICAR EL TNF DEL CULTIVO MEDIANTE ULTRASONIDOS; F) TRATAR AL MATERIAL DE E) CON UN AGENTE CAOTROPICO PARA SOLUBILIZAR EL TNF; Y G) PURIFICAR AL TNF POR CROMATOGRAFIA EN COLUMNA. EL TNF CODIFICADO CONTIENE UNA MUTEINA EMPOBRECIDA EN CISTEINA Y LA SECUENCIA DE N-TERMINAL (SER-ASP-LYS-PROF) Y EL VECTOR DE EXPRESION ES PTRP3 QUE CONTIENE UN PROMOTOR TROP AGUAS ARRIBA DE UN SITIO HIND III Y UN SITIO BAMHI AGUAS ABAJO Y LAS CELULA S HOSPEDANTES SON CELULAS ESCHERIDINA COLI. SE UTILIZA COMO ANTIPARASITARIO.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: CETUS CORPORATION.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 1400 FIFTY-THIRD STEET,EMERYVILLE,CALIFORNIA ,94608.

Fecha de Solicitud: 15 de Octubre de 1985.

Fecha de Publicación: .

Fecha de Concesión: 6 de Febrero de 1987.

Clasificación Internacional de Patentes:

  • A61K37/02

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