PROCEDIMIENTO PARA LA DETECCION SIMULTANEA DE LA METILACION DE CITOSINA Y DE MUTACIONES EN MUESTRAS DE ADN.

Procedimiento para la detección simultánea de 5-metilcitosina y de polimorfismos de un único nucleótido

(del inglés Single Nucleotide Polymorphisms = SNP''s) o mutaciones en muestras de ADN genómico, caracterizado porque se realizan las siguientes etapas: (a) se hace reaccionar químicamente un ADN genómico, procedente de una muestra de ADN, con un reactivo, reaccionando de manera diferente la 5-metilcitosina y la citosina, y por consiguiente éstas, después de la reacción, muestran un diferente comportamiento de apareamiento de bases en el dúplex de ADN; (b) se amplifica el ADN tratado previamente mediando utilización de una polimerasa y de por lo menos un oligonucleótido (tipo A) como cebador; (c) se hibrida el ADN genómico amplificado con por lo menos un oligonucleótido (del tipo B) mediando formación de un dúplex, en que los mencionados oligonucleótidos hibridados del tipo B delimitan con su extremo 3'', directamente o a una cierta distancia de hasta 10 bases, con las posiciones que han de ser investigadas en lo que se refiere a su metilación en la muestra de ADN genómico; (d) el oligonucleótido (tipo B), que tiene una secuencia conocida de n nucleótidos, se prolonga mediante una polimerasa por un máximo de diez nucleótidos, empleándose una pluralidad de nucleótidos, llevando por lo menos un nucleótido una marcación detectable y dependiendo la prolongación del estado de metilación de la respectiva citosina en la muestra de ADN genómico; (e) los oligonucleótidos prolongados se investigan en cuanto a la presencia de la marcación.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: EPIGENOMICS AG.

Nacionalidad solicitante: Alemania.

Dirección: KASTANIENALLEE 24,10435 BERLIN.

Inventor/es: OLEK, ALEXANDER, BERLIN, KURT.

Fecha de Publicación: .

Fecha Concesión Europea: 14 de Mayo de 2008.

Clasificación PCT:

  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS... > Procesos de medida, investigación o análisis en... > C12Q1/68 (en los que intervienen ácidos nucleicos)
google+ twitter facebook