Cubierta para una cámara de recuento, determinación de viabilidad, análisis y manipulación.
Una cubierta de plástico transparente (28) (88) (128) para colocación sobre un portaobjetos (24) (90) (122) para observar un fluido situado en el portaobjetos (24) (90) (122),
incluyendo la cubierta (28) (88) (128):
un cuerpo de cubierta (28) (88) (128) que tiene una superficie superior (74) (140) y una superficie inferior opuesta (32) (136), siendo porciones de la superficie inferior (32) (136) paralelas a una región de observación anular (78) (92) (144) en la superficie superior (74) (140), una abertura central de entrada de muestra (62) (132) y un agujero de ventilación (72) (142) que se extiende a través del cuerpo de cubierta (28) (88) (128) con la región de observación anular (78) (92) (144) colocada entremedio, rodeando la región de observación anular (78) (92) (144) la abertura central de entrada de muestra (62) (132), también un tratamiento superficial de oscurecimiento (76) en una porción del cuerpo de cubierta (28) (88) (128) que rodea la región de observación anular (78) (92) (144), y al menos un nervio (50) (134) que sobresale hacia abajo de la superficie inferior (32) (136), donde en el uso la cubierta (28) (88) (128) está montada sobre una superficie (30) (124) de un portaobjetos transparente (24) (90) (122), y donde la superficie inferior (32) (136) de la cubierta (28) (88) (128) está espaciada de la superficie (30) (124) del portaobjetos (24) (90) (122) por el al menos único nervio (50) (134) para definir un canal de flujo capilar (60) en comunicación de fluido con la abertura central de entrada de muestra (62) (132) y el agujero de ventilación (72) (142).
Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E10176272.
Solicitante: MofA Group LLC.
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 117 East Green Bay Street, P.O. Box 49 Shawano, WI 54166-0469 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.
Inventor/es: SIMMET, LUDWIG, O.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- B01L3/00 TECNICAS INDUSTRIALES DIVERSAS; TRANSPORTES. › B01 PROCEDIMIENTOS O APARATOS FISICOS O QUIMICOS EN GENERAL. › B01L APARATOS DE LABORATORIO PARA LA QUIMICA O LA FISICA, DE USO GENERAL (aparatos de uso médico o farmacéutico A61; aparatos para aplicaciones industriales o aparatos de laboratorio cuya estructura y funciones son comparables a las de aparatos industriales similares, ver las clases relativas a los aparatos industriales, en particular las subclases B01 y C12; aparatos de separación o de destilación B01D; dispositivos de mezcla o de agitación B01F; atomizadores B05B; tamices, cribas B07B; tapones, capuchones B65D; manipulación de líquidos en general B67; bombas de vacío F04; sifones F04F 10/00; grifos, válvulas F16K; tubos, empalmes para tubos F16L; aparatos especialmente adaptados al estudio y análisis de materiales G01, particularmente G01N; aparatos eléctricos u ópticos, ver las subclases apropiadas en las secciones G y H). › Recipientes o utensilios para laboratorios, p. ej. cristalería de laboratorio (botellas B65D; equipos para enzimología o microbiología C12M 1/00 ); Cuentagotas (recipientes para volumetría G01F).
- G01N15/14 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 15/00 Investigación de características de partículas; Investigación de la permeabilidad, del volumen de los poros o del área superficial efectiva de los materiales porosos (identificación de microorganismos C12Q). › Investigación por medios electroópticos.
- G02B21/34 G […] › G02 OPTICA. › G02B ELEMENTOS, SISTEMAS O APARATOS OPTICOS (G02F tiene prioridad; elementos ópticos especialmente adaptados para ser utilizados en los dispositivos o sistemas de iluminación F21V 1/00 - F21V 13/00; instrumentos de medida, ver la subclase correspondiente de G01, p. ej. telémetros ópticos G01C; ensayos de los elementos, sistemas o aparatos ópticos G01M 11/00; gafas G02C; aparatos o disposiciones para tomar fotografías, para proyectarlas o para verlas G03B; lentes acústicas G10K 11/30; "óptica" electrónica e iónica H01J; "óptica" de rayos X H01J, H05G 1/00; elementos ópticos combinados estructuralmente con tubos de descarga eléctrica H01J 5/16, H01J 29/89, H01J 37/22; "óptica" de microondas H01Q; combinación de elementos ópticos con receptores de televisión H04N 5/72; sistemas o disposiciones ópticas en los sistemas de televisión en colores H04N 9/00; disposiciones para la calefacción especialmente adaptadas a superficies transparentes o reflectoras H05B 3/84). › G02B 21/00 Microscopios (oculares G02B 25/00; sistemas polarizantes G02B 27/28; microscopios de medida G01B 9/04; micrótomos G01N 1/06; técnicas o aparatos de sonda de barrido G01Q). › Platinas de microscopios, p. ej. montaje de muestras sobre las platinas de microscopio (preparación de muestras para el análisis G01N 1/28; medios de soporte de los objetos o materiales sometido al análisis en los microscopios electrónicos H01J 37/20).
PDF original: ES-2504241_T3.pdf
Fragmento de la descripción:
Cubierta para una cámara de recuento, determinación de viabilidad, análisis y manipulación Antecedentes de la invención Aquí se explican dispositivos para visualizar especímenes para examen bajo ampliación en general, y más en concreto dispositivos para hacer el recuento, la manipulación y la determinación de viabilidad de células.
Ante la demanda creciente de productos agrícolas de calidad en un mercado agrícola cada vez más competitivo, las técnicas de inseminación artificial animal (IA) se están difundiendo como medio efectivo de lograr ganado de mejor calidad, reduciendo al mismo tiempo los costos y la mano de obra implicados en las técnicas de cría naturales.
Las técnicas de IA requieren la recogida de semen de un animal macho productor, y la inseminación del animal hembra en un tiempo posterior, y generalmente en una posición más o menos alejada del lugar de recogida. Una consecuencia es que el semen a usar puede estar sujeto a degradación o decadencia debido a los efectos de la temperatura, el tiempo o el stress del transporte y almacenamiento. Por lo tanto, hay que analizar la cantidad y el vigor del esperma dentro de una muestra, al determinar las cualidades de fertilización de un eyaculado concreto en el extremo de producción, así como en algunos casos en el extremo de inseminación.
Una prueba es el recuento de las cantidades de esperma activo o motil dentro de un volumen de semen dado. El recuento se lleva a cabo con un microscopio o utilizando un fotómetro o con un fotómetro, y solamente considera un subconjunto muy pequeño de toda la muestra. Sin embargo, dado que el sujeto del recuento se está moviendo, la presencia de límites en la zona de recuento puede complicar desventajosamente el procedimiento de recuento. Si la zona de recuento retiene la muestra dentro de límites, la presencia de los límites puede afectar a la exactitud del procedimiento de recuento a causa del efecto que los límites tienen en la distribución del esperma dentro de la zona de muestra. Por ejemplo, parte del esperma se concentrará junto a un límite.
Algunos contadores de células, o hemocitómetros, minimizan los límites colocando una sola gota de muestra líquida entre dos placas ópticas formadas con precisión. Sin embargo, estos dispositivos son muy costosos, y por lo tanto deben ser esterilizados y reutilizados. Otros dispositivos desechables emplean una capa serigrafiada para definir canales entre un portaobjetos y una cubierta. Sin embargo, estos dispositivos se basan por lo general exclusivamente en la acción capilar para carga, y deben ser manejados con cuidado para evitar la introducción de burbujas de aire que evitarían el llenado completo de las cámaras de espécimen. Además, los dispositivos de la técnica anterior a menudo alojan solamente una cantidad muy pequeña de líquido, a veces de sólo 1, 3 μl, lo que hace problemáticos los análisis que tardan más de unos pocos minutos en realizarse, puesto que el espécimen se puede secar, especialmente, cuando, en el caso de células de esperma, el espécimen se mantiene por encima de la temperatura ambiente en una platina de microscopio caliente.
Además, los dispositivos convencionales no se cargan fácilmente mientras están bajo observación, haciendo difícil los análisis comparativos de especímenes antes y después de la adición de alguna sustancia.
Un dispositivo para supervisar un volumen líquido se describe en la Patente de Estados Unidos número 4.761.381.
Lo que se necesita es un dispositivo desechable de bajo costo para presentar una capa fina de grosor conocido de una muestra que permita realizar mediciones visuales repetibles y exactas en la muestra.
Resumen de la invención La presente invención se refiere a una cubierta de plástico transparente para colocar sobre un portaobjetos para observar un fluido situado en el portaobjetos, incluyendo la cubierta:
un cuerpo de cubierta que tiene una superficie superior y una superficie inferior opuesta, siendo las porciones de la superficie inferior paralelas a una región de observación anular en la superficie superior, una abertura central de entrada de muestra y un agujero de ventilación que se extiende a través del cuerpo de cubierta con la región de observación anular colocada entremedio, rodeando la región de observación anular la abertura central de entrada de muestra, rodeando además un tratamiento superficial de oscurecimiento en una porción del cuerpo de cubierta la región de observación anular, y al menos un nervio que sobresale hacia abajo de la superficie inferior, donde en el uso la cubierta se monta sobre una superficie de un portaobjetos transparente, y donde la superficie inferior de la cubierta está espaciada de la superficie del portaobjetos por el al menos único nervio para definir un canal de flujo capilar en comunicación de fluido con la abertura central de entrada de muestra y el agujero de ventilación.
La superficie inferior del cuerpo de cubierta puede definir un canal de rebosamiento rebajado en comunicación con el agujero de ventilación. El tratamiento superficial de oscurecimiento puede incluir depresiones anulares concéntricas o puede incluir un efecto grabado o esmerilado. El cuerpo de cubierta puede incluir además un orificio de entrada secundario que se extiende a través del cuerpo de cubierta dentro de la región de observación anular. La
cubierta de plástico transparente puede no tener paredes que obstruyan el flujo de líquido. La cubierta de plástico transparente puede tener una pluralidad de nervios. El plástico de la cubierta puede incluir copolímeros de olefina cíclica.
La cubierta de plástico transparente de esta invención puede ser usada con un portaobjetos de plástico transparente en un dispositivo de análisis para proporcionar una herramienta de análisis desechable de costo razonable para facilitar el recuento o la determinación de células dentro de un volumen definido de muestra fluida, por ejemplo para asistencia en técnicas de inseminación artificial en ganado.
Una característica de la presente invención es proporcionar una herramienta de laboratorio desechable que facilite la observación exacta de células contenidas dentro de una muestra fluida.
Otra característica de la presente invención es proporcionar una herramienta económica que facilite la presentación de un volumen definido de muestra fluida con un grosor constante para observación evitando al mismo tiempo el efecto que los bordes dentro de una zona de visión pueden tener en una muestra o sus partes componentes.
También se describe un dispositivo para facilitar el recuento de células que se puede llenar rápida y sistemáticamente con la muestra a analizar.
También se describe un dispositivo que permite observaciones prolongadas de muestras y que permite que el medio de cultivo de muestra sea complementado mientras la muestra es objeto de observación.
También se describe un método de analizar especímenes bajo ampliación tanto antes como después de la adición de sustancias que actúan sobre el espécimen.
Otras características y ventajas de la invención serán evidentes por la descripción detallada siguiente tomada en unión con los dibujos acompañantes.
Breve descripción de los dibujos La figura 1 es una vista en planta superior fragmentaria de un dispositivo de análisis incluyendo la cubierta de plástico transparente de esta invención, parcialmente cortada en sección.
La figura 2 es una vista en sección transversal del dispositivo de la figura 1, incluyendo la cubierta de plástico transparente de la invención, que ha recibido una muestra líquida, y tomada a lo largo de la línea de sección 2-2.
La figura 3 es una vista isométrica despiezada del dispositivo de la figura 1, con dos cubiertas de la invención despiezadas del portaobjetos, y una cubierta de la invención representada en una posición montada.
La figura 4 es una vista en sección transversal ampliada del dispositivo de la figura 1, incluyendo la cubierta de plástico transparente de la invención, tomada a lo largo de la línea de sección 4-4.
La figura 5 es una vista en perspectiva fragmentaria, parcialmente cortada en sección, de una cámara de espécimen alternativa, representada con una pipeta en vista despiezada.
La figura 6 es una vista en planta fragmentaria ampliada del lado inferior de la cubierta de la figura 1, que representa un solo nervio.
La figura 7 es una vista en sección transversal fragmentaria ampliada de un dispositivo alternativo, que tiene un rebaje de recepción de cola en el lado inferior del perímetro de la cubierta.
La figura 8 es una vista en sección transversal de un dispositivo... [Seguir leyendo]
Reivindicaciones:
1. Una cubierta de plástico transparente (28) (88) (128) para colocación sobre un portaobjetos (24) (90) (122) para observar un fluido situado en el portaobjetos (24) (90) (122) , incluyendo la cubierta (28) (88) (128) :
un cuerpo de cubierta (28) (88) (128) que tiene una superficie superior (74) (140) y una superficie inferior opuesta
(32) (136) , siendo porciones de la superficie inferior (32) (136) paralelas a una región de observación anular (78)
(92) (144) en la superficie superior (74) (140) , una abertura central de entrada de muestra (62) (132) y un agujero de ventilación (72) (142) que se extiende a través del cuerpo de cubierta (28) (88) (128) con la región de observación
anular (78) (92) (144) colocada entremedio, rodeando la región de observación anular (78) (92) (144) la abertura central de entrada de muestra (62) (132) , también un tratamiento superficial de oscurecimiento (76) en una porción del cuerpo de cubierta (28) (88) (128) que rodea la región de observación anular (78) (92) (144) , y al menos un nervio (50) (134) que sobresale hacia abajo de la superficie inferior (32) (136) , donde en el uso la cubierta (28) (88)
(128) está montada sobre una superficie (30) (124) de un portaobjetos transparente (24) (90) (122) , y donde la 15 superficie inferior (32) (136) de la cubierta (28) (88) (128) está espaciada de la superficie (30) (124) del portaobjetos (24) (90) (122) por el al menos único nervio (50) (134) para definir un canal de flujo capilar (60) en comunicación de fluido con la abertura central de entrada de muestra (62) (132) y el agujero de ventilación (72) (142) .
2. La cubierta de plástico transparente (128) de la reivindicación 1, donde la superficie inferior (136) del cuerpo de 20 cubierta (128) define un canal de rebosamiento rebajado (130) en comunicación con el agujero de ventilación (142) .
3. La cubierta de plástico transparente (28) (88) (128) de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, donde el tratamiento superficial de oscurecimiento (76) incluye depresiones anulares concéntricas.
4. La cubierta de plástico transparente (28) (88) (128) de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, donde el tratamiento superficial de oscurecimiento (76) incluye un efecto grabado o esmerilado.
5. La cubierta de plástico transparente (88) de la reivindicación 1, donde el cuerpo de cubierta (88) incluye además un orificio de entrada secundario (86) que se extiende a través del cuerpo de cubierta (88) dentro de la región de 30 observación anular (92) .
6. La cubierta de plástico transparente (28) (88) (128) de la reivindicación 1, que no tiene paredes que obstruyan el flujo de líquido.
7. La cubierta de plástico transparente (28) (88) (128) de cualquier reivindicación anterior, que tiene una pluralidad de nervios.
8. La cubierta de plástico transparente (28) (88) (128) de cualquier reivindicación anterior, donde el plástico incluye copolímeros de olefina cíclica. 40
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